Принципи нормування питної води. ОКБ та ТКБ: мембранний та титраційний методи

Коментарі до таблиці.Оцінюючи кількість ОКБ і ТКБ у 100 см 3 води, слід аналізувати щонайменше три обсяги води (по 100 см 3 кожен). При оцінці ОКБ та ЗМЧ перевищення нормативу не допускається у 95% проб, що відбираються протягом року. Коліфаги визначають тільки в системах водопостачання з поверхневих джерел перед подачею води в розподільчу мережу, те саме стосується наявності цист лямблій. Зміст спор сульфітредукуючих клостридій визначають лише в оцінці ефективності технології обробки води. У разі виявлення ТКБ, ОКБ, коліфагів або хоча б одного із зазначених показників знову проводять повторне екстрене дослідження води на ТКБ, ОКБ та коліфаги. Паралельно проводять дослідження води на хлориди, амонійний азот, нітрати та нітрити. Якщо і в повторно взятій пробі виявляються ОКБ більше двох у 100 см 3 та/або ТКБ, та/або коліфаги, проводять дослідження на патогенні бактерії кишкової групи та/або ентеровіруси. Таке ж дослідження на патогенні ентеробактерії та ентеровіруси проводять за епідеміологічними показаннями за рішенням територіальних центрів Росспоживнагляду.

Термотолерантні коліформні бактерії (ТКЛ)входять до складу ОКБ і мають всі їхні ознаки, але, на відміну від них, здатні ферментувати лактозу до кислоти, альдегіду і газу при температурі +44 °С протягом 24 год. Таким чином, ТКБ відрізняються від ОКБ здатністю ферментувати лактозу до кислоти і газу при вищій температурі.

Визначені показники, кількість і періодичність досліджень залежить від типу джерела водопостачання, чисельності населення, що забезпечується водою з системи водопостачання. Ці дані наведені в СанПіН 2.1.4.1074–01. У методичних вказівках щодо санітарно-мікробіологічного аналізу питної води ( МУК 4.2.1018-01 Міністерства охорони здоров'я РФ) регламентовано методи санітарно-мікробіологічного контролю якості питної води.

Загальна кількість мікроорганізмів- це загальна кількість видимих ​​при дворазовому збільшенні мезофільних (мають температурний оптимум +37 °С) аеробних і факультативно анаеробних мікроорганізмів (МАФАнМ), які здатні утворювати колонії на живильному агарі при температурі +37 °С протягом 24 год. стерильну чашку Петрі вносять 1 мл води і заливають розплавленим (температура не вище +50 ° С) м'ясопептонним агаром, а через добу підраховують кількість колоній, що виросли.

ВИЗНАЧЕННЯ ОКБ І ТКБ МЕТОДОМ МЕМБРАННИХ ФІЛЬТРІВ

Метод ґрунтується на фільтруванні певних обсягів води через мембранні фільтри. Для цих цілей використовують фільтри з діаметром пор 0,45 мкм та розміром 35 або 47 мм у діаметрі (вітчизняні фільтри «Владипор» МФАС–С–1, МФАС–С–2, МФАС–МА (№ 4–6) або закордонні - ISO 9000 чи EN 29000). Мембранні фільтри готують до аналізу відповідно до інструкцій заводу - виробника.

ВИЗНАЧЕННЯ ОКБ І ТКБ ТИТРАЦІЙНИМ МЕТОДОМ

Метод заснований на накопиченні бактерій після посіву певних об'ємів води в рідкі живильні середовища, з подальшим пересіванням на диференціальне щільне середовище з лактозою та ідентифікації колоній з культуральних та біохімічних тестів. При дослідженні питної води якісним методом (поточний санепіднагляд) засівають три об'єми по 100 см 3 . При дослідженні води з метою кількісного визначення ОКБ та ТКБ (повторний аналіз) засівають відповідно 100, 10 та 1 см 3 - по три обсяги кожної серії.

САНІТАРНО-МІКРОБІОЛОГІЧНЕ ДОСЛІДЖЕННЯ ҐРУНТУ

Ґрунт дає притулок різноманітним мікроорганізмам. Так, кількість тільки бактерій у ґрунті досягає 10 млрд. клітин в 1 р. Мікроорганізми беруть участь у ґрунтоутворенні та самоочищенні ґрунту, у кругообігу в природі азоту, вуглецю та інших елементів. У ній крім бактерій мешкають гриби, найпростіші і лишайники, що є симбіозом грибів з ціанобактеріями. На поверхні ґрунту мікроорганізмів відносно мало через згубну дію УФ-променів, висушування та інших факторів. Орний шар ґрунту товщиною 10-15 см містить найбільшу кількість мікроорганізмів. У міру поглиблення кількість мікроорганізмів зменшується аж до їх зникнення на глибині 3–4 м. Склад мікрофлори ґрунту залежить від його типу та стану, складу рослинності, температури, вологості тощо. Більшість ґрунтових мікроорганізмів здатні розвиватися при нейтральному рН, високій відносній вологості, температурі від 25 до 45 °С.

У ґрунті живуть спороутворюючі палички пологів Bacillusі Closlridium.Непатогенні бацили (Вас. megaterium, Вас. subtilisта ін.). поряд з псевдомонадами, протеєм та деякими іншими бактеріями є амоніфікуючими, складаючи групу гнильних бактерій, що здійснюють мінералізацію. органічних речовин. Патогенні спороутворюючі палички (збудники сибірки, ботулізму, правця, газової гангрени) здатні довго зберігатися, а деякі навіть розмножуватися в грунті ( Clostridiumbotulinum). Ґрунт є також місцем проживання азотфіксуючих бактерій, що засвоюють молекулярний азот (Azotobacter, Azomonas, Mycobacteriumта ін.). Азотфіксуючі різновиди ціанобактерій, або синьо-зелених водоростей, застосовують для підвищення родючості рисових полів.

Представники сімейства кишкових бактерій (сім. Enterobacteriaceae) -кишкова паличка, збудники черевного тифу, сальмонельозів та дизентерії, потрапивши у ґрунт із фекаліями, відмирають. У чистих ґрунтах кишкова паличка та протей зустрічаються рідко; Виявлення бактерій групи кишкової палички (коліформних бактерій) у значних кількостях є показником забруднення ґрунту фекаліями людини та тварин і свідчить про її санітарно-епідеміологічне неблагополуччя через можливість передачі збудників кишкових інфекцій. Кількість найпростіших у ґрунті коливається від 500 до 500 000 на 1 г ґрунту. Харчуючи бактеріями та органічними залишками, найпростіші викликають зміни у складі органічних речовин ґрунту. У ґрунті знаходяться також численні гриби, токсини яких, накопичуючись у продуктах харчування людини, викликають інтоксикації – мікотоксикози та афлатоксикози.

Результати дослідження ґрунтів враховують при визначенні та прогнозі ступеня їх небезпеки для здоров'я та умов проживання населення в населених пунктах (за епідеміологічними показаннями), профілактиці інфекційної та неінфекційної захворюваності (попереджувальний санітарний нагляд), поточному санітарному контролі за об'єктами, що прямо чи опосередковано впливають .

При проведенні поточного санітарного нагляду за станом ґрунту обмежуються коротким санітарно-мікробіологічним аналізом, що вказує на наявність та ступінь фекального забруднення. Показники, включені до цієї групи, також характеризують процеси самоочищення ґрунту від забруднювачів органічної природи та ентеробактерій. Повний санітарно-мікробіологічний аналіз ґрунту проводять у формі запобіжного санітарного нагляду. Вплив хімічних полютантів на біогеоценоз передбачає дослідження їх бактерицидної дії на ґрунтову мікробіоту, як наслідок: зміна спільноти ґрунтових мікроорганізмів, ферментативної активності ґрунту. За епідемічними показаннями проводять індикацію патогенної мікробіоти.

У лабораторії з 5 точкових проб ґрунту, взятих з однієї ділянки, готують усереднену пробу, ретельно перемішуючи і розтираючи в стерильній фарфоровій чашці гумовим товкачем протягом 5 хв. Сторонні домішки (коріння рослин, каміння, тріски) видаляють шляхом просіювання ґрунту через сито, яке попередньо протирають ватним тампоном, змоченим 96% етиловим спиртом. З усередненої проби відбирають навішування (від 1 до 50-55 г залежно від переліку показників) і готують суспензію 1:10 на стерильній водопровідній воді (10 г грунту на 90 см 3 води). Для десорбції мікроорганізмів з поверхні ґрунтових частинок підготовлену ґрунтову суспензію струшують протягом 3 хв на мішалці механічного диспергатора. Після відстоювання суспензії протягом 30 с, готують послідовні 10-кратні розведення ґрунту до концентрації 10 -4 -10 -5 г/см 3 .

Оцінку результатів санітарно-мікробіологічного дослідження ґрунтів проводять шляхом зіставлення даних, отриманих на дослідних та контрольних ділянках ґрунтів однакового складу, розташованих у безпосередній територіальній близькості. Схеми оцінки санітарного стану ґрунту на підставі окремих санітарно-мікробіологічних критеріїв представлені в МУ № 14446-76(Табл. 2).

Таблиця 2. Схема оцінки санітарного стану ґрунту за мікробіологічними показниками (за МУ № 1446-76)

У МУ 2.1.7.730–99 «Гігієнічна оцінка якості ґрунту населених місць»представлено схему оцінки епідемічної небезпеки ґрунтів населених місць. В даному документі для оцінки інтенсивності біологічного навантаження на ґрунт використовуються такі показники як БГКП та індекс ентерококів, а для оцінки епідемічної небезпеки ґрунту – патогенні ентеробактерії та ентеровіруси.

ДОСЛІДЖЕННЯ МІКРОБНОГО ОБСЄМЕННОСТІ ПОВІТРЯНОГО СЕРЕДОВИЩА

У повітря потрапляють мікроорганізми з ґрунту, води і з поверхні тіла, з дихальних шляхів і з краплями слини людини і тварин. Тут виявляються кокоподібні та паличкоподібні бактерії, бацили, клостридії, актиноміцети, гриби та віруси. Повітря розглядають як фактор передачі респіраторних інфекцій, при яких збудник передається повітряно-краплинним або повітряно-пиловим шляхом. Сонячні промені та інші фактори сприяють загибелі мікрофлори повітря. Для зниження мікробної обсіменіння повітря проводять вологе прибирання приміщення в поєднанні з вентиляцією та очищенням (фільтрацією) повітря, що надходить. Застосовують також аерозольну дезінфекцію та обробку приміщень лампами ультрафіолетового випромінювання (наприклад, у мікробіологічних лабораторіях та операційних блоках).

Багато мікроорганізмів міститься в повітрі закритих приміщень, мікробна обсімененість яких залежить від умов прибирання приміщення, рівня освітленості, кількості людей у ​​приміщенні, частоти провітрювання та ін. Особливо мало мікроорганізмів у повітрі над лісами, горами та морями.

Мікробіологічне дослідження повітря передбачає визначення загального вмісту мікроорганізмів, а також стафілококів в 1 м3 повітря. В окремих випадках проводять дослідження повітря на грамнегативні бактерії, плісняві та дріжджоподібні гриби. За епідемічними показаннями спектр збудників, що виявляються в повітрі, може бути розширений.

Проби повітря відбирають методом аспірації з використанням апарату Кротова.

Цілком допускається використання седиментаційного методу Коха. Дослідженню підлягають наступні приміщення ЛПЗ – операційні блоки, перев'язувальні та процедурні кабінети, асептичні палати (бокси), палати відділення анестезіології та реанімації, палати та коридори лікувальних відділень, приміщення аптек, стерилізаційних та акушерсько-гінекологічних відділень та станцій.

Дослідження повітря методом Коха використовують у рідкісних випадках для орієнтовної оцінки ступеня мікробного забруднення повітря. Для визначення загальної кількості мікроорганізмів у повітрі операційних до початку роботи відкривають чашки з живильним агаром і встановлюють їх приблизно на висоті операційного столу – одну чашку в центрі та чотири в кутах приміщення («метод конверта») на 10 хв, а для виявлення золотистого стафілокока ( використовуються чашки з жовтково - сольовим агаром (ЖСА) - на 40 хв. 2 поверхні живильного середовища за 5 хв експозиції осідає така кількість бактерій, що міститься в 10 л повітря (в 1 м 3 міститься 1000 літрів). має виявлятися.

САНІТАРНО-МІКРОБІОЛОГІЧНИЙ КОНТРОЛЬ ОБ'ЄКТІВ ПРОДОВОЛЬЧОГО ПРИЗНАЧЕННЯ

Харчові продукти можуть обсіменятися різними мікроорганізмами, що призводить до їх псування, розвитку харчових токсикоінфекцій та інтоксикацій, а також таких інфекцій як сибірка, бруцельоз, туберкульоз та ін. Захворювання тварини, травми або несприятливі умови її утримання сприяє порушенню захисних бар'єрів організму та транслокації (перенесення) мікроорганізмів у звичайно стерильні тканини та органи (прижиттєве обсіменіння). В результаті відбувається обсіменіння тканин забитої тварини протями, клостридіями та іншими мікробами; потрапляння при маститах у молоко стафілококів та стрептококів. Можливе і вторинне обсіменіння мікроорганізмами харчових продуктів. І тут джерелом забруднення є об'єкти довкілля(Грунт, вода, транспорт і т.д.) а також хворі люди та бактеріоносії. При низькій температурі зберігання м'яса та м'ясних продуктів навіть у замороженому м'ясі можуть переважати мікроби, здатні до розмноження у психрофільних умовах (псевдомонади, протей, аспергіли, пеніцили та ін.). Мікроби, що мешкають у м'ясі, викликають його ослизнення; у ньому розвиваються процеси бродіння та гниття, викликані клостридіями, протеєм, псевдомонадами та грибами.

Злакові культури, горіхи в умовах підвищеної вологості можуть забруднюватись грибами (аспергілами, пеніциллами, фузаріум та ін), що спричиняє розвиток харчових мікотоксикозів.

М'ясні страви (студні, салати з м'яса, страви з м'ясного фаршу) можуть з'явитися причиною захворювань, пов'язаних з сальмонелами, шигелами, діареєгенними кишковими паличками, протеєм, ентеротоксигенними штамами стафілококів, ентерококами, Closlridium perfringensі Bacillus cereus.

Молоко та молочні продукти можуть бути фактором передачі збудників бруцельозу, туберкульозу та шигельозу. Можливий також розвиток харчових отруєнь внаслідок розмноження у молочних продуктах сальмонел, шигел та стафілококів. Яйця, яєчний порошок та меланж при ендогенному первинному інфікуванні сальмонелами яєць, особливо качиних, є причиною сальмонельозу.

Риба та рибні продукти частіше забруднюються бактеріями Closlridium botulinumі Vibrio parahaemolylicus- збудниками харчових інтоксикацій та токсикоінфекцій. Ці захворювання спостерігаються і при вживанні рибних продуктів, забруднених великою кількістю сальмонел, протею, Bacillus cereus, Closlridium perfringens.

Овочі та фрукти можуть забруднюватися та обсіменяються діареєгенними кишковими паличками, шигелами, протеєм, ентеропатогенними штамами стафілококів. Солоні огірки можуть бути причиною токсикоінфекції, спричиненої Vibrio parahаemolyticus.

Усі результати мікробіологічного аналізу харчових продуктів можна отримати не раніше 48–72 год, тобто. коли продукт може бути реалізований. Тому контроль за цими показниками має ретроспективний характер і служить цілям санітарно - гігієнічної оцінки підприємства, що виробляє або реалізує харчові продукти.

Виявлення підвищеної загальної мікробної обсіменіння, коліформних бактерій дозволяє припустити порушення температурного режиму при приготуванні та/або зберіганні готового продукту. Виявлення патогенних мікроорганізмів розцінюють як показник епідеміологічного неблагополуччя їдальні, підприємства торгівлі.

Нормування мікробіологічних показників безпеки харчових продуктів здійснюється більшість груп мікроорганізмів за альтернативним принципом, тобто. нормується маса продукту, де не допускаються бактерії групи кишкових паличок, більшість умовно - патогенних мікроорганізмів, і навіть патогенні мікроорганізми, зокрема. сальмонели та Listeria monocytogenes. В інших випадках норматив відображає кількість колонієутворюючих одиниць в 1 г (см 3) продукту (КОЕ/г, см 3).

У продуктах масового споживання, для яких у таблицях СанПіН 2.3.2.1078-01. Гігієнічні вимоги до безпеки та харчової цінності харчових продуктіввідсутні мікробіологічні нормативи, патогенні мікроорганізми, зокрема. сальмонели, що не допускаються в 25 г продукту.

Санітарно-бактеріологічному контролю обов'язково повинні піддаватися об'єкти приготування та реалізації харчової продукції

Дані санітарно-мікробіологічного дослідження дають змогу об'єктивно оцінити санітарно-гігієнічний стан обстежуваних об'єктів, виявити порушення санітарного режиму та оперативно проводити цілеспрямовані заходи щодо їх усунення.

Розрізняють кілька способів відбору проб з різного обладнання та інвентарю для мікробіологічного дослідження: способи тампонних змивів, відбитків, агарової заливки. З них найчастіше використовують спосіб тампонних змивів.

Санітарно-мікробіологічний контроль заснований на виявленні у змивах бактерій групи кишкових паличок (БГКП) – показників фекального забруднення досліджуваних предметів. Дослідження на стафілокок, патогенні бактерії сімейства кишкових, визначення загальної мікробної обсіменіння проводять за показаннями. Наприклад, взяття змивів для виявлення стафілококів необхідне при обстеженнях кондитерських цехів, молочних кухонь та харчоблоків лікувальних закладів.

Об'єкти санітарно-мікробіологічного контролю:

∨ змиви з рук та спецодягу працівників харчування (водопостачання);

∨ обладнання, інвентар, посуд та інші об'єкти;

∨ готові страви, кулінарні та швидкопсувні вироби;

∨ сировину та напівфабрикати в процесі технологічного процесу (за епідпоказаннями);

∨ питна вода централізованого та особливо децентралізованих джерел водопостачання.

Змив з рук персоналу, зайнятого обробкою сирих продуктів, забирають до початку роботи. Змив доставляють до бактеріологічної лабораторії протягом 2 годин. Допускається їх зберігання та транспортування не більше 6 годин при температурі +1–10 °С.

У лабораторії виробляють посіви змивів на середовищі Кесслер з лактозою або КОДА, при цьому в пробірку з середовищем опускають тампон і переносять змивну рідину, що залишилася. Посіви на середовищах Кесслер та КОДА інкубують за 37 °С.

Через 18-24 год. з усіх пробірок з середовищем Кесслер виробляють висів на сектори чашок з середовищем Ендо, з середовища КОДА висів роблять тільки у разі зміни забарвлення середовища (з вихідного фіолетового до жовтого або зеленого) або його помутніння. Посіви на середовищі Ендо вирощують при 37 ° С 18-24 год.

З колоній, характерних для БГКП, готують мазки, забарвлюють за Грамом, мікроскопують, при необхідності додатково ідентифікують за загальноприйнятими тестами для бактерій групи кишкових паличок. При оцінці результатів санітарно-мікробіологічного обстеження виходять із нормативів, що у змивах, взятих з об'єктів продовольчого призначення, БГКП мають бути відсутніми. Виявлення БГКП у змивах з чистих поверхонь, підготовлених до роботи предметів, інвентарю, обладнання, рук та санітарного одягу персоналу свідчить про порушення санітарного режиму. У разі повторного виявлення БГКП у значному відсотку змивів рекомендується провести дослідження змивів на наявність патогенних ентеробактерій. При цьому виробляють посів тампона та змивної рідини на середовищі збагачення - селенітовий бульйон або магнієве середовище (можливе використання середовищ Мюллера та Кауфмана). Подальше дослідження проводять за загальноприйнятою методикою.

ДОСЛІДЖЕННЯ МОЛОКУ ТА МОЛОЧНИХ ПРОДУКТІВ

МІКРОФЛОРА МОЛОЧНИХ ПРОДУКТІВ

Молоко є дуже сприятливим живильним середовищем у розвиток багатьох мікроорганізмів. Після вживання в їжу інфікованого молока та молочних продуктів можуть виникати такі інфекції, як черевний тиф, дизентерія, холера, ешеріхіози, бруцельоз, туберкульоз, скарлатина, ангіна, Ку - лихоманка, ящур, кліщовий енцефаліт, сальмонелінфекція.

Розрізняють специфічну та неспецифічну мікрофлору молока та молочних продуктів.

До специфічної мікрофлори молока та молочних продуктів відносять мікробів - збудників молочнокислого, спиртового та пропіоновокислого бродіння. Мікробіологічні процеси за рахунок життєдіяльності цих мікроорганізмів лежать в основі приготування кисломолочних продуктів (сиру, кефіру, кислого молока, ацидофіліну та ін.).

Бактерії молочнокислого бродіння вважаються нормальною мікрофлорою молока та молочних продуктів . Головну роль при скисанні молока та молочних продуктів відіграють молочнокислі стрептококи. S. lactis, S. cremarisта ін. Менш активні раси молочнокислих стрептококів ( S. citrovorus, S. lactis subsp. diacetylactis) продукують леткі кислоти та ароматичні речовини і тому широко використовуються при отриманні сирів. До групи молочнокислих бактерій також входять молочнокислі палички: Lactobacterium bulgaricum, Lactobacterium casei, Lactobacterium acidophilusі т.д.

Основними збудниками спиртового бродіння в молоці та молочних продуктах є дріжджі ( Saccharomyces lactisта ін.).

Неспецифічну мікрофлору молока складають гнильні бактерії ( Proteus), аеробні та анаеробні бацили ( В. subtilis, В. megatherium, C. putrificum) і багато інших

Мікробне обсіменіння молока починається вже у вимені. У процесі доїння відбувається додаткове його обсіменіння з поверхні шкіри вимені, з рук, з судини, куди воно надходить і повітря приміщення. Інтенсивність цього додаткового обсіменіння загалом залежить від цього, наскільки дотримуються елементарні санітарно - гігієнічні умови при отриманні молока. Погані умови зберігання молока також можуть сприяти подальшому наростанню в ньому мікрофлори.

Бактерицидна фаза. Свіжовидоїне молоко, хоч і містить уже сотні мікробів в 1 см 3 (головним чином, стафілококи і стрептококи), має бактерицидні властивості за рахунок присутності в ньому нормальних антитіл. Тому протягом деякого періоду розвиток бактерій у молоці затримується. Цей період називають бактерицидною фазою. Тривалість бактерицидної фази коливається в межах 2-36 годин залежно від фізіологічних особливостей тварини (у ранньому періоді лактації бактерицидність молока вища).

Зберігання молока при підвищеній температурі (30-37 ° С) різко скорочує тривалість бактерицидної фази. Такий вплив впливає і інтенсивне додаткове обсіменіння молока мікробами.

Після того, як бактерицидна фаза закінчилася, настає розвиток мікрофлори. Видовий склад її змінюється у часі під впливом змін біохімічних властивостей середовища та внаслідок антагоністичних та симбіотичних взаємин між мікробними видами.

Фаза змішаної мікрофлори. Вона триває близько 12 год. У цей період ще не настає переважання будь-яких видових груп мікробів, оскільки велика кількість поживного субстрату і просторові можливості дозволяють досить вільно розвиватися багатьом видам мікроорганізмів.

Фаза молочнокислих стрептококів. У цій фазі одержують переважання мікроорганізми названої групи ( S. lactis, S. termofilus, S. cremorisта ін.). Лактоза посилено перетворюється ними на молочну кислоту, реакція змінюється на кислу сторону. Накопичення молочної кислоти веде, надалі до відмирання молочнокислих стрептококів та зміні їх більш кислотостійкими молочнокислими бактеріями. Це настає через 48 годин, знаменуючи початок третьої фази.

Фаза молочнокислих паличок. У ній панівне становище набувають паличкоподібних форм молочнокислих бактерій. ( L. lactis, L. crusei, L. bulgaricumта ін.). Утворюється кислої реакції середовища призводить до пригнічення росту та поступового відмирання інших видів бактерій.

До кінця третьої фази подальші можливості розвитку молочнокислої мікрофлори вичерпуються, але в зміну приходять грибки, котрим молочна кислота служить поживним субстратом.

Фаза грибкової мікрофлори. У цей період розвиваються плісняви ​​та дріжджі, життєдіяльність яких призводить до втрати продуктом своєї харчової цінності. Дріжджі представлені головним чином видами з роду Torula, Рідше виявляються деякі види сахароміцетів.

З плісняв зустрічаються: молочна пліснява ( Oidium lactis), що покриває у вигляді гармата поверхню кислого молока і сметани, а також аспергілові, пеніцилові та мукорові.

Дія грибкової флори веде до нейтралізації середовища, а це робить його знову придатним для бактерій. Настає розвиток гнильних бактерій, що викликають протеоліз казеїну, і, нарешті, групи анаеробних спороутворюючих маслянокислих бактерій.

Діяльність мікрофлори, що змінюється, припиняється тільки з настанням повної мінералізації всіх органічних речовин молока.

За деяких умов процес зміни мікробних біоценозів може відхилятися від наведеної вище схеми. Так, молочнокислі бактерії можуть бути від початку пригнічені мікробами групи кишкових паличок, якщо останні присутні у великій кількості. Дріжджі можуть виробляти помітні концентрації спирту, що є у таких продуктах, як кефір (0,2–0,6%) і, особливо, кумис (0,9–2,5%). Наявність спирту створює умови для подальшого розвитку оцтовокислих бактерій, що зброджують спирт в оцтову кислоту. Наявність у молоці антибіотиків та інших інгібуючих та нейтралізуючих мікрофлору речовин також може уповільнювати молочнокислі процеси.

При цьому методі аналізу води певна кількість води пропускається через спеціальну мембрану з розміром пор близько 0.45 мкм. В результаті, на поверхні мембрани залишаються всі бактерії, що знаходяться у воді. Після чого мембрану з бактеріями поміщають на певний час у спеціальне живильне середовище при температурі 30-37 про С. Під час цього періоду, званого інкубаційним, бактерії отримують можливість розмножитися та утворити добре помітні колонії, які вже легко піддаються підрахунку. В результаті можна спостерігати таку: Або навіть таку картину: Оскільки такий метод аналізу води передбачає лише визначення загальної кількостіколонії - утворюють бактерій різних типів, то за його результатами не можна однозначно судити про присутність у воді патогенних бактерій. Однак, високе мікробне число свідчить про загальну бактеріологічну забрудненість води та про високу ймовірність наявності патогенних організмів.

При аналізі води треба контролювати не лише вміст токсичних хімічних речовин, а й кількість мікроорганізмів, що характеризують бактеріологічне забруднення питної води ОМЧ-загальне мікробне число.

Санітарно-мікробіологічне дослідження води проводиться в плановому
порядку з метою поточного нагляду, а також по спеціальних епідеміологічних
ким показанням. Основними об'єктами такого дослідження є:

Питна вода центрального водопостачання (водопровідна вода);

Питна вода нецентралізованого водопостачання;

Вода поверхневих та підземних вододжерел;

Стічні води;

Вода прибережних зон морів;

Вода басейнів.

Основними показниками оцінки мікробіологічного стану питної води згідно з чинними нормативними документами є:

1. Загальне мікробне число (ОМЧ) – кількість мезофільних бактерій в 1 мл воли.

Коли титр- найменший об'єм води (в мл), у якому виявлено хоча б одну живу
мікробна клітина, що відноситься до БГКП.
Індекс БДКП- кількість БГКП за 1 л води.

3. Кількість спор сульфітредукуючих клостридій у 20 мл води.

4. Число коліфагів у 100 мл води.

Визначення ЗМЧ дозволяє оцінити рівень мікробіологічного забруднення питної води. Цей показник незамінний для термінового виявлення масивного мікробного забруднення.

Загальне мікробне число- це число мезофільних аеробних та факультативно анаеробних мікроорганізмів, здатних утворювати на живильному агарі при гемперазурі 37 ° С та протягом 24 годин колонії, видимі при дворазовому збільшенні.

При визначенні загального мікробного числа 1 мл досліджуваної води вносять у стерильну чашку Петрі та заливають 10-12 мл теплого (44 ° С) розплавленого живильного агару. Середовище акуратно перемішують з водою, рівномірно і
без бульбашок повітря розподіляючи дном чашки, після чого закривають кришкою і залишають до застигання. Посіви інкубують у термостаті при 37 °С протягом 24 годин. Підраховують загальну кількість колоній, які виросли в обох чашках, і визначають середнє значення. Остаточний результат виражають числом колонієутворюючих одиниць (КОЕ) в 1 мл досліджуваної води. В 1 мл питної води має бути не більше 50 ДЕЯ

Визначення БДКП
При цьому визначають загальні коліформні бактерії – ОКБ та термотолерантні коліформні бактерії – ТКБ.

ОКБ – грамамотрицатсльние, які не утворюють суперечку палички, що ферментують лактозу до кислоти і газу при температурі 37°С протягом 24 48 годин. ТКБ входять до числа ОКБ, обладжують їх ознаками, але ферментую при 44 ° С. Для визначення ентеробактерій - метод мебранних фільтрів або титраційний.

Мікробне число - основними критеріями оцінки мікробіологічного стану питної води,виходячи з чинних нормативних документів, є ЗМЧ (загальне мікробне число), яке характеризує кількість аеробних та анаеробних бактерій в одному мілілітрі води, що утворюються за добу при температурі 37 градусів, у живильному середовищі. Цей показник є фактично незамінним швидкого виявлення масового мікробного забруднення.

Для визначення загального мікробного числаодин мл досліджуваної води вносять у стерильну чашку Петрі, потім заливають 10-15 мл теплого (близько 44 ° С) поживного агару в розплавленому вигляді. Середовище акуратно змішують з водою, рівномірно і без повітряних бульбашок повітря розподіляють по дну чашки, після чого закривають кришкою і залишають у чашці Петрі до застигання. Те саме роблять в іншій чашці. Посів у термостаті інкубують за температури 37 °С протягом доби. Потім при дворазовому збільшенні під мікроскопом підраховують загальну кількість колоній, що виросли у двох чашках, і визначають середнє значення. В 1 мл питної води не повинно бути більше 50 КУО.

Особливості стрептококів як СПМ:

Стрептококи не дуже стійкі у навколишньому середовищі, вони можуть зберігатися лише протягом кількох днів у пилу приміщень, на білизні, предметах побуту хворого. Однак терміни збереження їхньої життєздатності близькі до тривалості життя ряду патогенних бактерій, що потрапляють у навколишнє середовище повітряно-краплинним шляхом (наприклад, таких як збудник дифтерії та ін.)

Показником свіжішого забруднення повітря приміщень є α-гемолітичний стрептокок як найменш стійкий. У повітрі незаселених людиною приміщень стрептококи не виявляються.

Методи індикації та ідентифікації стрептококів складніші і трудомісткі порівняно з такими стафілококів.

Термофіли

Особливе місце серед СПМ займають термофільні мікроби, присутність яких у грунті або воді водойм свідчить про забруднення їх гною, компостом або фекаліями людей, що розклалися.

До термофільних мікроорганізмів відносяться грампозитивні бактерії, коки, бацили, спірили, актиноміцети, деякі види грибів, які здатні активно розмножуватися при температурі 60 0 С і вище. Більшість термофілів – аероби.

Термофільні мікроорганізми розмножуються в компостних купах і гною, в яких завдяки їхній життєдіяльності відбувається нагрівання до 60-70 0 С поверхневих шарів. У таких умовах йде процес біотермічного знешкодження органічних мас, що піддаються самонагріванню, гинуть патогенні мікроорганізми та кишкові палички.

Таким чином, присутність термофілів свідчить про давнє забруднення ґрунту компостами, при цьому БГКП (ОКБ) виявляються у незначних кількостях. І, навпаки, високий титр БГКП (ОКБ) за малої кількості термофілів – показник нового фекального забруднення.

Термофіли є також санітарно-показовими мікроорганізмами для характеристики окремих етапів процесу мінералізації органічних відходів.

САНІТАРНА МІКРОБІОЛОГІЯ ВОДИ

Вода є природним середовищем проживання різноманітних. мікроорганізмів (різні види бактерій, гриби, найпростіші та водорості). Сукупність усіх водних організмів називається мікробіальний планктон. На кількісний склад мікрофлори основний вплив надає походження води - прісні поверхневі (проточні води річок, струмків; стоячі озер, ставків, водосховищ), підземні (грунтові, грунтові, артезіанські), атмосферні та солоні води. За характером користування виділяють питну воду (централізованого та місцевого водопостачання), воду плавальних басейнів, лід медичний та господарську. Особливої ​​уваги вимагають стічні води.

Мікрофлору водойм утворюють дві групи:

Автохтонні (або водні) та

Аллохтонні (що потрапляють ззовні при забрудненні із різних джерел) мікроорганізми.

1. Автохтонна мікрофлора – сукупність мікроорганізмів, які постійно живуть і розмножуються у воді. Як правило, мікрофлора води нагадує мікробний склад ґрунту, з яким вода стикається. До її складу входять мікрококи, сарцини, деякі види Proteus і Leptospira. З анаеробів – Bacillus cereus та деякі види клостридій. Ці мікроорганізми грають значну рольу кругообігу речовин, розщеплюючи органічні відходи, клітковину та ін.

2. Біологічне забруднення водойм.

Зі стічними, зливовими, талими водами у водойми потрапляють багато видів мікроорганізмів, що різко змінюють мікробний біоценоз. Основний шлях мікробного забруднення – потрапляння неочищених міських відходів та стічних вод. Також – при купанні людей, худоби, пранні білизни та ін. У воду можуть потрапляти представники нормальної мікрофлори людини, УП, патогенної (збудники кишкових інфекцій, лептоспірозів, єрсиніозів, віруси поліомієліту, гепатиту А тощо). Слід пам'ятати, що вода не є сприятливим середовищем для розмноження патогенних мікроорганізмів, для яких біотоп є організм людини або тварин.

Самоочищення водойм

Звільнення від контамінуючих мікроорганізмів спостерігається після органічного забруднення водойм за рахунок конкурентної активації сапрофітної мікрофлори, що призводить до швидкого розкладання органічних речовин, зменшення чисельності бактерій, особливо «фекальних». Існує термін «сапробність» - (sapros-гнилий, грец.) Позначає комплекс особливостей водойми, у тому числі склад і кількість мікроорганізмів у воді, що містить органічні та неорганічні речовини у певних концентраціях. Процеси самоочищення води у водоймах відбуваються послідовно та безперервно. Розрізняють полісапробні, мезасапробні та олігосапробні зони.

Полісапробні зони- Зони сильного забруднення. Містять велику кількість органічних речовин і майже позбавлені кисню. Кількість бактерій в 1 мл води у полісапробній зоні досягає мільйона і більше.

Мезасапробні зони- Зони помірного забруднення. Кількість мікроорганізмів – сотні тисяч на 1 мл.

Олігосапробні зони- Зони чистої води. Характеризуються процесом самоочищення, що закінчився. Кількість бактерій від 10 до 1000 в 1 мл води.

Таким чином, патогенні мікроорганізми, що потрапляють у водойму, досить рясні в полісапробних зонах, поступово відмирають у мезосапробних і практично не виявляються в олігосапробних зонах.

При санітарно-мікробіологічному дослідженні води виділяють ОКБ, ентерококи, стафілококи та патогенні мікроорганізми (сальмонели, холерні вібріони, лептоспіри, шигели та ін.). Усі санітарно-мікробіологічні дослідження води регламентують відповідні ГОСТ.

Підстави для санітарно-мікробіологічного дослідження води:

Вибір джерела централізованого водопостачання та контроль за ним;

контроль ефективності знезараження питної води централізованого водопостачання;

Спостереження за підземними джерелами водопостачання (артезіанські свердловини, ґрунтові води тощо);

Спостереження за джерелами індивідуального водокористування (колодязі, джерела та ін.);

Спостереження за санітарно-епідеміологічним станом води відкритих водойм;

контроль ефективності знезараження води плавальних басейнів;

Перевірка якості очищення та знезараження стічних вод;

Розслідування водяних спалахів інфекційних хвороб.

Санітарно-мікробіологічний аналіз питної води

В даний час регламентується Методичними вказівками МУК 4.2.1018-01.

1. Визначення ЗМЧ– загальна кількість мезофільних аеробних та факультативно-анаеробних мікроорганізмів, здатних утворювати колонії на живильному агарі при t 0 37 0 C протягом 24 годин.

З кожної проби роблять посів не менше двох об'ємів по 1 мл у 2 чашки. години. Потім підраховують всі виросли на чашці колонії зі збільшенням у 2 разу (але не більше 300 колоній на чашці). Кількість колоній на чашках підсумовують і ділять на 2 – результат виражають у КУО на 1 мл води. Допускається до 50 КУО на 1 мл води.

Визначення загальних та термотолерантних коліформних бактерійметодом мембранної фільтрації (основний метод).

Загальні коліформні бактерії.грам-, оксидаза-, що не утворюють спор палички, здатні рости на диференціальних лактозних середовищах, що ферментують лактозу до КГ при t 37 0 С протягом 24 годин.

Термотолерантні коліформні бактерії.входять до числа ОКБ, мають всі їхні ознаки, крім того, здатні ферментувати лактозу до КГ при t 0 44 0 С протягом 24 годин.

Метод заснований на фільтрації встановленого об'єму води через мембранні фільтри, вирощуванні посівів на диференціальному поживному середовищі з лактозою та подальшій ідентифікації колоній за культуральними та біохімічними ознаками.

Аналізують 3 обсяги по 100 мл, можна дробити обсяги (10, 40, 100, 150 мл). Відміряний обсяг води фільтрують через мембранні фільтри. Фільтри поміщають на середовище Ендо (до трьох фільтрів на 1 чашку) і інкубують t 0 37 0 протягом 24 годин.

Якщо немає зростання – негативний результат – ОКБ та ТКБ не виявлено. Якщо є типові лактозопозитивні колонії з відбитком на звороті фільтра, підраховують, підтверджують їхню приналежність до ОКБ та ТКБ. Для цього досліджується

Оксидазна активність

Приналежність до грамнегативних бактерій

Ферментація лактози до КГ (у двох пробірках – при t 0 37 0 С та 44 0 С).

Результат вираховують за формулою Х=а∙100/V, де

а – число колоній (у сумі),

V-обсяг води (у сумі),

Х – число колоній 100 мл води.

Результат виражають у КУО ОКБ (ТКБ) в 100 мл води. У нормі ОКБ (ТКБ) 100 мл води питної не повинні визначатися.

Також визначають

Суперечки сульфітредукуючих клостридій– спороутворюючі анаеробні паличкоподібні бактерії, що редукують сульфіт натрію на залізо-сульфітному агарі при t 0 44 0 С протягом 16-18 годин. Метод заснований на вирощуванні посівів у залізо-сульфітному агарі в умовах, наближених до анаеробних, та підрахунку числа чорних колоній.

Об'єм води 20 мл прогрівають на водяній бані 75-80 0 С протягом 15 хвилин для виключення вегетативних форм, потім фільтрують через бактеріальний фільтр, який поміщають у пробірку з розплавленим залізо-сульфітним агаром (70-80 0 С), остуджують, поміщають термостат 0 44 0 С на 16-18 годин.

Визначення коліфагів.

Коліфаги – віруси бактерій, здатні лізувати E. coliта формувати приt 0 37 0 С через 18-20 годин зони лізису бактеріального газону (бляшки) на живильному агарі. Число бляшок не підраховується - якісний аналіз.

Дослідження стічних водрегламентується МУ 2.1.5.800 – 99 «Організація Держсанепіднагляду за знезараженням стічних вод», 1999 рік. Застосовують прямий посів на 4 чашки із середовищем Ендо по 0,5 мл (2 мл – весь об'єм). Потім підраховують кількість КУО ОКБ і ТКБ, роблять перерахунок на 100 мл води.

Вода басейнів досліджується за Санітарно-епідеміологічними правилами та нормативами - СанПіН 2.1.2.1188-03. У 100 мл водибасейнівдопускається не більше 1 ДЕЯ ОКБ, не допускається ТКБ, коліфаги, золотистий стафілокок, збудники кишкових інфекцій, синьогнійна паличка. Лабораторний контроль за основними мікробіологічними показниками (ОКБ, ТКБ, коліфаги та золотистий стафілокок) проводиться 2 рази на місяць. Дослідження на наявність збудників кишкових інфекцій проводяться за несприятливої ​​епідемічної ситуації.

При появі спорадичних випадків пневмоній неясної етіології або виникнення серед відвідувачів басейну епідемічних позасезонних спалахів ГРЗ проводяться дослідження води на наявність легіонел ( Legionella pneumophilia), розмноженню яких сприяє тепла водата бризки. При диханні дрібнодисперсний аерозоль, що містить легіонели, потрапляє в легені, що може спричинити хворобу легіонерів або понтіакську лихоманку.

Додаток №2

До СанПіН 2.1.2.1188-03

ЗАХВОРЮВАННЯ ІНФЕКЦІЙНОЇ ПРИРОДИ,

ЯКІ МОЖУТЬ ПЕРЕДАВАТИСЯ ЧЕРЕЗ ВОДУ ПЛАВАЛЬНИХ БАСЕЙНІВ

САНІТАРНА МІКРОБІОЛОГІЯ ҐРУНТУ

Ґрунт є головним резервуаром та природним середовищем проживання мікроорганізмів, які беруть участь у процесах самоочищення ґрунту, а також у кругообігу речовин у природі. Якісний склад ґрунту дуже різноманітний і включає переважно спороутворюючі бактерії, актиноміцети, спірохети, найпростіші, синьо-зелені водорості, мікоплазми, гриби та віруси. Найбільш різноманітний мікробний пейзаж у навколокореневій зоні рослин – ризоферна зона. Кількість мікроорганізмів у ґрунті досягає кількох мільярдів на 1 р. Жива маса мікроорганізмів у ґрунті на 1 га – близько 1000 кг.

Мікроорганізми розподілені у ґрунті нерівномірно. На поверхні (1-2 мм) їх мало. Найбільш різноманітна та численна мікрофлора на глибині 10-20 см, де йдуть основні біохімічні процеси перетворення органічних речовин. При цьому патогенні мікроорганізми і представники нормальної мікрофлори тіла людини і тварин, що потрапили в ґрунт, як правило, довго не виживають. Однак багато бактерій, що входять до складу нормальної мікрофлори людини, також включаються в біоценоз грунту. Існує труднощі у поділі мікрофлори ґрунту на резидентну та тимчасово присутню. Для з'ясування ролі ґрунту у передачі інфекційних хвороб необхідно знати можливу тривалість збереження патогенних бактерій у ґрунті.

1-я групавключає патогенні мікроорганізми, що постійно мешкають у ґрунті, наприклад, Clostridium botulinum. Бактерії потрапляють у ґрунт із випорожненнями людини та тварин, їх суперечки зберігаються в ній невизначено довго.

2-я групавключає спороутворюючі патогенні мікроорганізми, для яких ґрунт є вторинним резервуаром. Бактерії потрапляють у ґрунт із виділеннями людини та тварин, а також з трупами загиблих тварин. За сприятливих умов можуть розмножуватися і зберігатися як суперечка тривалий час.

3-я групавключає патогенні мікроорганізми, що потрапляють у ґрунт з виділеннями людини та тварин і зберігаються протягом декількох тижнів або місяців. До неї входять споронетворні бактерії.

Санітарно-мікробіологічне дослідження води проводять з урахуванням комплексу показників: загальна кількість сапрофітних мікроорганізмів та наявність СПМ (ОКБ, ТКЛ, Clostridium perfringens та ін.). Висока чисельність сапрофітної мікрофлори свідчить про органічне забруднення, при мікробній контамінації переважають СПМ.

САНІТАРНА МІКРОБІОЛОГІЯ ПОВІТРЯ

Повітря є середовищем, у якому мікроорганізми не здатні розмножуватися. Бактеріальна обсімененість повітря закритих приміщень завжди перевищує обсімененість атмосферного повітря, у тому числі і патогенними мікроорганізмами, що потрапляють у повітря від хворих людей, тварин та бактеріоносіїв. Мікрофлору повітря умовно поділяють на резидентну (частіше виявляється) і тимчасову, менш стійку до впливу різних факторів (виявляють спорадично).

Постійна мікрофлора повітря формується за рахунок ґрунтових мікроорганізмів. В основному це мікрококи, сарцини, B. subtilis, деякі види Actinomices, Penicillum, Aspergillus та ін.

Тимчасова мікрофлора повітря також формується переважно за рахунок мікроорганізмів ґрунту, а також за рахунок видів, що надходять із поверхні водойм.

Контамінація повітря патогенними мікроорганізмами відбувається переважно крапельним шляхом у складі аерозолю, що утворюється при розмові, кашлі, чханні. Залежно від розміру крапель, їх електричного заряду, швидкості руху в повітрі аерозоль може мати краплинну та пилову фази, а також краплинні ядерця.

а) Крапельна фаза –представлена ​​дрібними краплями, що довго зберігаються в повітрі і випаровуються до осідання.

Б) Пилова фаза –представлена ​​великими краплями, що швидко осідають і випаровуються; в результаті утворюється пил, здатний підніматися в повітряне середовище.

в) Краплинні ядерця -дрібні крапельки аерозолю (до 100 нм), висихаючи, залишаються у повітрі у зваженому стані та утворюють стійку аеродисперсну систему. Вони частково зберігається волога, що підтримує життєздатність мікроорганізмів. Останні у складі краплинних ядерців можуть переноситися на значні відстані.

Санітарно-мікробіологічні дослідження повітря.

Основним завданням досліджень є гігієнічна та епідеміологічна оцінка повітряного середовища, а також розробка комплексу заходів, спрямованих на профілактику аерогенної передачі збудників інфекційних хвороб При оцінці санітарного стану закритих приміщень залежно від завдань дослідження визначають ЗМЧ, наявність СПМ (стафілококів, α- та β-гемолітичних стрептококів, які є показниками контамінації мікрофлорою носоглотки людини).

Відбір проб у закритих приміщеннях: точки відбору на кожні 20 м 2 – одна проба, на кшталт конверта.

Методи відбору: -седиментаційні та

Аспіраційні - засновані на примусовому осадженні мікроорганізмів з повітря на поверхню щільного живильного середовища або в рідину, що вловлює. Використовують прилад для відбору проб повітря (ПОВ – 1), пробовідбірник бактеріологічний аерозольний (ПАБ – 1). Відбір проб проводять зі швидкістю 20-25 л/хв протягом 5-4 хвилин. Т.ч. визначається мікрофлора в 100 л повітря.

Дослідження мікробного обсіменіння повітряного середовища в лікувальних закладахпроводять відповідно до Наказу №720 від 31 липня 1978 року «Про поліпшення медичної допомоги хворим з гнійними хірургічними захворюваннями та посилення заходів щодо боротьби з внутрішньолікарняною інфекцією».

Бактеріологічне дослідження передбачає:

Визначення загального вмісту мікробів (ЗМЧ) в 1 м3 повітря;

Визначення вмісту золотистого стафілококу в 1 м3 повітря. Відбір проб проводять у наступних приміщеннях:

Операційні блоки;

Перев'язувальний;

Післяопераційні палати;

Відділення та палати реанімації та ін. приміщеннях, що вимагають асептичних умов.

Проби повітря відбирають аспіраційним методом зі швидкістю протягування повітря 25 л/хв. Кількість пропущеного повітря має становити 100 літрів для визначення ЗМЧ та 250 літрів для визначення наявності золотистого стафілокока.

Критерії оцінки мікробної обсіменіння повітря

у хірургічних клініках

САНІТАРНО-МІКРОБІОЛОГІЧНІ ДОСЛІДЖЕННЯ У МЕДИЧНИХ УСТАНОВАХ

Основним нормативним документомє Наказ №720 від 31 липня 1978 року «Про поліпшення медичної допомоги хворим з гнійними хірургічними захворюваннями та посилення заходів щодо боротьби з внутрішньолікарняною інфекцією». У додатку 2 представлено Інструкцію з бактеріологічного контролю комплексу санітарно-гігієнічних заходів у лікувально-профілактичних закладах (відділеннях хірургічного профілю, у палатах та відділеннях реанімації та інтенсивної терапії).

Бактеріологічні лабораторії центрів санепіднагляду та дезінфекційних станцій проводять контроль не рідше двох разів на рік, баклабораторії лікувальних установ контролюють санітарно-гігієнічний режим (обсімененість різних об'єктів та повітря) один раз на місяць, а контроль стерильності інструментів, перев'язувального матеріалу, операційної білизни рук хірургів та шкіри операційного поля (вибірково) – один раз на тиждень.

Дослідження мікробної обсіменіння об'єктів зовнішнього середовища

Бактеріологічне дослідження мікробної обсіменіння предметів довкілля передбачає виявлення стафілокока, синьогнійної палички, бактерій групи кишкових паличок БГКП (ОКБ). Забір проб із поверхонь різних об'єктів здійснюють методом змивів. Взяття змивів роблять стерильним ватним тампоном на паличках, вмонтованих у пробірки, або марлевими серветками, розміром 5*5 см. Для зволоження тампонів та серветок використовують стерильний фізрозчин. При контролі дрібних предметів змив забирають із поверхні всього предмета. При контролі предметів з великою поверхнею змив проводять у кількох місцях досліджуваного предмета площею приблизно 100-200 см 2 .

Для виділення стафілококів роблять посів безпосередньо на чашку Петрі з жовтково-сольовим агаром (ЖСА) та бульйони накопичення (6,5% сольової та з 1% глюкози). Далі працюють за схемою дослідження на стафілокок.

Для виявлення БГКП (ОКБ) Виробляють посів на середу збагачення Кесслера або 10-20% жовчний бульйон. Через добу інкубування при 37°С роблять пересівання на середовище Ендо. Підозрювальні колонії на середовищі Ендо (лактозопозитивні) мікроскопують та ідентифікують за схемою.

Для виявлення синьогнійної палички Спеціальні посіви можна не виробляти. Зазвичай колонії синьогнійної палички вдається виявити на кров'яному агарі чи середовищі Ендо. Далі – дослідження за схемою.

Орієнтовний перелік об'єктів, що підлягають

бактеріологічного контролю

А. Наркозна кімната

1. Інтубаційна трубка

2. Маска наркозного апарату

3. Трійник наркозного апарату

4. Гофрована трубка

5. Ларингоскоп

6. Роторозширювач

7. Дихальний мішок

8. Руки лікарів-анестезіологів-реаніматологів, сестер-анестезіологів

Б. Передопераційна

1. Тази для миття рук хірургів

2. Чисті щітки для миття рук

3. Фартухи (клінчасті та поліетиленові)

В. Операційна

1. Робочий стіл анестезіологів

2. Операційний стіл

3. Шланг кисневої підводки

4. Змив з рук усіх, хто бере участь в операції

5. Шкіра операційного поля

Г. Післяопераційні палати, відділення та палати

Реанімації та інтенсивної терапії

Ліжко, підготовлене для хворого

Рушник для рук персоналу та змив з рук

Щітка на раковині

Шланг кисневої підводки

Запасна наркозна апаратура (набір реанімаційного укладання)

Шланг вакуумвідсмоктувача

Внутрішня поверхняхолодильника (для зберігання ліків)

Градусники

Д. Перев'язувальна

1. Кушетка для перев'язок

2. Рушник для рук персоналу

3. Щітка на раковині

4. Халат медичних сестер

5. Руки лікарів, медичних сестер

6. Робочий медичний стіл

7. Внутрішня поверхня холодильника для зберігання ліків

Контролює стерильність виробів медичного призначення

Раніше проводився також відповідно до Наказу № 720, на даний час робота ведеться Методичним вказівкамз дезінфекції, передстерилізаційного очищення та стерилізації виробів медичного призначення – МУ 287-113-98 р.

Контроль стерильності виробів, простерилізованих у ЛПЗ, проводять у спеціально обладнаних приміщеннях, дотримуючись асептичних умов, що унеможливлюють вторинну контамінацію виробів мікроорганізмами.

У стаціонарах, мають централізовані стерилізаційні, контролю на стерильність підлягає щонайменше 1% від кількості одночасно простерилізованих виробів одного найменування.

У стаціонарах, які не мають централізованих стерилізаційних та здійснюють стерилізацію у відділеннях, контролю на стерильність підлягають не менше двох одночасно простерилізованих виробів одного найменування.

В основі гігієнічних вимогдо якості води для питних та побутових потреб лежить принцип, що ставить у центр уваги якості води, від яких залежать здоров'я людини та умови її життя. Відповідно до сучасного санітарного законодавства питна вода має бути безпечною в епідемічному та радіаційному відношенні, нешкідливою по хімічного складута мати сприятливі органолептичні властивості.

Безпека питної води в епідемічному відношенні визначається її відповідністю нормативам за мікробіологічними показниками. Мікробіологічний склад питної води є основним показником її якості та придатності споживання. При цьому враховуються як бактеріальне, так і вірусне забруднення.

Епідеміологічна безпека питної води в СанПіН оцінюється за декількома показниками. Велика роль серед них приділяється термотолератним коліформам як справжнім показникам фекального забруднення та загальним коліформам.

Загальні коліформні бактерії (ОКБ) – грамнегативні, оксидазонегативні, які не утворюють суперечку палички, здатні рости на диференціальних лактозних середовищах, що ферментують лактозу до кислоти та газу при температурі +37 протягом 24-48 годин.

Термотолерантні коліформні бактерії (ТКБ) входять до складу ОКБ і мають всі їхні ознаки, але на відміну від них, здатні ферментувати лактозу до кислоти, альдегіду і газу при температурі +44 протягом 24 годин. Таким чином, ТКБ відрізняється від ОКБ здатністю ферментувати лактозу до кислоти та газу за більш високої температури. Термотолерантні та загальні коліформи повинні бути відсутніми у 100 мл питної води (у будь-якій із проб при триразовій повторності аналізу).

У розподільчій мережі великих централізованих систем питного водопостачання (за кількості досліджуваних проб щонайменше 100 протягом року) допускається 5% нестандартних проб за загальним коліформам, але не двох послідовно відібраних пробах у одній точці.

Загальна чисельність мікроорганізмів (загальне мікробне число - ЗМЧ) визначається зростання на м'ясопептонному агарі при температурі інкубації 37. Цей показник використовують для характеристики ефективності очищення питної води, його необхідно розглядати при спостереженні за якістю води в динаміці. Різке відхилення ЗМЧ навіть у межах нормативного значення (але не більше 50 в 1 мл) є сигналом про порушення в технології водопідготовки. Зростання ЗМЧ у воді розподільчої мережі може свідчити про її неблагополучний санітарний стан, що сприяє розмноженню мікроорганізмів через накопичення органічних речовин або негерметичність, що тягне за собою підсмоктування забруднених грунтових вод.

Аеробні сапрофіти становлять лише частину загальної кількості мікробів у воді, але є важливим санітарним показником якості води, оскільки між ступенем забруднення її органічними речовинами та мікробним числом існує пряма залежність. Крім того, вважають, що чим вище загальне мікробне число, тим більша ймовірність присутності у воді патогенних мікроорганізмів. Мікробне число у водопровідній воді має перевищувати 100.

Безпека питної води в епідемічному відношенні визначається її відповідністю нормативам за мікробіологічними показниками (таблиця 1).

Таблиця 1. Мікробіологічні показники питної води

Поняття про санітарно-показові мікроорганізми

Основні вимоги до санітарно-показових мікроорганізмів: 1. вони повинні мати загальне природне середовище проживання з патогенними мікроорганізмами і виділяються у зовнішнє середовище у великій кількості; 2. у довкілля санітарно-показові мікроорганізми повинні по можливості рівномірно розподілятися і бути більш стійкими, ніж патогенні. Вони повинні довше зберігатися у воді, практично не розмножуючись, мати більшу стійкість до впливу різних несприятливих факторів, у них має меншою мірою проявлятися мінливість властивостей та ознак; 3. Методи визначення санітарно-показових мікроорганізмів повинні бути простими, і мати достатній рівень достовірності.

З позиції санітарної мікробіології оцінка якості води проводиться з метою визначення її санітарно-епідеміологічної небезпеки чи безпеки. Для здоров'я. Вода відіграє важливу роль у передачі збудників багатьох інфекцій, головним чином кишкових.

Пряме кількісне визначення всіх інфекцій для контролю якості води неможливе у зв'язку з різноманіттям їх видів і трудомісткості аналізу.

Аналіз лише однієї проби води на можливу присутність у ній збудників черевного тифу, паратифу А, паратифу В, дизентерії, інфекційної жовтяниці, водяної лихоманки та туляремії повністю завантажив би весь персонал навіть великої бактеріологічної лабораторії. З іншого боку, відповідь у разі було б лише після 2-3 тижнів, тобто. тоді, коли населення давно вже випило досліджувану воду.

З огляду на очевидну недоцільність докладного визначення нешкідливості води, ще в наприкінці XIXстоліття робилися спроби замінити пошуки всіх водних патогенних мікробів одним будь-яким мікробом нехай хоча б і непатогенним, зате постійно присутнім у людських фекаліях. Тоді можна було б вважати, що якщо досліджувана вода справді забруднена фекаліями, вона може бути небезпечною для пиття, оскільки серед здорового населення можуть зустрічатися як хворі, так і бацилоносії. Пошуки таких бактеріологічних індикаторів фекального забруднення мали успіх. Виявилося, що у фекаліях людини постійно присутні три наступні мікроби: 1) кишкові палички; 2) ентерококи; 3) анаеробні спороутворюючі бактерії, головним чином Bac. perfingens.

Таким чином, у побутових стічних водахпереважає кишкова паличка. Але справа не лише у її більшому змісті. Основна цінність бактеріального індикатора фекального забруднення у тому, щоб його відмирання більшості патогенних мікробів. Лише за дотримання цієї умови мікроб, постійно присутній у фекаліях людини, буде показником фекального забруднення.

Якщо з цієї точки зору підійти до виявлених постійних жителів кишечника, то виявиться таке: мікроби групи Bac. perfingens зберігається у воді набагато довше патогенних мікробів; ентерококи, навпаки, гинуть набагато швидше; Що ж до кишкової палички, то час її збереження у воді приблизно відповідає часу виживання патогенних мікробів.

Тому головним санітарно-бактеріологічним показником води є кишкова паличка. Тільки в Росії, єдиній країні світу, якість води контролюють за бактеріями групи кишкової палички (індекс БГКП). У цю групу входять усі представники групи кишкових бактерій та умовно-патогенні представники.

Відповідно до ГОСТ 2874-73 і ГОСТ 18963-73 до бактерій групи кишкових паличок (БГКП) відносяться грамнегативні, не утворюють спор палички, що зброджують лактозу або глюкозу до кислоти і газу при 37о за 24 години і не мають оксидазної активності. До БДКП належать представники різних пологів- Escherichia, Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella, але всі вони виділяються в довкілля з кишечника людини та тварин. У зв'язку з цим виявлення в навколишньому середовищі слід розглядати, як показник фекального забруднення.

З пологів, що входять до складу БГКП, найбільш санітарно-показове значення має рід Escherichia. Присутність всіх цих бактерій у навколишньому середовищі сприймається як свіже фекальне забруднення.

Ешеріхії – є одним із фонових видів кишечника людини та тварин. Рід Escherichia, що включає типовий вигляд E.coli, показник свіжого фекального забруднення, можлива причина токсикінфекції. Представників роду, що у воді трактують як термотолерантні коліформні бактерії.

Цитробактер – мешкають у стічних водах, ґрунті та інших об'єктах зовнішнього середовища, а також у випорожненнях здорових та хворих на ОКІ людей. Належать до групи умовно-патогенних бактерій. (Мікробіологічний словник-довідник, 1999)

До недоліків цитробактера як СПМО відносяться такі:

1. Велика кількість аналогів у зовнішньому середовищі.

2. мінливість у зовнішньому середовищі.

3. недостатня стійкість до несприятливих впливів.

4. здатність до розмноження у питній воді.

5. нечіткий індикатор навіть щодо присутності сальмонел.

Дослідження останніх роківвиявили відсутність прямої кореляції між наявністю у воді патогенних бактерій та індикаторів. У регіонах з інтенсивним антропогенним навантаженням на водні об'єкти відмічено зниження вмісту індикаторних мікроорганізмів зі зміною їх біологічних та культуральних властивостей на тлі кількісного переважання потенційних патогенних та патогенних бактерій.

Ентеробактер – мешкають у кишечнику людини та інших тварин, зустрічаються у грунті, воді, харчових продуктах, викликають кишкові, урогенітальні, респіраторні, гнійно-запальні захворювання людини.

Клебсієли - мешкають у воді, ґрунті, у харчових продуктах, у кишечнику та дихальних шляхах людини, ссавців, птахів.

У 1910р. на роль СПМО запропоновані ентерококи (Enterococcus faecalis, Enterococcus faecium).

Ентерококи – рід факультативно-анаеробних аспорогенних хемоорганотрофних грам+бактерій. Клітини поліморфні. Широко поширені у природі. Є одним з фонових видів кишечника людини, ссавців, птахів. Нерідко виявляються у складі флори шкіри промежини та статевих шляхів, порожнин носа, глотки, носа. Довго виживають у ґрунті, харчових продуктах.

Переваги ентерококу як СПМО:

1. постійно перебуває у кишечнику людини і постійно виділяється у довкілля. При цьому Enterococcus faecalis переважно мешкає в кишечнику людини, тому виявлення його свідчить про забруднення фекаліями людей. Найменшою мірою у людини зустрічається Enterococcus faecium. Останній, в основному, виявляється до кишечнику тварин, хоча порівняно рідко також відзначається і Enterococcus faecalis.

2. не здатний розмножуватися у зовнішньому середовищі, в основному розмножується Enterococcus faecium, але має менше епідеміологічне значення.

3. не змінює своїх властивостей у зовнішньому середовищі.

4. не має аналогів у зовнішньому середовищі.

5. стійкий до несприятливих впливів довкілля. Ентерокок у 4 рази стійкіший до хлору порівняно з кишковою паличкою. Це його головна перевага. Завдяки цій ознакі ентерокок використовують при перевірці якості хлорування води, а так само як індикатор якості дезінфекції. Витримує температуру 60оС, що дозволяє використовувати його як показник якості пастеризації. стійкий до концентрацій кухонної солі 6,5-17%. Стійкий до рН у діапазоні 3-12.

6. для індикації ентерококів розроблені високоселективні середовища. Виживання ентерококу у воді наближається до виживання патогенних ентеробактерій. Ентерокок по праву є другим після кишкової палички санітарно-показовим тестом при дослідженні питної води.

В даний час ентерококометрія узаконена в міжнародному стандарті на воду, як показник свіжого фекального забруднення. При виявленні у воді атипових кишкових паличок присутність ентерококів стає основним показником свіжого фекального забруднення. На жаль, у СанПіН 2.1.4.1074-01 на питну воду визначення ентерококу не передбачено.

Групу протею розглядають як винуватців гнильних процесів у природі, а отже, як показників наявності органічних речовин у воді водойм. Це стосується переважно одного виду – Pr.vulgaris; другий вид – Pr.mirabilis – мешканець кишечника людини та тварин. Ця екологічна відмінність дозволило судити про характер забруднення води та ступінь її епідемічної безпеки. Pr.vulgaris може бути показником фекального забруднення, Pr.vulgaris – показник збільшення концентрації органічних речовин взагалі. Слабкі стороницього показника – непостійна наявність – Pr.mirabilis у кишечнику людини та здатність досить інтенсивного розмноження обох видів у воді. Відсутній також метод дослідження, який дозволив би диференційовано враховувати обидва види при їх одночасному присутності в досліджуваній пробі. Запропонований метод не виконує цього завдання.

В даний час показано, що бактерії роду Proteus зустрічаються у 98% випадків у виділеннях кишечника людини та тварин, з них 82% випадків – Pr.mirabilis. виявлення протею у воді вказує на забруднення об'єкта субстратами, що розкладаються, і свідчить про крайнє санітарне неблагополуччя. Протеометрія офіційно визнана у США.

Виявлення спор сульфідредукуючих клостридій проводять на водопроводах з поверхневих джерел з метою оцінки ефективності технологічної обробки води. Суперечки сульфідредукуючих бактерій не повинні бути присутніми в 20 мл питної води після завершення водопідготовки.

Як індикатор вірусного забруднення питної води в СанПіН включені коліфаги, які за своїм біологічним походженням, розмірами, властивостями, стійкістю до факторів навколишнього середовища найбільш близькі до кишкових вірусів. Коліфаги не повинні виявлятися у 100 мл обробленої питної води.

Титраційний метод

Метод заснований на накопиченні бактерій після посіву певних об'ємів води в рідкі живильні середовища, з наступним пересіванням на диференціальне щільне середовище з лактозою та ідентифікації колоній з культуральних та біохімічних тестів. При дослідженні питної води якісним методом засівають три об'єми по 100 см3. При дослідженні води з цілк| кількісного визначення ОКБ та ТКБ (повторний аналіз) засівають відповідно 1,10 та 100 см3 - по три обсяги кожної серії.

Посіви 10 та 100 см3 води проводять відповідно в 1 та 10 см3 середовища накопичення - концентрованої ЛПС без індикатора. Посів 1 см3 проби проводять 10 см3 ЛПС звичайної концентрації. Посіви інкубують при температурі 37 °С протягом 48 год. Через 24 год проводять попередню оцінку посівів серед накопичення. З ємностей, де зазначено наявність зростання (помутніння) та утворення газу, матеріал висівають бактеріологічною петлею на сектори середовища Ендо для отримання ізольованих колоній. Ємності без видимих ​​ознак зростання та утворення газу залишають у термостаті до 48 год і ще раз переглядають для остаточної оцінки.

Результати посівів без ознак зростання вважаються негативними, і подальшому вивченню вони не підлягають. З ємностей, де зазначено помутніння і роблять висів на сектори середовища Ендо. Посіви на середовищі Ендо інкубують при температурі 37 °С 18-20 год. При появі помутніння, утворенні газу в середовищі накопичення і зростанні на середовищі Ендо колоній, типових для лактозопозитивних бактерій: темно-червоних або червоних, з металевим блиском або без нього, з червоним центром та відбитком на живильному середовищі, дають позитивний висновок про присутність ОКБ у цьому обсязі проби.

Наявність ОКБ необхідно підтвердити у таких випадках:

ü у середовищі накопичення зазначено лише помутніння;

ü приналежність до лактозопозитивних колоній викликає сумнів.

Для підтвердження на наявність ОКБ виконують такі дії:

1. перевіряють наявність відбитка на середовищі Ендо після зняття петлею підозрілої колонії;

2. виконують оксидазний тест;

3. перевіряють приналежність до групи за Грамом;

4. підтверджують здатність до газоутворення при посіві 1-2 ізольованих колоній всіх типів з кожного сектора в середовище підтвердження (ЛПС з індикатором) з подальшою інкубацією посівів при температурі 37 ° С протягом 24-48 год.

За відсутності ізольованих колоній проводять розсівання на середовище Ендо загальноприйнятими способами. Негативний висновок дають, якщо:

ü у середовищі накопичення немає ознак зростання;

ü на секторах середовища Ендо немає зростання;

ü на секторах середовища Ендо виросли нехарактерні для коліформних бактерій колонії (прозорі, з нерівними краями, розпливчасті);

ü всі колонії виявилися оксидазопозитивними;

ü всі колонії виявилися грампозитивними;

ü у підтвердному тесті на середовищі ЛПС з індикатором не зазначено газоутворення.

Для визначення ТКБ працюють із секторами середовища Ендо, де зросли типові лактоза+ колонії. Роблять посів двох-трьох ізольованих колоній кожного типу з кожного сектора в пробірки з будь-яким із лактозних середовищ накопичення, інкубують при температурі 44 °С протягом доби. При утворенні газу в лактозному середовищі накопичення, зростанні на середовищі Ендо лактозопозитивних бактерій та виявленні здатності до ферментації лактози до кислоти і газу в підтверджуючих лактозних середовищах при температурі 44 ° С протягом 24 год дають позитивний висновок про наявність у цьому об'ємі води. При якісному дослідженні (при дослідженні трьохобсягів по 100 см3 при виявленні ОКБ та ТКБ хоча б в одному з трьох обсягів роблять запис: «Виявлено ОКБ та ТБК у 100 см3».

При дослідженні кількісним методомвизначають НВЧ, ОКБ та ТКБ за спеціальними таблицями. При негативних результатах дослідження наявність ОКБ і ТКБ переважають у всіх досліджених обсягах видають висновок: «Не виявлено ОКБ і ТКБ 100 см3».