Основні показники щодо води. Загальне мікробне число

Титраційний метод

Метод заснований на накопиченні бактерій після посіву певних об'ємів води в рідкі живильні середовища, з наступним пересіванням на диференціальне щільне середовище з лактозою та ідентифікації колоній з культуральних та біохімічних тестів. При дослідженні питної води якісним методом засівають три об'єми по 100 см3. При дослідженні води з цілк| кількісного визначення ОКБ та ТКБ (повторний аналіз) засівають відповідно 1,10 та 100 см3 - по три обсяги кожної серії.

Посіви 10 та 100 см3 води проводять відповідно в 1 та 10 см3 середовища накопичення - концентрованої ЛПС без індикатора. Посів 1 см3 проби проводять 10 см3 ЛПС звичайної концентрації. Посіви інкубують при температурі 37 °С протягом 48 год. Через 24 год проводять попередню оцінку посівів серед накопичення. З ємностей, де зазначено наявність зростання (помутніння) та утворення газу, матеріал висівають бактеріологічною петлею на сектори середовища Ендо для отримання ізольованих колоній. Ємності без видимих ​​ознак зростання та утворення газу залишають у термостаті до 48 год і ще раз переглядають для остаточної оцінки.

Результати посівів без ознак зростання вважаються негативними, і подальшому вивченню вони не підлягають. З ємностей, де зазначено помутніння і роблять висів на сектори середовища Ендо. Посіви на середовищі Ендо інкубують при температурі 37 °С 18-20 год. При появі помутніння, утворенні газу в середовищі накопичення і зростанні на середовищі Ендо колоній, типових для лактозопозитивних бактерій: темно-червоних або червоних, з металевим блиском або без нього, з червоним центром та відбитком на живильному середовищі, дають позитивний висновок про присутність ОКБ у цьому обсязі проби.

Наявність ОКБ необхідно підтвердити у таких випадках:

ü у середовищі накопичення зазначено лише помутніння;

ü приналежність до лактозопозитивних колоній викликає сумнів.

Для підтвердження на наявність ОКБ виконують такі дії:

1. перевіряють наявність відбитка на середовищі Ендо після зняття петлею підозрілої колонії;

2. виконують оксидазний тест;

3. перевіряють приналежність до групи за Грамом;

4. підтверджують здатність до газоутворення при посіві 1-2 ізольованих колоній всіх типів з кожного сектора в середовище підтвердження (ЛПС з індикатором) з подальшою інкубацією посівів при температурі 37 ° С протягом 24-48 год.

За відсутності ізольованих колоній проводять розсівання на середовище Ендо загальноприйнятими способами. Негативний висновок дають, якщо:

ü у середовищі накопичення немає ознак зростання;

ü на секторах середовища Ендо немає зростання;

ü на секторах середовища Ендо виросли нехарактерні для коліформних бактерій колонії (прозорі, з нерівними краями, розпливчасті);

ü всі колонії виявилися оксидазопозитивними;

ü всі колонії виявилися грампозитивними;

ü у підтвердному тесті на середовищі ЛПС з індикатором не зазначено газоутворення.

Для визначення ТКБ працюють із секторами середовища Ендо, де зросли типові лактоза+ колонії. Роблять посів двох-трьох ізольованих колоній кожного типу з кожного сектора в пробірки з будь-яким із лактозних середовищ накопичення, інкубують при температурі 44 °С протягом доби. При утворенні газу в лактозному середовищі накопичення, зростанні на середовищі Ендо лактозопозитивних бактерій та виявленні здатності до ферментації лактози до кислоти та газу в підтверджуючих лактозних середовищах при температурі 44 °С протягом 24 год дають позитивний висновок про наявність у цьому обсязі води ТКЛ. При якісному дослідженні (при дослідженні трьохобсягів по 100 см3 при виявленні ОКБ та ТКБ хоча б в одному з трьох обсягів роблять запис: «Виявлено ОКБ та ТБК у 100 см3».

При дослідженні кількісним методомвизначають НВЧ, ОКБ та ТКБ за спеціальними таблицями. При негативних результатах дослідження наявність ОКБ і ТКБ переважають у всіх досліджених обсягах видають висновок: «Не виявлено ОКБ і ТКБ 100 см3».

При цьому методі аналізу води певна кількість води пропускається через спеціальну мембрану з розміром пор близько 0.45 мкм. В результаті, на поверхні мембрани залишаються всі бактерії, що знаходяться у воді. Після чого мембрану з бактеріями поміщають на певний час у спеціальне живильне середовище при температурі 30-37 оС. Під час цього періоду, званого інкубаційним, бактерії отримують можливість розмножитися та утворити добре помітні колонії, які вже легко піддаються підрахунку. В результаті можна спостерігати таку: Або навіть таку картину: Оскільки такий метод аналізу води передбачає лише визначення загальної кількостіколонії - утворюють бактерій різних типів, то за його результатами не можна однозначно судити про присутність у воді патогенних бактерій. Однак, високе мікробне число свідчить про загальну бактеріологічну забрудненість води та про високу ймовірність наявності патогенних організмів.

При аналізі води треба контролювати не лише вміст токсичних хімічних речовин, а й кількість мікроорганізмів, що характеризують бактеріологічне забруднення питної води ОМЧ-загальне мікробне число.

Санітарно-мікробіологічне дослідження води проводиться в плановому
порядку з метою поточного нагляду, а також по спеціальних епідеміологічних
ким показанням. Основними об'єктами такого дослідження є:

- Питна вода центрального водопостачання (водопровідна вода);

- Питна вода нецентралізованого водопостачання;

- вода поверхневих та підземних вододжерел;

стічні води;

- вода прибережних зон морів;

- Вода плавальних басейнів.

Основними показниками оцінки мікробіологічного стану питної води згідно з чинними нормативними документами є:

1. Загальне мікробне число (ЗМЧ) - кількість мезофільних бактерій в 1 мл воли.

Коли титр- Найменший об'єм води (в мл), в якому виявлено хоча б одну живу
мікробна клітина, що відноситься до БГКП.
Індекс БДКП- Кількість БГКП в 1 л води.

3. Кількість спор сульфітредукуючих клостридій у 20 мл води.

4. Число коліфагів у 100 мл води.

Визначення ЗМЧ дозволяє оцінити рівень мікробіологічного забруднення питної води. Цей показник незамінний для термінового виявлення масивного мікробного забруднення.

Загальне мікробне число- Це число мезофільних аеробних і факультативно анаеробних мікроорганізмів, здатних утворювати на живильному агарі при гемперазурі 37 ° С і протягом 24 годин колонії, видимі при дворазовому збільшенні.

При визначенні загального мікробного числа 1 мл досліджуваної води вносять у стерильну чашку Петрі та заливають 10-12 мл теплого (44 ° С) розплавленого живильного агару. Середовище акуратно перемішують з водою, рівномірно і
без бульбашок повітря розподіляючи дном чашки, після чого закривають кришкою і залишають до застигання. Посіви інкубують у термостаті при 37 °С протягом 24 годин. Підраховують загальну кількість колоній, які виросли в обох чашках, і визначають середнє значення. Остаточний результат виражають числом колонієутворюючих одиниць (КОЕ) в 1 мл досліджуваної води. В 1 мл питної води має бути не більше 50 ДЕЯ

Визначення БДКП
При цьому визначають загальні коліформні бактерії – ОКБ та термотолерантні коліформні бактерії – ТКБ.

ОКБ – грамамотрицатсльние, які не утворюють суперечку палички, що ферментують лактозу до кислоти і газу при температурі 37°С протягом 24 48 годин. ТКБ входять до числа ОКБ, обладжують їх ознаками, але ферментую при 44 ° С. Для визначення ентеробактерій - метод мебранних фільтрів або титраційний.

Мікробне число - основними критеріями оцінки мікробіологічного стану питної води,виходячи з діючих нормативних документів, є ОМЧ (загальне мікробне число), яке характеризує кількість аеробних та анаеробних бактерій в одному мілілітрі води, що утворюються за добу при температурі 37 градусів, у живильному середовищі.

Якісні характеристики питної води систем водопостачання.

Цей показник є фактично незамінним швидкого виявлення масового мікробного забруднення.

Для визначення загального мікробного числаодин мл досліджуваної води вносять у стерильну чашку Петрі, потім заливають 10-15 мл теплого (близько 44 ° С) поживного агару в розплавленому вигляді. Середовище акуратно змішують з водою, рівномірно і без повітряних бульбашок повітря розподіляють по дну чашки, після цього закривають кришкою і залишають у чашці Петрі до застигання. Те саме роблять в іншій чашці. Посів у термостаті інкубують за температури 37 °С протягом доби. Потім при дворазовому збільшенні під мікроскопом підраховують загальну кількість колоній, що виросли у двох чашках, і визначають середнє значення. В 1 мл питної води не повинно бути більше 50 КУО.

(Основний метод)

Метод заснований на фільтрації певного об'єму води (300мл) через мембранні фільтри, вирощуванні посівів на диференційно-діагностичному середовищі з лактозою (Ендо) та подальшою ідентифікацією колоній за культуральними та біохімічними ознаками.

Мембранні фільтри підготовлені до аналізу (кип'ячені або стерилізовані іншим способом) поміщають стерильним пінцетом у вирву фільтрувального апарату. У вирву приладу наливають відмірений об'єм води і створюють вакуум. Після фільтрування фільтр знімають і, не перевертаючи, кладуть на поверхню живильного середовища Ендо.

На одну чашку можна помістити 3 фільтри. При дослідженні питної води фільтрують 3 об'єми 100 мл. при аналізі води невідомої якості доцільно фільтрувати інші обсяги води для отримання ізольованих колоній на фільтрі (10,40, 100 та 150 мл).

Чашки з фільтрами інкубують дном в термостаті при t 37оС протягом 24 годин.

Якщо на фільтрах немає зростання або виросли нетипові плівчасті, плісняві, розпливчасті колонії, видають негативний результат. ОКБ та ТКБ у 100 мл дослідженої води відсутні.

При зростанні на фільтрах типових ізольованих лактозопозитивних (темно-червоних з відбитками на звороті фільтра) колоній, підраховують їх кількість і починають підтвердження їх приналежності до ОКБ і ТКБ.

Проводять мікроскопію мазків з 3-4 колоній, пофарбованих за Грамом (враховують грамнегативні);

Визначають наявність оксидази (враховують оксидазонегативні, тому що оксидазопозитивні грамнегативні палички не відносяться до ентеробактерій, а можуть бути, наприклад, псевдомонадами);

Визначають ферментацію лактози до кислоти і газу при температурі 37оС, що важливо для слабозабарвлених колоній і відношення їх до ОКБ, і температурі 44± 0,5оС, щоб вирішити питання їх належності до ТКБ.

Постановка оксидазного тіста

На папір, змочений 1% спиртовим розчином -нафтола і 1% водним розчином диметилфенилендиамина, наносять платинової петлею або скляною паличкою частина пофарбованої колонії. реакцію вважають позитивною, якщо протягом 1 хвилини максимум 4-х з'являється синє або фіолетове забарвлення. Оксидазопозитивні колонії не враховують і подальшого дослідження не піддають.

Можна переносити фільтр із колоніями на папір змочений реактивом. Можна використовувати готові паперові системи (СІБ), змочені дистильованою водою.

На здатність ферментувати лактозу відчувають частини колоній грамнегативних оксидазонегативних бактерій. При цьому використовується напіврідке середовище з лактозою та індикатором рН. Посів проводиться уколом до дна 2 пробірки. Одна інкубується при температурі 37±1оС 24-48 годин на підтвердження ставлення до ОКБ, інша при температурі 44± 0,5оС 24 години, можливий облік через 4-6 годин, на підтвердження наявності ТКБ.

При накладенні колоній на фільтрі проводиться їх розсівання, потім отримані ізольовані колонії ідентифікуються. Колонії враховують як ОКБ – якщо вони червоні на Ендо, містять грамнегативні оксидазонегативні палички, що розкладають лактозу при температурі 37 оС до кислоти та газу. Колонії враховують як ТКБ, якщо вони містять грамнегативні оксидазонегативні палички, що ферментують лактозу при температурі 44 оС до кислоти та газу (схема № 2).

СХЕМА № 2

Дата публікації: 2014-11-02; Прочитано: 1811 | Порушення авторського права сторінки

studopedia.org - Студопедія. Орг - 2014-2018 рік. (0.001 с) ...

Загальне мікробне число

При цьому методі аналізу води певна кількість води пропускається через спеціальну мембрану з розміром пор близько 0.45 мкм. В результаті, на поверхні мембрани залишаються всі бактерії, що знаходяться у воді. Після чого мембрану з бактеріями поміщають на певний час у спеціальне живильне середовище при температурі 30-37 оС. Під час цього періоду, званого інкубаційним, бактерії отримують можливість розмножитися та утворити добре помітні колонії, які вже легко піддаються підрахунку. В результаті можна спостерігати таку: Або навіть таку картину: Так як такий метод аналізу води передбачає лише визначення загальної кількості колонії - утворюють бактерій різних типів, то за його результатами не можна однозначно судити про присутність у воді патогенних мікробів. Однак, високе мікробне число свідчить про загальну бактеріологічну забрудненість води та про високу ймовірність наявності патогенних організмів.

При аналізі води треба контролювати не тільки вміст токсичних хімічних речовин, а й кількість мікроорганізмів, що характеризують бактеріологічне забруднення питної води ОМЧ-загальне мікробне число. 100 ДЕЯ/мл

Санітарно-мікробіологічне дослідження води проводиться в плановому
порядку з метою поточного нагляду, а також по спеціальних епідеміологічних
ким показанням. Основними об'єктами такого дослідження є:

- Питна вода центрального водопостачання (водопровідна вода);

- Питна вода нецентралізованого водопостачання;

- вода поверхневих та підземних вододжерел;

- стічні води;

- вода прибережних зон морів;

- Вода плавальних басейнів.

Основними показниками оцінки мікробіологічного стану питної води згідно з чинними нормативними документами є:

1. Загальне мікробне число (ЗМЧ) - кількість мезофільних бактерій в 1 мл воли.

Коли титр- Найменший об'єм води (в мл), в якому виявлено хоча б одну живу
мікробна клітина, що відноситься до БГКП.
Індекс БДКП- Кількість БГКП в 1 л води.

3. Кількість спор сульфітредукуючих клостридій у 20 мл води.

4. Число коліфагів у 100 мл води.

Визначення ЗМЧ дозволяє оцінити рівень мікробіологічного забруднення питної води. Цей показник незамінний для термінового виявлення масивного мікробного забруднення.

Загальне мікробне число- Це число мезофільних аеробних і факультативно анаеробних мікроорганізмів, здатних утворювати на живильному агарі при гемперазурі 37 ° С і протягом 24 годин колонії, видимі при дворазовому збільшенні.

При визначенні загального мікробного числа 1 мл досліджуваної води вносять у стерильну чашку Петрі та заливають 10-12 мл теплого (44 ° С) розплавленого живильного агару. Середовище акуратно перемішують з водою, рівномірно і
без бульбашок повітря розподіляючи дном чашки, після чого закривають кришкою і залишають до застигання. Посіви інкубують у термостаті при 37 °С протягом 24 годин. Підраховують загальну кількість колоній, які виросли в обох чашках, і визначають середнє значення. Остаточний результат виражають числом колонієутворюючих одиниць (КОЕ) в 1 мл досліджуваної води. В 1 мл питної води має бути не більше 50 ДЕЯ

Визначення БДКП
При цьому визначають загальні коліформні бактерії – ОКБ та термотолерантні коліформні бактерії – ТКБ.

ОКБ – грамамотрицатсльние, які не утворюють суперечку палички, що ферментують лактозу до кислоти і газу при температурі 37°С протягом 24 48 годин. ТКБ входять до числа ОКБ, обладжують їх ознаками, але ферментую при 44 ° С. Для визначення ентеробактерій - метод мебранних фільтрів або титраційний.

Мікробне число - основними критеріями оцінки мікробіологічного стану питної води,виходячи з чинних нормативних документів, є ЗМЧ (загальне мікробне число), яке характеризує кількість аеробних та анаеробних бактерій в одному мілілітрі води, що утворюються за добу при температурі 37 градусів, у живильному середовищі. Цей показник є фактично незамінним швидкого виявлення масового мікробного забруднення.

Для визначення загального мікробного числаодин мл досліджуваної води вносять у стерильну чашку Петрі, потім заливають 10-15 мл теплого (близько 44 ° С) поживного агару в розплавленому вигляді. Середовище акуратно змішують з водою, рівномірно і без повітряних бульбашок повітря розподіляють по дну чашки, після цього закривають кришкою і залишають у чашці Петрі до застигання.

Принципи нормування питної води

Те саме роблять в іншій чашці. Посів у термостаті інкубують за температури 37 °С протягом доби. Потім при дворазовому збільшенні під мікроскопом підраховують загальну кількість колоній, що виросли у двох чашках, і визначають середнє значення. В 1 мл питної води не повинно бути більше 50 КУО.

Бактерії коліформні завжди присутні у травному тракті тварин та людини, а також у відходах їхньої життєдіяльності. Вони також можуть перебувати на рослинах, ґрунті та у воді, забруднення якої є серйозною проблемою через можливість зараження захворюваннями, викликаними різними патогенами.

Шкода для організму

Чи є бактерії коліформні шкідливими? Більшість із них не викликають захворювань, проте деякі рідкісні штами кишкової палички можуть викликати серйозні захворювання. Крім людей, можуть бути заражені вівці та велика рогата худоба. Викликає занепокоєння те, що заражена вода за своїми зовнішнім характеристикамнічим не відрізняється від звичайної питної за смаком, запахом та зовнішнім виглядом. Бактерії коліформні зустрічаються навіть у яку прийнято вважати бездоганною у всіх сенсах. Перевірка є єдиним надійним способом дізнатися про наявність хвороботворних бактерій.

Що відбувається при виявленні?

Що робити, якщо бактерії коліформні чи будь-які інші виявляються у питній воді? В цьому випадку знадобиться ремонт чи модифікація системи водопостачання. При вживанні для дезінфекції передбачено обов'язкове кип'ятіння, а також повторне тестування, яке може підтвердити, що забруднення не було усунуто, якщо це були толерантні коліформні бактерії.

Організми-індикатори

Загальні коліформні бактерії часто називають організмами-індикаторами, тому що вони вказують на потенційну наявність хвороботворних бактерій у воді, наприклад кишкової палички. Хоча більшість штамів є невинними і живуть у кишечнику здорових людейі тварин, деякі з них можуть сприяти утворенню токсинів, викликати серйозні захворювання і навіть призводити до смерті. Якщо хвороботворні бактерії присутні в організмі, то найпоширенішими симптомами є розлад шлунково-кишкового тракту, лихоманка, біль у животі та пронос. Симптоми яскравіше виявляються у дітей чи літніх членів сім'ї.

Безпечна вода

Якщо загальні коліформні бактерії у воді відсутні, то практично цілком впевнено можна припустити, що вона мікробіологічно безпечна для пиття.
Якщо ж їх було виявлено, тоді буде виправданим проведення додаткових тестів.

Бактерії люблять тепло та вологу

Температура та погодні умови також відіграють важливу роль. Наприклад, кишкова паличка вважає за краще жити на поверхні землі і любить тепло, таким чином, коліформні бактерії в питній воді з'являються в результаті руху в складі підземних потоків за теплих і вологих погодних умов, тоді як найменша кількість бактерій буде знайдена в зимову пору року.

Ударне хлорування

Для ефективного знищення бактерій використовують хлор, який окислює усі домішки. На його кількість впливатимуть такі характеристики води, як рівень рН та температура. У середньому, вага на літр становить приблизно 0,3-0,5 міліграма. Щоб вбити загальні коліформні бактерії у питній воді, потрібно приблизно 30 хвилин. Час контакту може бути скорочений за рахунок збільшення дози хлору, але для цього можуть знадобитися додаткові фільтри для видалення специфічного смаку та запаху.

Згубне ультрафіолетове світло

Популярним варіантом дезінфекції вважаються ультрафіолетові промені. Цей спосіб не передбачає використання будь-яких хімічних сполук. Однак цей засіб не застосовується там, де загальні коліформні бактерії перевищують тисячу колоній на 100 мл води. Сам прилад складається з УФ-лампи, оточеної рукавом з кварцового скла, через який протікає рідина, що опромінюється ультрафіолетовим світлом. Необроблена вода всередині апарату повинна бути повністю чистою та вільною від будь-яких видимих ​​забруднень, засмічення або каламутності, щоб дати можливість опромінення всіх шкідливих організмів.

Інші варіанти очищення

Існує безліч інших способів обробки, які використовуються для дезінфекції води. Однак вони не рекомендуються як тривалі з різних причин.

  • Кип'ятіння. При 100 градусах за Цельсієм протягом однієї хвилини ефективно вбиваються бактерії. Цей метод часто використовується для дезінфекції води під час надзвичайних ситуаційабо за потреби. Це займає час і є енергоємним процесом і, як правило, застосовується лише у невеликих кількостях води. Це не довготривалий або постійний варіант для дезінфекції води.
  • Озонування. У Останніми рокамицей метод використовується як спосіб поліпшення якості води, усунення різних проблем, у тому числі бактеріального зараження. Як і хлор, озон є сильним окисником, який вбиває бактерії. Але водночас цей газ є нестабільним, і одержати його можна лише за допомогою електрики. Блоки озонування зазвичай не рекомендуються для дезінфекції, тому що вони набагато дорожчі за хлорування або ультрафіолетові системи.
  • Йодування. Колись популярний спосіб дезінфекції в Останнім часомрекомендується лише для короткочасного чи екстреного знезараження води.

Термотолерантні коліформні бактерії

Це особлива група живих організмів, які здатні ферментувати лактозу за 44-45 градусів за Цельсієм. До них відносять рід Escherichia та деякі види Klebsiella, Enterobacter та Citrobacter. Якщо у воді присутні сторонні організми, це свідчить про те, що вона була недостатньо добре очищена, забруднена повторно, або в ній надміру містяться поживні елементи. При їх виявленні необхідно перевірити наявність саме стійких до підвищеної температури коліформних бактерій.

Мікробіологічний аналіз

Якщо були виявлені коліформи, це може говорити про те, що у воду потрапили Таким чином, починають поширюватися різні захворювання. У забрудненій питній воді можна зустріти штами сальмонел, шигел, кишкової палички та багатьох інших збудників хвороб, які варіюються від легких порушень травного тракту до найважчих форм дизентерії, холери, черевного тифу та багатьох інших.

Побутові джерела зараження

За якістю питної води проводять спостереження, її регулярно перевіряють спеціалізовані санітарні служби. А що може зробити звичайна людина, щоб убезпечити себе та захистити від небажаного зараження? Які є джерела забруднення води в побутових умовах?

  1. Вода із кулера. Чим більше людейторкаються даного пристрою, тим більше ймовірність проникнення шкідливих бактерій. Як показують дослідження, вода у кожному третьому кулері просто кишить живими організмами.
  2. Дощова вода. Як це не дивно, зібрана після дощу волога є сприятливим середовищем для розвитку коліформних бактерій. Розвинені садівники не використовують таку воду навіть для поливу рослин.
  3. Озера і водоймища також відносять до групи ризику, так як у стоячій воді швидше розмножуються всі живі організми, а не лише бактерії. Винятком можна назвати океани, розвиток та поширення там шкідливих форм мінімально.
  4. Стан трубопроводу. Якщо стічні труби не змінювалися і не очищалися тривалий час, це може також призвести до появи неприємностей.

Кишкова паличка (Escherichia coli)є першим санітарно-показовим мікроорганізмом, який зберіг своє значення досі. Ще 1888 р. французький лікар Є. Масі запропонував використовувати цю бактерію як показник фекального забруднення води. У третьому виданні Посібника ВООЗ з контролю якості питної води як показник вибору для оцінки свіжого фекального забруднення рекомендується показник E.coli (індексний). Як альтернативний показник фекального забруднення (за певних обставин) рекомендується показник Термотолерантні Коліформні Бактерії (ТКБ) (індексний). Показник Коліформні Бактерії (КБ) рекомендується як технологічний показник оцінки якості водопідготовки (індикаторний). Відповідно до вітчизняної нормативної бази Коліформні Бактерії (КБ) у термінології ВООЗ відповідають показнику Загальні Коліформні Бактерії (ОКБ).


Для визначення коліформних показників широко використовується мембранний метод сівби, хоча не менше значення має і титраційний метод. Методики визначення даних показників сильно варіюють залежно від об'єкта, що досліджується, і нормативно-методичних документів. Основним щільним диференціальним середовищем для визначення коліформних показників у вітчизняних методиках є середовище Ендо, проте в останній редакції стандарту ISO 9308-1:2000 середовище Ендо замінено іншим лактозним середовищем. Тергітол 7. Причиною для такої заміни стала потенційна канцерогенність фуксину - анілінового барвника, що входить до складу середовища Ендо. Для методу НВЧ використовують рідкі середовища збагачення. Для потенційно чистих об'єктів використовують лактозо-пептонну воду, для потенційно забруднених – середовище Кесслера або його аналоги.

Необхідно відзначити живильні середовища нового покоління, які часто називають «хромогенними». На відміну від традиційних середовищ вони дозволяють визначати не ознаку, наприклад, утилізацію лактози, але безпосередньо окремі ферменти, наявність яких характерна для мікроорганізмів. Хромогенні середовища для ідентифікації E. coli, наприклад, Chromocult ®або Coli ID, що дозволяють визначати фермент β-глюкуронідазу, високоспецифічний для ешерихій. Наявність цього ферменту та здатність утворювати індол із 95% ймовірністю свідчить про належність ентеробактерій до виду E. coli. Ці ж середовища дозволяють визначати і фермент β-галактозидазу, характерну для ОКБ, проте цінність цього діагностичного тесту сумнівна: даним ферментом володіють і аеромонади, що вільно живуть оксидазопозитивні палички, що не відносяться до ОКБ. Компанія Merck спробувала вдосконалити хромогенне середовище Chromocult ECі ввела до неї селективну добавку, що інгібує зростання аеромонад.

З інноваційних технологійв галузі санітарної бактеріології води слід відзначити тест-системи, які використовують сухі середовища на спеціальних пластикових підкладках. Прикладом таких тест-систем є підкладки Petrifilm™лінійки Aquaі, зокрема, продукт "Aqua Coliform Count Plate" (AQCC, 3M™Petrifilm™)який призначений для визначення ОКБ та ТКБ у воді. Унікальність петрифільмів (середовищ на підкладках) полягає у простоті використання. Виключається трудомісткий етап приготування поживних середовищ, полегшується їх зберігання та утилізація. Однак головна перевага перед традиційними середовищами та середовищами на підкладках інших виробників полягає в тому, що вже на етапі первинного посіву при отриманні ізольованих колоній перифільми дозволяють визначати не лише здатність бактерій утилізувати лактозу до кислоти, а й виявляти газоутворення. Це дозволяє здебільшого скоротити аналіз до 1-2 діб. Крім того, петрифільми AQCC (на відміну від Ендо середовища) можна інкубувати при 44°С, що дозволяє повною мірою використовувати селективний фактор високої температури вже на етапі первинного посіву, завдяки чому при аналізі ТКБ істотно скорочуються час і трудомісткість.

На селективних петрифільмах "Aqua Coliform Count Plate" (AQCC,3M™ Petrifilm™)колонії ОКБ і ТКБ забарвлюються в інтенсивний червоний колір з утворенням бульбашок газу навколо колонії.


За період з 9 січня до 10 жовтня 2014р. до відділу ветеринарно-санітарної експертизи ФДБУ «Тульська МВЛ» надійшло – 302 проби води, проведено – 693 дослідження, з них, на показники ОКБ, ТКБ-458 досліджень.

Що це за показники і чому саме їм приділяється увага при оцінці питної води?

Вода – основна складова частинабудь-якого організму, грає величезну роль його життєдіяльності. Вона є довкіллям різних мікроорганізмів, серед яких є і патогенні. Виявлення патогенів – найточніший показник забруднення води. До таких мікроорганізмів відносяться бактерії групи кишкової палички – БГКП (бактерії групи кишкової палички), також називаються коліморфними та коліформними бактеріями) - умовно виділяється за морфологічними та культуральними ознаками група бактерій сімейства ентеробактерій, що використовується санітарною мікробіологією як маркер фекальної контамінації. Серед коліформних бактерій часто визначається наявність у питній воді загальних та термотолерантних коліформних бактерій (ОКБ, ТКБ), що свідчить про неякісне водопостачання та можливе фекальне забруднення вододжерела, що створює потенційну загрозу розвитку та поширенню кишкових захворювань.

У системах водопостачання з підготовленою водою коліформні бактерії не повинні виявлятися (СанПіН). Присутність коліформних організмів говорить про недостатню очистку води, про її вторинне забруднення, про наявність у воді поживних речовин. Допускається випадкове попадання коліформних організмів у систему, але не більше 5% проб, відібраних протягом року. При виявленні у пробі питної води ТКБ, ОКБ) негайно здійснюють їх визначення повторних пробах.

ТКБ (термотолерантні коліформні бактерії). Це група коліформних організмів, здатних ферментувати лактозу за 44-45°С. Вони швидко виявляються, тому служать з метою оцінки ефективності очищення води від фекальних бактерій.

ОКБ (Загальні Коліформні Бактерії) – Група ОКБ включає достатньо велике числопологів сімейства Enterobacteriacea, представники яких здатні зброджувати лактозу: Citrobacter, Enterobacter, Klebsiella, Serratia, Pantoea, Rahnella та ін. Серед цих мікроорганізмів також є велика кількість вільноживучих сапрофітів, тому показник ОКБ є важливим технологічним (індикаторним).

Відповідно, якщо ці бактерії перебувають у питній воді, це означає, що є можливість забруднення води стічними водами.

Результати визначення показників ОКБ, ТКБ подаються у вигляді КУО/100 мл; коліформні бактерії не повинні виявлятися в 100 мл питної води при триразовому дослідженні об'єму, що нормується.

Як би там не було, будь-який підвищений вміст бактерій у воді – це тривожна ознака, і за його появи потрібно щось робити з водою.

Для проведення мікробіологічних досліджень питної води можна звернутися до ФДБУ «Тульська МВЛ».

Поділіться з друзями або збережіть для себе:

Завантаження...