اصول تنظیم آب آشامیدنی OKB و TKB: روش های غشایی و تیتراسیون

نظرات روی میزبا برآورد مقدار OKB و TKB در 100 سانتی متر مکعب آب، حداقل سه حجم آب (هر کدام 100 سانتی متر مکعب) باید آنالیز شود. هنگام ارزیابی OKB و MCH، فراتر از استاندارد در 95٪ نمونه های گرفته شده در طول سال مجاز نیست. کولیفاژها فقط در سیستم های تامین آب از منابع سطحی قبل از تامین آب به شبکه توزیع تعیین می شوند، همین امر در مورد وجود کیست های ژیاردیا نیز صدق می کند. محتوای اسپور کلستریدیاهای کاهنده سولفیت تنها هنگام ارزیابی اثربخشی فناوری تصفیه آب تعیین می شود. در صورت تشخیص TKB، OKB، کلیفاژها، یا حداقل یکی از شاخص های نشان داده شده، مطالعه اضطراری مکرر آب دوباره برای TKB، OKB و کلیفاژها انجام می شود. به موازات آن، آب برای کلرید، نیتروژن آمونیوم، نیترات و نیتریت آزمایش می شود. اگر بیش از دو TKB در 100 سانتی متر مکعب و / یا TKB و / یا کلیفاژها در نمونه دوباره گرفته شده شناسایی شود، مطالعه برای باکتری های بیماری زا از گروه روده و / یا انتروویروس ها انجام می شود. همان مطالعه برای انتروباکتری های بیماری زا و انتروویروس ها با توجه به نشانه های اپیدمیولوژیک با تصمیم مراکز سرزمینی Rospotrebnadzor انجام می شود.

باکتری کلیفرم مقاوم به حرارت (TCB)بخشی از OKB هستند و همه ویژگی های خود را دارند، اما بر خلاف آنها قادرند لاکتوز را به اسید، آلدئید و گاز در دمای +44 درجه سانتیگراد به مدت 24 ساعت تخمیر کنند. بنابراین، TKB از نظر توانایی با OKB متفاوت است. لاکتوز را در دمای بالاتر به اسید و گاز تخمیر کنید.

شاخص هایی که باید تعیین شوند، تعداد و فراوانی مطالعات به نوع منبع تامین آب، اندازه جمعیت تامین شده با آب از این سیستم آبرسانی بستگی دارد. این داده ها در آورده شده است SanPiN 2.1.4.1074–01. در دستورالعمل آنالیز بهداشتی و میکروبیولوژیکی آب آشامیدنی ( MUK 4.2.1018-01 وزارت بهداشت فدراسیون روسیه) روش های کنترل بهداشتی و میکروبیولوژیکی کیفیت آب آشامیدنی تنظیم می شود.

تعداد کل میکروارگانیسم ها- این تعداد کل میکروارگانیسم‌های مزوفیل (با دمای بهینه 37+ درجه سانتی‌گراد) هوازی و بی‌هوازی اختیاری (MAFAnM) قابل مشاهده با افزایش دو برابری است که قادر به تشکیل کلنی بر روی ماده مغذی آگار در دمای 37+ درجه سانتی‌گراد هستند. به مدت 24 ساعت برای شناسایی این شاخص در 1 میلی لیتر آب به پتری دیش استریل اضافه می شود و با گوشت پپتون آگار ذوب شده (درجه حرارت بالاتر از 50+ درجه سانتیگراد) پر می شود و یک روز بعد تعداد کلنی های رشد یافته شمارش می شود. .

تعیین OKB و TKB با روش فیلترهای غشایی

این روش مبتنی بر فیلتر کردن حجم معینی از آب از طریق فیلترهای غشایی است. برای این منظور از فیلترهایی با قطر منافذ 0.45 میکرون و اندازه 35 یا 47 میلی متر استفاده می شود (فیلترهای خانگی "Vladipor" MFAS-S-1، MFAS-S-2، MFAS-MA (شماره 4- 6) یا خارجی - ISO 9000 یا EN 29000). فیلترهای غشایی مطابق دستورالعمل سازنده برای آنالیز آماده می شوند.

تعیین OKB و TKB با روش تیتراسیون

این روش مبتنی بر تجمع باکتری‌ها پس از تلقیح حجم‌های معینی از آب در محیط‌های مغذی مایع و به دنبال آن تلقیح مجدد بر روی یک محیط متراکم افتراقی با لاکتوز و شناسایی کلنی‌ها با آزمایش‌های فرهنگی و بیوشیمیایی است. در مطالعه آب آشامیدنی به روش کیفی (نظارت فعلی بهداشتی و اپیدمیولوژیک)، سه حجم 100 سانتی متر مکعب کاشته می شود. در مطالعه آب به منظور تعیین کمیت OKB و TKB (تحلیل مجدد)، به ترتیب 100، 10 و 1 سانتی متر مکعب تلقیح می شوند - سه حجم از هر سری.

مطالعه بهداشتی میکروبیولوژیکی خاک

خاک پناهگاهی برای انواع میکروارگانیسم ها فراهم می کند. بنابراین، تعداد باکتری ها به تنهایی در خاک به 10 میلیارد سلول در هر گرم می رسد. میکروارگانیسم ها در تشکیل خاک و خودپالایی خاک، در گردش نیتروژن، کربن و سایر عناصر در طبیعت شرکت می کنند. علاوه بر باکتری ها، قارچ ها، تک یاخته ها و گلسنگ ها که همزیستی قارچ ها با سیانوباکتری ها هستند در آن زندگی می کنند. به دلیل اثرات مضر اشعه ماوراء بنفش، خشک شدن و سایر عوامل، میکروارگانیسم های نسبتا کمی در سطح خاک وجود دارد. لایه زراعی خاک با ضخامت 10 تا 15 سانتی متر دارای بیشترین تعداد میکروارگانیسم است. با عمیق تر شدن عمق، تعداد میکروارگانیسم ها کاهش می یابد تا زمانی که در عمق 3-4 متری ناپدید شوند، ترکیب میکرو فلور خاک به نوع و وضعیت آن، ترکیب پوشش گیاهی، دما، رطوبت و غیره بستگی دارد. اکثر میکروارگانیسم های خاک قادر به رشد در pH خنثی، رطوبت نسبی بالا و دمای بین 25 تا 45 درجه سانتیگراد هستند.

میله های تشکیل دهنده هاگ در خاک زندگی می کنند باسیلو کلوسریدیوم.باسیل های غیر بیماری زا (Vas. megaterium، Vas. subtilisو غیره.). همراه با سودوموناس، پروتئوس و برخی باکتری های دیگر، آمونیزه می شوند و گروهی از باکتری های پوسیده را تشکیل می دهند که کانی سازی را انجام می دهند. مواد آلی. میله های هاگ ساز بیماری زا (عوامل ایجاد کننده سیاه زخم، بوتولیسم، کزاز، گانگرن گازی) می توانند برای مدت طولانی باقی بمانند و حتی برخی از آنها در خاک تکثیر شوند. کلستریدیومبوتولینوم). خاک همچنین زیستگاهی برای باکتری های تثبیت کننده نیتروژن است که نیتروژن مولکولی را جذب می کنند. (ازتوباکتر، آزوموناس، مایکوباکتریومو غیره.). انواع تثبیت کننده نیتروژن سیانوباکتری ها یا جلبک های سبز آبی برای بهبود باروری مزارع برنج استفاده می شود.

اعضای خانواده باکتری های روده (fam. انتروباکتریاسه) - E. coli، عوامل ایجاد کننده تب حصبه، سالمونلوز و اسهال خونی، یک بار در خاک با مدفوع، می میرند. در خاک های تمیز، اشریشیا کلی و پروتئوس نادر هستند. تشخیص باکتری های گروه اشریشیا کلی (باکتری های کلیفرم) در مقادیر قابل توجهی نشان دهنده آلودگی خاک به مدفوع انسان و حیوان است و نشان دهنده نامطلوب بودن بهداشتی و اپیدمیولوژیک آن به دلیل امکان انتقال عوامل بیماری زا عفونت های روده ای است. تعداد تک یاخته ها در خاک از 500 تا 500000 در هر 1 گرم خاک متغیر است. تک یاخته ها با تغذیه از باکتری ها و بقایای آلی باعث تغییر در ترکیب مواد آلی خاک می شوند. همچنین قارچ های متعددی در خاک وجود دارد که سموم آنها با تجمع در غذای انسان باعث مسمومیت می شود - مایکوتوکسیکوزیس و آفلاتوککسیکوز.

نتایج تحقیقات خاک هنگام تعیین و پیش بینی درجه خطر آنها برای سلامتی و شرایط زندگی جمعیت در سکونتگاه ها (بر اساس نشانه های اپیدمیولوژیک)، پیشگیری از بیماری های عفونی و غیر عفونی (نظارت بهداشتی پیشگیرانه) در نظر گرفته می شود. کنترل بهداشتی فعلی اشیایی که به طور مستقیم یا غیرمستقیم بر محیط زیست تأثیر می گذارد.

هنگام انجام نظارت بهداشتی فعلی بر وضعیت خاک، آنها به تجزیه و تحلیل مختصر بهداشتی و میکروبیولوژیکی محدود می شوند که نشان دهنده وجود و درجه آلودگی مدفوع است. شاخص های موجود در این گروه همچنین فرآیندهای خود تصفیه خاک از آلاینده های آلی و انتروباکتری ها را مشخص می کند. تجزیه و تحلیل کامل بهداشتی و میکروبیولوژیکی خاک در قالب نظارت بهداشتی پیشگیرانه انجام می شود. تأثیر آلاینده های شیمیایی بر بیوژئوسنوز شامل مطالعه عملکرد باکتری کش آنها بر روی میکروبیوتای خاک است، در نتیجه: تغییر در اجتماع میکروارگانیسم های خاک، فعالیت آنزیمی خاک. با توجه به نشانه های اپیدمی، نشانه ای از میکروبیوتای بیماری زا انجام می شود.

در آزمايشگاه، نمونه متوسطي از 5 نمونه خاك كه از يك محل گرفته شده است، تهيه مي شود، كاملاً مخلوط شده و به مدت 5 دقيقه در يك فنجان چيني استريل با پاستيل لاستيكي مالش مي شود. ناخالصی های خارجی (ریشه های گیاه، سنگ ها، تراشه ها) با الک کردن خاک از طریق الک، که ابتدا با یک سواب پنبه ای مرطوب شده با الکل اتیل 96٪ پاک می شود، حذف می شود. نمونه ها از نمونه متوسط ​​(از 1 تا 50-55 گرم، بسته به فهرست شاخص های تعیین شده) گرفته می شود و یک سوسپانسیون 1:10 در آب لوله کشی استریل (10 گرم خاک در هر 90 سانتی متر مکعب آب) تهیه می شود. برای دفع میکروارگانیسم ها از سطح ذرات خاک، سوسپانسیون خاک آماده شده به مدت 3 دقیقه بر روی یک مخلوط کن مکانیکی پخش کننده تکان داده می شود. پس از ته نشین شدن سوسپانسیون به مدت 30 ثانیه، رقت های 10 برابری متوالی از خاک به غلظت 10-4-10-5 g/cm3 آماده می شود.

ارزیابی نتایج مطالعه بهداشتی و میکروبیولوژیکی خاک با مقایسه داده‌های به‌دست‌آمده در قطعه‌های آزمایشی و شاهد خاک‌هایی با همان ترکیب، واقع در مجاورت سرزمینی انجام می‌شود. طرح‌هایی برای ارزیابی وضعیت بهداشتی خاک بر اساس معیارهای بهداشتی و میکروبیولوژیکی فردی در شماره MU 14446-76(جدول 2).

جدول 2

AT MU 2.1.7.730-99 "ارزیابی بهداشتی کیفیت خاک در مناطق پرجمعیت"طرحی برای ارزیابی خطر اپیدمی خاک در مناطق پرجمعیت ارائه شده است. در این سند برای ارزیابی شدت بار بیولوژیکی خاک از شاخص هایی مانند CGB و شاخص انتروکوکوس و برای ارزیابی خطر اپیدمی خاک از باکتری های بیماری زا و انترو ویروس ها استفاده شده است.

مطالعه تلقیح میکروبی محیط هوا

میکروارگانیسم ها از خاک، آب و همچنین از سطح بدن، از مجاری تنفسی و با قطرات بزاق انسان و حیوان وارد هوا می شوند. باکتری های کوکوئیدی و میله ای شکل، باسیل ها، کلستریدیا، اکتینومیست ها، قارچ ها و ویروس ها در اینجا یافت می شوند. هوا به عنوان عامل انتقال عفونت های تنفسی در نظر گرفته می شود که در آن عامل بیماری زا توسط قطرات هوا یا گرد و غبار موجود در هوا منتقل می شود. نور خورشید و سایر عوامل در مرگ میکرو فلور هوا نقش دارند. برای کاهش آلودگی میکروبی هوا، تمیز کردن مرطوب محل در ترکیب با تهویه و تصفیه (فیلتراسیون) هوای ورودی انجام می شود. ضد عفونی آئروسل و درمان محل با لامپ های اشعه ماوراء بنفش نیز استفاده می شود (به عنوان مثال، در آزمایشگاه های میکروبیولوژیکی و واحدهای عامل).

میکروارگانیسم های زیادی در هوای محیط های داخلی وجود دارد که آلودگی میکروبی آنها به شرایط تمیز کردن محل، میزان روشنایی، تعداد افراد در اتاق، دفعات تهویه و غیره بستگی دارد. تعداد بیشتری از میکروارگانیسم ها در هوای شهرهای بزرگ، تعداد کمتری - در هوای مناطق روستایی وجود دارد. میکروارگانیسم های کمی در هوای جنگل ها، کوه ها و دریاها وجود دارد.

بررسی میکروبیولوژیکی هوا امکان تعیین محتوای کل میکروارگانیسم ها و همچنین استافیلوکوک ها را در 1 متر مکعب هوا فراهم می کند. در برخی موارد، هوا برای باکتری های گرم منفی، کپک ها و قارچ های مخمر مانند آزمایش می شود. با توجه به نشانه های اپیدمی، طیف پاتوژن های شناسایی شده در هوا را می توان گسترش داد.

نمونه های هوا از طریق آسپیراسیون با استفاده از دستگاه کروتوف گرفته می شود.

استفاده از روش ته نشینی کوخ کاملا قابل قبول است. اماکن زیر از مراکز بهداشتی درمانی مشمول مطالعه می باشند - اتاق عمل، اتاق پانسمان و درمان، بخش آسپتیک (باکس)، بخش بیهوشی و احیا، بخش ها و راهروهای بخش های پزشکی، محوطه داروخانه ها، عقیم سازی و زایمان - بخش های زنان و زایمان و ایستگاه های (بخش) انتقال خون.

مطالعه هوا به روش کوخ در موارد بسیار نادری برای ارزیابی تقریبی میزان آلودگی میکروبی هوا مورد استفاده قرار می گیرد. برای تعیین تعداد کل میکروارگانیسم‌های موجود در هوای اتاق‌های عمل، قبل از شروع کار، بشقاب‌هایی را با مواد مغذی آگار باز کرده و تقریباً در ارتفاع میز عمل قرار دهید - یک صفحه در مرکز و چهار صفحه در گوشه‌های اتاق (" روش پاکت") به مدت 10 دقیقه، و برای تشخیص استافیلوکوکوس اورئوس ( فنجان با زرده نمک آگار (YSA) استفاده می شود - به مدت 40 دقیقه محصولات در یک ترموستات در دمای +37 درجه سانتیگراد و یک روز در دمای اتاق انکوبه می شوند، سپس تعداد 2 سطح از محیط غذایی در 5 دقیقه قرار گرفتن در معرض، آنقدر باکتری رسوب می کند که در 10 لیتر هوا موجود است (1000 لیتر در 1 متر مکعب است). در عین حال، بیش از 5 کلونی از میکروارگانیسم ها نباید در صفحات نوترینت آگار رشد کنند و استافیلوکوکوس اورئوس نباید ظاهر شود.

کنترل بهداشتی و میکروبیولوژیکی اشیاء غذایی

محصولات غذایی می توانند به میکروارگانیسم های مختلفی آلوده شوند که منجر به فساد آنها، ایجاد مسمومیت و مسمومیت غذایی و همچنین عفونت هایی مانند سیاه زخم، بروسلوز، سل و غیره می شود. بیماری های حیوان، جراحات یا شرایط نامطلوب نگهداری از آن به نقض موانع محافظتی بدن و انتقال (انتقال) میکروارگانیسم ها به بافت ها و اندام های معمولاً استریل (بذر درون حیاتی) کمک می کند. در نتیجه، بافت های حیوان ذبح شده با تک یاخته ها، کلستریدیا و سایر میکروب ها آلوده می شود. با ورم پستان در شیر استافیلوکوک و استرپتوکوک ضربه خورده است. آلودگی ثانویه محصولات غذایی با میکروارگانیسم ها نیز امکان پذیر است. در این صورت منبع آلودگی اشیا هستند محیط(خاک، آب، حمل و نقل و غیره) و همچنین افراد بیمار و ناقلان باکتری. در دمای پایین نگهداری گوشت و فرآورده های گوشتی، حتی در گوشت منجمد، میکروب هایی که قادر به تولید مثل در شرایط سایکروفیلیک هستند (پسودوموناس، پروتئوس، آسپرژیلوس، پنی سیلیوم و غیره) ممکن است غالب شوند. میکروب هایی که در گوشت زندگی می کنند باعث موسیلاژ آن می شوند. فرآیندهای تخمیر و پوسیدگی ناشی از کلستریدیوم، پروتئوس، سودوموناس و قارچ ها را توسعه می دهد.

محصولات غلات، آجیل ها در شرایط رطوبت بالا می توانند با قارچ ها (آسپرگیلوس، پنی سیلیوم، فوزاریوم و غیره) آلوده شوند که باعث ایجاد مایکوتوکسیکوزهای غذایی می شود.

غذاهای گوشتی (ژله، سالاد گوشت، غذاهای گوشت چرخ کرده) می توانند باعث بیماری های مرتبط با سالمونلا، شیگلا، اشریشیا کلی اسهالی، پروتئوس، سویه های انتروتوکسیژن استافیلوکوک ها، انتروکوک ها شوند که در آنها تکثیر می شوند. کلوسریدیوم پرفرنجنسو باسیلوس سرئوس

شیر و فرآورده های لبنی می توانند عامل انتقال بروسلوز، سل و شیگلوز باشند. همچنین امکان ایجاد مسمومیت غذایی در نتیجه تولید مثل در محصولات لبنی سالمونلا، شیگلا و استافیلوکوک وجود دارد. تخم‌مرغ، پودر تخم‌مرغ و ملانژ در عفونت اولیه درون‌زای سالمونلای تخم‌ها، به‌ویژه تخم اردک، عامل سالمونلوز هستند.

ماهی و محصولات ماهی بیشتر به باکتری آلوده می شوند کلوسریدیوم بوتولینومو ویبریو پارهمولیکوس- عوامل مسمومیت غذایی و عفونت های سمی. این بیماری ها همچنین هنگام خوردن محصولات ماهی آلوده به مقدار زیادی سالمونلا، پروتئوس، مشاهده می شود. باسیلوس سرئوس، کلوسریدیوم پرفرنجنس.

سبزیجات و میوه ها را می توان با اشریشیا کلی اسهال زا، شیگلا، پروتئوس، سویه های آنتروپاتوژن استافیلوکوک آلوده و بذر داد. خیارشور می تواند عامل عفونت سمی ناشی از ویبریو پارهمولیتیکوس

تمام نتایج تجزیه و تحلیل میکروبیولوژیکی محصولات غذایی را می توان زودتر از 48-72 ساعت به دست آورد، یعنی. زمانی که محصول از قبل قابل فروش باشد. بنابراین، کنترل بر روی این شاخص ها ماهیت گذشته نگر است و در خدمت اهداف ارزیابی بهداشتی و بهداشتی یک شرکت تولید کننده یا فروش محصولات غذایی است.

تشخیص افزایش آلودگی میکروبی عمومی، باکتری های کلیفرم، نشان دهنده نقض رژیم دما در طول آماده سازی و / یا ذخیره سازی محصول نهایی است. تشخیص میکروارگانیسم های بیماری زا به عنوان شاخصی از مشکلات اپیدمیولوژیک غذاخوری، شرکت تجاری در نظر گرفته می شود.

رتبه بندی شاخص های میکروبیولوژیکی ایمنی مواد غذایی برای اکثر گروه های میکروارگانیسم ها طبق یک اصل جایگزین انجام می شود، یعنی. توده محصول نرمال می شود، که در آن باکتری های گروه اشریشیا کلی، اکثر میکروارگانیسم های بیماری زا مشروط، و همچنین میکروارگانیسم های بیماری زا، از جمله. سالمونلا و لیستریا مونوسیتوژنز. در موارد دیگر، استاندارد تعداد واحدهای تشکیل دهنده کلنی را در 1 گرم (سانتی متر 3) محصول (CFU / g، cm 3) منعکس می کند.

در محصولات مصرف انبوه که در جداول SanPin 2.3.2.1078-01. الزامات بهداشتی برای ایمنی و ارزش غذایی محصولات غذاییهیچ استاندارد میکروبیولوژیکی، میکروارگانیسم های بیماری زا، از جمله وجود ندارد. سالمونلا در 25 گرم از محصول مجاز نیست.

کنترل بهداشتی و باکتریولوژیکی باید مشمول اهداف تهیه و فروش محصولات غذایی باشد.

داده های مطالعه بهداشتی و میکروبیولوژیکی امکان ارزیابی عینی وضعیت بهداشتی و بهداشتی اشیاء مورد بررسی، شناسایی نقض رژیم بهداشتی و انجام سریع اقدامات هدفمند برای از بین بردن آنها را فراهم می کند.

روش های مختلفی برای نمونه برداری از تجهیزات و موجودی های مختلف برای تحقیقات میکروبیولوژیکی وجود دارد: روش های سواب، چاپ، پر کردن آگار. از این میان روش شستشوی تامپون بیشتر مورد استفاده قرار می گیرد.

کنترل بهداشتی و میکروبیولوژیکی بر اساس تشخیص باکتری در شستشوی گروه Escherichia coli (BGKP) است - شاخص های آلودگی مدفوع اشیاء مورد مطالعه. مطالعات بر روی استافیلوکوکوس اورئوس، باکتری های بیماری زا از خانواده روده، تعیین کل آلودگی میکروبی با توجه به نشانه ها انجام می شود. به عنوان مثال، گرفتن سواب برای تشخیص استافیلوکوک ها هنگام معاینه مغازه های شیرینی پزی، آشپزخانه های لبنیات و واحدهای غذایی موسسات پزشکی ضروری است.

موارد کنترل بهداشتی و میکروبیولوژیکی:

∨ شستن از دست و لباس کارگران مواد غذایی (آب)؛

∨ تجهیزات، موجودی، ظروف و سایر اشیاء؛

∨ غذاهای آماده، محصولات آشپزی و فاسد شدنی؛

∨ مواد خام و محصولات نیمه تمام در جریان فرآیند فن آوری (طبق نشانه های اپیدمیولوژیک)؛

∨ آب آشامیدنی از منابع تامین آب متمرکز و به ویژه غیرمتمرکز.

شستشوی دست از دست پرسنل درگیر در فرآوری محصولات خام قبل از شروع کار جمع آوری می شود. سواب ها در عرض 2 ساعت به آزمایشگاه باکتریولوژی تحویل داده می شوند و می توان آنها را به مدت حداکثر 6 ساعت در دمای 10-1+ درجه سانتی گراد نگهداری و حمل کرد.

در آزمایشگاه، سواب ها روی محیط کسلر با لاکتوز یا KODA تلقیح می شوند، در حالی که یک سواب با محیط داخل لوله آزمایش پایین می آیند و مایع شستشوی باقی مانده منتقل می شود. کشت های روی محیط های Kessler و KODA در دمای 37 درجه سانتی گراد انکوبه می شوند.

پس از 18 تا 24 ساعت، تمام لوله‌های آزمایش با محیط کسلر بر روی بخش‌هایی از فنجان‌ها با محیط Endo تلقیح می‌شوند؛ از محیط KODA، تلقیح فقط در صورتی انجام می‌شود که رنگ محیط تغییر کند (از بنفش اصلی به زرد یا سبز) یا کدر شود. . تلقیح روی محیط Endo در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 18 تا 24 ساعت رشد می کند.

اسمیر از مستعمرات مشخصه BGKP تهیه می شود که با گرم رنگ آمیزی می شوند، در صورت لزوم، آنها علاوه بر این بر اساس آزمایشات پذیرفته شده عمومی برای باکتری های گروه Escherichia coli شناسایی می شوند. هنگام ارزیابی نتایج یک معاینه بهداشتی و میکروبیولوژیکی، آنها از استانداردهایی استفاده می کنند که در سواب های گرفته شده از مراکز غذایی، BGKP باید وجود نداشته باشد. تشخیص BGKP در سواب ها از سطوح تمیز، آماده برای اقلام کار، موجودی، تجهیزات، دست ها و لباس های بهداشتی پرسنل نشان دهنده نقض رژیم بهداشتی است. در صورت تشخیص مکرر CGB در درصد قابل توجهی از سواب ها، آزمایش سواب ها از نظر وجود انتروباکتری های بیماری زا توصیه می شود. در همان زمان، سواب و مایع شستشو بر روی محیط های غنی کننده - براث سلنیت یا محیط منیزیم (امکان استفاده از محیط های مولر و کافمن) تلقیح می شوند. تحقیقات بیشتر بر اساس روش پذیرفته شده عمومی انجام می شود.

مطالعه شیر و فرآورده های لبنی

میکرو فلور محصولات لبنی

شیر یک ماده مغذی بسیار مطلوب برای رشد بسیاری از میکروارگانیسم ها است. پس از خوردن شیر و لبنیات آلوده، عفونت هایی مانند تب حصبه، اسهال خونی، وبا، اشریشیوز، بروسلوز، سل، مخملک، التهاب لوزه ها، تب کیو، بیماری تب برفکی، آنسفالیت منتقله از کنه، عفونت های سمی سالمونلا، عفونت های استافیلوکوکسی، پوکی لوزه، و غیره ممکن است رخ دهد.

میکرو فلور خاص و غیر اختصاصی شیر و لبنیات وجود دارد.

به میکرو فلور خاص شیر و محصولات لبنی شامل میکروب ها - پاتوژن های اسید لاکتیک، الکل و تخمیر اسید پروپیونیک است. فرآیندهای میکروبیولوژیکی به دلیل فعالیت حیاتی این میکروارگانیسم ها زمینه ساز تهیه محصولات شیر ​​تخمیر شده (پنیر، کفیر، شیر دلمه، اسیدوفیلوس و غیره) است.

باکتری های تخمیر اسید لاکتیک در نظر گرفته می شوند میکرو فلور طبیعی شیر و محصولات لبنی . استرپتوکوک لاکتیک نقش اصلی را در ترش کردن شیر و لبنیات بر عهده دارد. S. lactis، S. cremarisنژادهای کمتر فعال استرپتوکوک اسید لاکتیک ( S. citrovorus، S. lactis subsp. دیاستیلاکتیس) اسیدهای فرار و آروماتیک تولید می کند و به همین دلیل در تولید پنیرها به طور گسترده استفاده می شود. گروه باکتری های اسید لاکتیک نیز شامل چوب های اسید لاکتیک است: لاکتوباکتریوم بولگاریکوم، لاکتوباکتریوم کازئی، لاکتوباکتریوم اسیدوفیلوسو غیره.

عوامل اصلی تخمیر الکلی در شیر و لبنیات مخمر هستند. ساکارومایسس لاکتیسو غیره.).

میکرو فلور غیر اختصاصی شیر از باکتری های پوسیده تشکیل شده است پروتئوسباسیل های هوازی و بی هوازی ( B. subtilis، B. megatherium، C. putrificum) و خیلی های دیگر

آلودگی میکروبی شیر از قبل از پستان شروع می شود. در فرآیند شیردوشی، بذر اضافی آن از سطح پوست پستان، از دست، از رگ، جایی که از هوای اتاق وارد می شود، رخ می دهد. شدت این بذر اضافی به طور کلی به نحوه رعایت شرایط اولیه بهداشتی و بهداشتی هنگام تهیه شیر بستگی دارد. شرایط نامناسب نگهداری شیر نیز می تواند به رشد بیشتر میکرو فلورا در آن کمک کند.

فاز باکتری کش شیر تازه دوشیده شده، اگرچه از قبل حاوی صدها میکروب در هر 1 سانتی متر مکعب است (عمدتاً استافیلوکوک ها و استرپتوکوک ها)، به دلیل وجود آنتی بادی های طبیعی در آن، خاصیت باکتری کشی دارد. بنابراین، برای مدتی، رشد باکتری در شیر به تاخیر می افتد. این دوره فاز باکتری کش نامیده می شود. مدت فاز باکتری کشی بسته به ویژگی های فیزیولوژیکی حیوان از 2 تا 36 ساعت متغیر است (در اوایل دوره شیردهی، فعالیت باکتری کشی شیر بیشتر است).

نگهداری شیر در دمای بالا (30 تا 37 درجه سانتیگراد) مدت فاز باکتری کشی را به شدت کوتاه می کند. همین اثر توسط آلودگی شدید اضافی شیر با میکروب ها اعمال می شود.

پس از پایان مرحله باکتری کشی، رشد میکرو فلورا آغاز می شود. ترکیب گونه ای آن در طول زمان تحت تأثیر تغییرات در خواص بیوشیمیایی محیط و در نتیجه روابط متضاد و همزیستی بین گونه های میکروبی تغییر می کند.

فاز میکرو فلور مخلوط. حدود 12 ساعت طول می کشد.در این دوره، غلبه هیچ گونه گروهی از میکروب ها هنوز رخ نمی دهد، زیرا فراوانی بسترهای مغذی و امکانات فضایی به بسیاری از انواع میکروارگانیسم ها اجازه می دهد کاملا آزادانه رشد کنند.

فاز استرپتوکوک اسید لاکتیک. در این مرحله میکروارگانیسم های گروه نامبرده غالب هستند ( S. lactis، S. termofilus، S. cremorisو غیره.). لاکتوز به شدت توسط آنها به اسید لاکتیک تبدیل می شود، واکنش به سمت اسید تغییر می کند. تجمع اسید لاکتیک در آینده منجر به مرگ استرپتوکوک های اسید لاکتیک و جایگزینی آنها با باکتری های اسید لاکتیک مقاوم تر به اسید می شود. این اتفاق پس از 48 ساعت رخ می دهد و شروع مرحله سوم را نشان می دهد.

فاز چوب های اسید لاکتیک. در آن، موقعیت غالب توسط اشکال میله ای شکل باکتری های اسید لاکتیک به دست می آید. ( L. lactis، L. crusei، L. bulgaricumو غیره.). واکنش اسیدی حاصل از محیط منجر به مهار رشد و مرگ تدریجی انواع دیگر باکتری ها می شود.

در پایان مرحله سوم، فرصت های بیشتر برای توسعه میکرو فلور اسید لاکتیک تمام می شود و قارچ ها جایگزین آنها می شوند، که اسید لاکتیک به عنوان یک سوبسترای مغذی عمل می کند.

فاز میکرو فلور قارچی در این دوره کپک ها و مخمرهایی ایجاد می شوند که فعالیت حیاتی آنها منجر به از بین رفتن ارزش غذایی آن توسط محصول می شود. مخمرها عمدتاً توسط گونه های این جنس نشان داده می شوند تورولابرخی از گونه های ساکارومیست ها کمتر یافت می شوند.

از قالب های یافت شده: قالب شیر ( اویدیم لاکتیس) روی سطح شیر دلمه و خامه ترش را به شکل کرک و همچنین آسپرژیلوس، پنی سیلیوم و موکوراسه را می پوشاند.

عمل فلور قارچی منجر به خنثی شدن محیط می شود و این باعث می شود دوباره برای باکتری ها مناسب باشد. ایجاد باکتری های پوسیده می شود که باعث پروتئولیز کازئین و در نهایت گروهی از باکتری های بوتیریک تشکیل دهنده هاگ بی هوازی می شود.

فعالیت میکروفلور در حال تغییر تنها با شروع کانی سازی کامل تمام مواد آلی شیر متوقف می شود.

تحت شرایط خاص، فرآیند تغییر بیوسنوزهای میکروبی ممکن است از طرح فوق منحرف شود. بنابراین، باکتری‌های اسید لاکتیک را می‌توان از همان ابتدا توسط میکروب‌های گروه اشریشیا کلی، در صورتی که گروه دوم به تعداد زیاد وجود داشته باشند، مهار کرد. مخمرها می توانند غلظت قابل توجهی از الکل تولید کنند، که در محصولاتی مانند کفیر (0.2-0.6٪) و به ویژه کومیس (0.9-2.5٪) وجود دارد. وجود الکل شرایطی را برای رشد بعدی باکتری های اسید استیک ایجاد می کند که الکل را به اسید استیک تخمیر می کنند. وجود آنتی بیوتیک ها و سایر مواد مهار کننده و خنثی کننده میکرو فلور در شیر نیز می تواند فرآیندهای اسید لاکتیک را کند کند.

با این روش آنالیز آب، مقدار معینی آب از یک غشاء مخصوص با اندازه منافذ حدود 0.45 میکرون عبور داده می شود. در نتیجه تمام باکتری های موجود در آب روی سطح غشا باقی می مانند. پس از آن، غشای حاوی باکتری برای مدت معینی در محیط غذایی مخصوص در دمای 30-37 درجه سانتیگراد قرار می گیرد. در این دوره که دوره جوجه کشی نامیده می شود، باکتری ها فرصت تکثیر پیدا می کنند و کلنی های کاملاً مشخصی تشکیل می دهند. که شمارش آنها از قبل آسان است. در نتیجه، می توانید این را مشاهده کنید: یا حتی این تصویر: از آنجایی که این روش تجزیه و تحلیل آب فقط شامل تعیین است تعداد کلباکتری های تشکیل دهنده کلنی انواع متفاوت، پس با توجه به نتایج آن نمی توان به طور صریح در مورد وجود میکروب های بیماری زا در آب قضاوت کرد. با این حال، تعداد بالای میکروبی نشان‌دهنده آلودگی کلی باکتریولوژیکی آب و احتمال بالای حضور ارگانیسم‌های بیماری‌زا است.

هنگام تجزیه و تحلیل آب، لازم است نه تنها محتوای سمی را کنترل کنید مواد شیمیاییو همچنین تعداد میکروارگانیسم هایی که آلودگی باکتریولوژیکی آب آشامیدنی را مشخص می کنند، TMF تعداد کل میکروبی است. در آب تامین کننده آب متمرکز، این تعداد نباید از 50 CFU / ml و در چاه ها، چاه ها - بیش از 100 تجاوز کند. CFU / ml

تحقیقات بهداشتی و میکروبیولوژیکی آب به صورت برنامه ریزی شده انجام می شود
به منظور نظارت فعلی و همچنین برای اپیدمیولوژیک خاص
شهادت کیم اهداف اصلی چنین تحقیقاتی عبارتند از:

آب آشامیدنی منبع آب مرکزی (آب لوله کشی)؛

آب آشامیدنی تامین آب غیر متمرکز؛

آب از منابع آب سطحی و زیرزمینی؛

فاضلاب؛

آب مناطق ساحلی دریاها؛

آب استخر.

شاخص های اصلی برای ارزیابی وضعیت میکروبیولوژیکی آب آشامیدنی مطابق با اسناد نظارتی فعلی عبارتند از:

1. شمارش کل میکروبی (TMC) - تعداد باکتری های مزوفیل در 1 میلی لیتر آب.

اگر تیتر- کوچکترین حجم آب (در میلی لیتر) که حداقل یک نفر در آن زندگی می کند
سلول میکروبی مربوط به BGKP.
شاخص BGKP- مقدار BGKP در 1 لیتر آب.

3. تعداد هاگ کلستریدیاهای احیا کننده سولفیت در 20 میلی لیتر آب.

4. تعداد کلیفاژها در 100 میلی لیتر آب.

تعیین TMC امکان ارزیابی سطح آلودگی میکروبیولوژیکی آب آشامیدنی را فراهم می کند. این شاخص برای تشخیص فوری آلودگی میکروبی بسیار ضروری است.

تعداد کل میکروبی- این تعداد میکروارگانیسم‌های هوازی مزوفیل و بی‌هوازی اختیاری است که قادر به تشکیل کلنی در آگار مغذی در دمای 37 درجه سانتیگراد و در عرض 24 ساعت هستند که با افزایش دو برابری قابل مشاهده است.

هنگام تعیین تعداد کل میکروبی، 1 میلی لیتر از آب آزمایش به یک ظرف پتری استریل اضافه می شود و 10-12 میلی لیتر آگار مغذی مذاب گرم (44 درجه سانتیگراد) ریخته می شود. محیط به آرامی با آب مخلوط می شود، به طور یکنواخت و
بدون اینکه حباب های هوا در ته فنجان پخش شود، سپس با یک درب بپوشانید و بگذارید تا جامد شود. محصولات در ترموستات 37 درجه سانتیگراد به مدت 24 ساعت انکوبه می شوند. تعداد کل کلنی های رشد کرده در هر دو ظرف را بشمارید و مقدار متوسط ​​را تعیین کنید. نتیجه نهایی به صورت تعداد واحدهای تشکیل دهنده کلنی (CFU) در 1 میلی لیتر آب آزمایش بیان می شود. 1 میلی لیتر آب آشامیدنی نباید بیش از 50 CFU داشته باشد

تعریف BGKP
در همان زمان، باکتری های کلیفرم رایج - OKB و باکتری های کلیفرم مقاوم به حرارت - TKB تعیین می شوند.

GKB میله های گرم منفی و غیر اسپورساز هستند که لاکتوز را به اسید و گاز در دمای 37 درجه سانتی گراد به مدت 24 تا 48 ساعت تخمیر می کنند. TKB جزو OKB هستند، آنها علائم خود را دارند، اما من در دمای 44 درجه سانتیگراد تخمیر می کنم. برای تعیین انتروباکتری - روش فیلترهای غشایی یا تیتراسیون.

عدد میکروبی - معیار اصلی برای ارزیابی وضعیت میکروبیولوژیکی آب آشامیدنی،بر اساس اسناد نظارتی فعلی، TMC (تعداد کل میکروبی) است که تعداد باکتری‌های هوازی و بی‌هوازی را در یک میلی‌لیتر آب که در روز در دمای 37 درجه در یک محیط غذایی تشکیل می‌شوند، مشخص می‌کند. این شاخص برای تشخیص سریع آلودگی میکروبی بسیار ضروری است.

برای تعیین تعداد کل میکروبییک میلی لیتر از آب آزمایش به یک ظرف پتری استریل اضافه می شود، سپس 10-15 میلی لیتر از آگار مغذی گرم (حدود 44 درجه سانتیگراد) به شکل مذاب ریخته می شود. محیط به دقت با آب مخلوط می شود، به طور یکنواخت و بدون حباب هوا در کف ظرف پخش می شود، سپس با درب بسته می شود و در ظرف پتری قرار می گیرد تا جامد شود. در فنجان دیگر هم همین کار انجام می شود. کاشت در ترموستات در دمای 37 درجه سانتیگراد در طول روز انکوبه می شود. سپس با بزرگنمایی مضاعف زیر میکروسکوپ، تعداد کل کلنی های رشد یافته در دو فنجان شمارش شده و مقدار متوسط ​​آن مشخص می شود. در 1 میلی لیتر آب آشامیدنی نباید بیش از 50 CFU وجود داشته باشد.

ویژگی های استرپتوکوک به عنوان SPM:

استرپتوکوک ها در محیط بسیار پایدار نیستند، آنها فقط می توانند چندین روز در گرد و غبار اتاق ها، روی کتانی و وسایل خانه بیمار زنده بمانند. با این حال، شرایط حفظ بقای آنها نزدیک به طول عمر تعدادی از باکتری های بیماری زا است که توسط قطرات هوا وارد محیط می شوند (مثلاً عامل ایجاد کننده دیفتری و غیره).

یکی از شاخص‌های آلودگی هوای داخلی تازه‌تر، استرپتوکوک α-همولیتیک است که کمترین مقاومت را دارد. در هوای مکان های غیر مسکونی، استرپتوکوک ها شناسایی نمی شوند.

روش‌های نشان‌دادن و شناسایی استرپتوکوک‌ها در مقایسه با استافیلوکوک‌ها پیچیده‌تر و زمان‌برتر است.

ترموفیل ها

جایگاه ویژه ای در بین SPM ها توسط میکروب های گرمادوست اشغال شده است که وجود آنها در خاک یا آب مخازن نشان دهنده آلودگی به کود، کمپوست یا مدفوع تجزیه شده انسان است.

میکروارگانیسم های گرما دوست شامل باکتری های گرم مثبت، کوکسی ها، باسیل ها، اسپیریل ها، اکتینومیست ها، چند قارچ هستند که می توانند در دمای 60 درجه سانتیگراد و بالاتر تکثیر شوند. بیشتر ترموفیل ها هوازی هستند.

میکروارگانیسم های ترموفیل در توده های کمپوست و کود دامی تکثیر می شوند که به دلیل فعالیت حیاتی آنها، لایه های سطحی تا 60-70 0 C گرم می شوند. در چنین شرایطی، فرآیند خنثی سازی بیوترمال توده های آلی که تحت گرم شدن خود قرار می گیرند، انجام می شود، میکروارگانیسم های بیماری زا و E. coli می میرند.

بنابراین، وجود ترموفیل ها نشان دهنده آلودگی طولانی مدت خاک با کمپوست است، در حالی که BGKP (OKB) در مقادیر ناچیز یافت می شود. و برعکس، تیتر بالای BGKP (OKB) با تعداد کمی ترموفیل، نشانگر آلودگی مدفوع تازه است.

ترموفیل ها همچنین به عنوان میکروارگانیسم های شاخص بهداشتی برای توصیف مراحل فردی فرآیند کانی سازی زباله های آلی عمل می کنند.

میکروبیولوژی آب بهداشتی

آب زیستگاه طبیعی افراد متنوع است. میکروارگانیسم ها (انواع مختلف باکتری، قارچ، تک یاخته و جلبک). به مجموع همه موجودات آبزی می گویند پلانکتون میکروبی ترکیب کمی میکرو فلورا عمدتاً تحت تأثیر منشاء آب است - سطح شیرین (آبهای جاری رودخانه ها، نهرها؛ و دریاچه های راکد، حوضچه ها، مخازن)، زیرزمینی (خاک، زمین، آرتزین)، آب های جوی و شور. با توجه به ماهیت استفاده، آب آشامیدنی (تامین آب متمرکز و محلی)، آب استخر، یخ پزشکی و خانگی متمایز می شود. فاضلاب نیاز به توجه ویژه دارد.

میکرو فلور اجسام آبی از دو گروه تشکیل می شود:

اتوکتون (یا آبزی) و

میکروارگانیسم های آلوکتون (از بیرون با آلودگی از منابع مختلف سقوط می کنند).

1. میکرو فلور اتوکتون - مجموعه ای از میکروارگانیسم ها که دائماً در آب زندگی می کنند و تکثیر می شوند. به عنوان یک قاعده، میکرو فلور آب شبیه ترکیب میکروبی خاک است که آب با آن در تماس است. این شامل میکروکوکس، سارکین، برخی از گونه ها است پروتئوس و لپتوسپیرا. از بی هوازی ها - باسیل سرئوس و برخی از انواع کلستریدیا. این میکروارگانیسم ها بازی می کنند نقش مهمدر چرخه مواد، تجزیه ضایعات آلی، فیبر و غیره.

2. آلودگی بیولوژیکی بدنه های آبی.

با فاضلاب، طوفان، آب های ذوب شده، بسیاری از انواع میکروارگانیسم ها وارد مخازن می شوند و به طور چشمگیری بیوسنوز میکروبی را تغییر می دهند. مسیر اصلی آلودگی میکروبی ورود زباله های شهری و فاضلاب تصفیه نشده است. همچنین - هنگام حمام کردن افراد، دام ها، شستن لباس ها، و غیره. نمایندگان میکرو فلور طبیعی انسان، UP، بیماری زا (عوامل ایجاد کننده عفونت های روده، لپتوسپیروز، یرسینیوز، ویروس های فلج اطفال، هپاتیت A و غیره) می توانند وارد آب شوند. لازم به یادآوری است که آب محیط مساعدی برای تولید مثل میکروارگانیسم های بیماری زا نیست که موجودات انسانی یا حیوانی برای آنها بیوتوپ هستند.

خودپالایی مخازن

انتشار از میکروارگانیسم های آلوده پس از آلودگی ارگانیک بدنه های آبی به دلیل فعال شدن رقابتی میکرو فلور ساپروفیت مشاهده می شود که منجر به تجزیه سریع مواد آلی، کاهش تعداد باکتری ها، به ویژه "مدفوع" می شود. اصطلاح "saprobity" وجود دارد - (sapros - پوسیده، یونانی) مجموعه ای از ویژگی های یک مخزن را نشان می دهد، از جمله ترکیب و تعداد میکروارگانیسم ها در آب حاوی مواد آلی و معدنی در غلظت های خاص. فرآیندهای خودپالایی آب در مخازن به صورت متوالی و پیوسته انجام می شود. مناطق پلی ساپروبیک، مزاساپروبیک و الیگوساپروبیک وجود دارد.

مناطق پلی ساپروبیک- مناطق بسیار آلوده آنها حاوی مقدار زیادی ماده آلی هستند و تقریباً فاقد اکسیژن هستند. تعداد باکتری ها در 1 میلی لیتر آب در ناحیه پلی ساپروبیک به یک میلیون یا بیشتر می رسد.

مناطق مزازاپروبیک- مناطق با آلودگی متوسط تعداد میکروارگانیسم ها صدها هزار در 1 میلی لیتر است.

مناطق الیگوساپروبیک- مناطق آب شفاف آنها با یک فرآیند خود تمیز شوندگی کامل مشخص می شوند. تعداد باکتری از 10 تا 1000 در 1 میلی لیتر آب.

بنابراین، میکروارگانیسم های بیماری زا که وارد مخزن می شوند در مناطق پلی ساپروبیک کاملاً فراوان هستند، به تدریج در مناطق مزوساپروبیک از بین می روند و عملاً در مناطق الیگوساپروبیک یافت نمی شوند.

در مطالعه میکروبیولوژیکی بهداشتی آب، OKB، انتروکوک، استافیلوکوک و میکروارگانیسم های بیماری زا (سالمونلا، وبا ویبریوس، لپتوسپیرا، شیگلا و غیره) جدا می شوند. کلیه مطالعات بهداشتی و میکروبیولوژیکی آب توسط GOST مربوطه تنظیم می شود.

زمینه های تحقیقات بهداشتی و میکروبیولوژیکی آب:

انتخاب منبع تامین آب متمرکز و کنترل بر آن؛

نظارت بر اثربخشی ضد عفونی آب آشامیدنی تامین آب متمرکز؛

نظارت بر منابع زیرزمینی تامین آب (چاه های آرتزین، آب خاک و غیره)؛

نظارت بر منابع مصرف آب فردی (چاه، چشمه و غیره)؛

نظارت بر وضعیت بهداشتی و اپیدمیولوژیک آب در مخازن باز.

نظارت بر اثربخشی ضد عفونی آب در استخرهای شنا؛

بررسی کیفیت تصفیه و گندزدایی فاضلاب؛

بررسی شیوع بیماری های عفونی در آب.

تجزیه و تحلیل بهداشتی و میکروبیولوژیکی آب آشامیدنی

در حال حاضر تنظیم شده است راهنمای MUK 4.2.1018-01.

1. تعریف MCH- تعداد کل میکروارگانیسم‌های هوازی مزوفیل و بی‌هوازی اختیاری که قادر به تشکیل کلنی در نوترینت آگار در دمای 0370 درجه سانتیگراد به مدت 24 ساعت هستند.

از هر نمونه، حداقل دو حجم 1 میلی‌لیتری به 2 ظرف پتری حاوی 1 میلی‌لیتر آب + 8 تا 12 میلی‌لیتر مذاب سرد شده (45 تا 49 درجه سانتیگراد) مواد مغذی آگار تلقیح شده، مخلوط شده، اجازه داده می‌شود تا جامد شود، در ترموستات قرار می‌گیرد. 37 0 C، 24 ساعت. سپس تمام کلنی های رشد کرده روی فنجان را با بزرگنمایی 2 برابر بشمارید (اما نه بیشتر از 300 کلنی روی فنجان). تعداد کلنی ها در صفحات خلاصه شده و بر 2 تقسیم می شود - نتیجه در CFU در هر 1 میلی لیتر آب بیان می شود. حداکثر 50 CFU در هر 1 میلی لیتر آب مجاز است.

تعیین باکتری های کلیفرم معمولی و مقاوم به گرماروش فیلتراسیون غشایی (روش اصلی).

باکتری کلیفرم رایج - OKB -میله های گرم، اکسیداز، غیر اسپورساز، قادر به رشد در محیط های لاکتوز افتراقی، تخمیر لاکتوز به کیلوگرم در دمای 0 37 0 C به مدت 24 ساعت.

باکتری کلیفرم مقاوم به حرارت - TKB -از جمله OKB هستند، تمام ویژگی های خود را دارند، علاوه بر این، آنها قادر به تخمیر لاکتوز به KG در t 0 44 0 C به مدت 24 ساعت هستند.

این روش مبتنی بر فیلتر کردن حجم معینی از آب از طریق فیلترهای غشایی، رشد محصولات زراعی بر روی یک محیط مغذی متفاوت با لاکتوز، و شناسایی متعاقب آن کلنی‌ها با ویژگی‌های فرهنگی و بیوشیمیایی است.

3 حجم 100 میلی لیتری را آنالیز کنید، می توانید حجم ها را تقسیم کنید (10، 40، 100، 150 میلی لیتر). حجم اندازه گیری شده آب از طریق فیلترهای غشایی فیلتر می شود. فیلترها بر روی محیط Endo (حداکثر سه فیلتر در هر 1 فنجان) قرار داده می شوند و در دمای 0 37 0 C به مدت 24 ساعت انکوبه می شوند.

اگر رشدی وجود نداشته باشد - نتیجه منفی - OKB و TKB شناسایی نشدند. اگر کلنی های معمولی مثبت لاکتوز با اثری در پشت فیلتر وجود داشته باشد، شمارش می شود و تعلق آنها به OKB و TKB را تایید می کند. برای این کار تحقیق کنید

فعالیت اکسیداز

متعلق به باکتری های گرم منفی

تخمیر لاکتوز به KG (در دو لوله آزمایش - در t 0 37 0 C و 44 0 C).

نتیجه با فرمول Х=а∙100/V محاسبه می شود که در آن

a تعداد مستعمرات (در مجموع)،

V حجم آب (در کل) است.

X تعداد کلنی ها در 100 میلی لیتر آب است.

نتیجه در CFU OKB (TKB) در 100 میلی لیتر آب بیان می شود. به طور معمول، OKB (TKB) در 100 میلی لیتر آب آشامیدنی نباید تعیین شود.

همچنین تعریف کنید

اسپور کلستریدیاهای کاهنده سولفیت- باکتری های میله ای شکل بی هوازی تشکیل دهنده اسپور که سولفیت سدیم را در آگار سولفیت آهن در دمای 0 44 درجه سانتیگراد به مدت 16-18 ساعت کاهش می دهند. این روش مبتنی بر رشد محصولات در آگار سولفیت آهن در شرایط نزدیک به بی هوازی و شمارش تعداد کلنی های سیاه است.

حجم 20 میلی لیتر آب در یک حمام آب در دمای 75-80 درجه سانتیگراد به مدت 15 دقیقه حرارت داده می شود تا اشکال رویشی از بین برود، سپس از طریق فیلتر باکتریایی که در لوله آزمایش با آگار آهن-سولفیت مذاب قرار داده می شود، فیلتر می شود. 80 0 C)، سرد شده، در ترموستات 0 44 0 C به مدت 16-18 ساعت قرار می گیرد.

تعریف کلیفاژها

کولیفاژها ویروس های باکتریایی هستند که قادر به لیز هستند E. coliو در دمای 0 37 0 C پس از 18 تا 20 ساعت، مناطق لیز چمن باکتریایی (پلاک) را روی نوترینت آگار تشکیل دهید. تعداد پلاک ها محاسبه نمی شود - تجزیه و تحلیل کیفی است.

مطالعه فاضلابتنظیم شده است MU 2.1.5.800 - 99 "سازمان نظارت بهداشتی و اپیدمیولوژیک دولتی برای گندزدایی فاضلاب"، 1999 تلقیح مستقیم به 4 فنجان با محیط Endo، هر 0.5 میلی لیتر (2 میلی لیتر - کل حجم) اعمال می شود. سپس تعداد CFU OKB و TKB شمارش می شود و برای 100 میلی لیتر آب مجدداً محاسبه می شود.

آب استخر طبق قوانین و استانداردهای بهداشتی و اپیدمیولوژیک بررسی می شود - SanPin 2.1.2.1188-03. AT 100 میلی لیتر آباستخرهابیش از 1 CFU OKB مجاز نیست، TKB، کلیفاژها، استافیلوکوکوس اورئوس، پاتوژن های عفونت های روده، سودوموناس آئروژینوزا مجاز نیستند. کنترل آزمایشگاهی برای شاخص های میکروبیولوژیکی اصلی (OKB، TKB، کولیفاژها و استافیلوکوکوس اورئوس) 2 بار در ماه انجام می شود. مطالعات برای حضور پاتوژن های عفونت های روده ای در یک وضعیت اپیدمی نامطلوب انجام می شود.

هنگامی که موارد پراکنده ذات الریه با علت ناشناخته ظاهر می شود یا شیوع عفونت های تنفسی حاد خارج از فصل در بین بازدیدکنندگان استخر رخ می دهد، آب برای وجود لژیونلا آزمایش می شود. لژیونلا پنوموفیلی) که تکثیر آن کمک می کند آب گرمو پاشیده شدن هنگام تنفس، یک آئروسل ظریف حاوی لژیونلا وارد ریه ها می شود که می تواند باعث "بیماری لژیونرها" یا تب پونتیاک شود.

برنامه شماره 2

به SanPiN 2.1.2.1188-03

بیماری های طبیعت عفونی،

که می تواند از طریق استخرهای شنا منتقل شود

میکروب شناسی بهداشت خاک

خاک مخزن اصلی و زیستگاه طبیعی میکروارگانیسم هایی است که در فرآیندهای خودپالایی خاک و همچنین در چرخه مواد در طبیعت نقش دارند. ترکیب کیفی خاک بسیار متنوع است و عمدتاً شامل باکتری های هاگ ساز، اکتینومیست ها، اسپیروکت ها، تک یاخته ها، جلبک های سبز آبی، مایکوپلاسماها، قارچ ها و ویروس ها است. متنوع ترین منظره میکروبی در منطقه ریشه گیاهان - منطقه ریزوفری است. تعداد میکروارگانیسم های خاک به چندین میلیارد در هر گرم می رسد وزن زنده میکروارگانیسم ها در خاک در هر هکتار حدود 1000 کیلوگرم است.

میکروارگانیسم ها به طور نابرابر در خاک توزیع می شوند. در سطح (1-2 میلی متر) تعداد نسبتا کمی از آنها وجود دارد. متنوع ترین و متعدد ترین میکرو فلورا در عمق 10-20 سانتی متر است، جایی که فرآیندهای اصلی بیوشیمیایی تبدیل مواد آلی انجام می شود. در عین حال، میکروارگانیسم های بیماری زا و نمایندگان میکرو فلور طبیعی بدن انسان و حیوان که وارد خاک شده اند، به عنوان یک قاعده، برای مدت طولانی زنده نمی مانند. با این حال، بسیاری از باکتری ها که بخشی از میکرو فلور طبیعی انسان هستند نیز در بیوسنوز خاک گنجانده شده اند. در جداسازی میکرو فلور خاک به ساکن و به طور موقت مشکل وجود دارد. برای روشن شدن نقش خاک در انتقال بیماری‌های عفونی، لازم است مدت زمان احتمالی ماندگاری باکتری‌های بیماری‌زا در خاک را بدانیم.

گروه 1شامل میکروارگانیسم های بیماری زا است که به طور دائم در خاک زندگی می کنند، به عنوان مثال، کلستریدیوم بوتولینوم. باکتری ها با مدفوع انسان و حیوان وارد خاک می شوند و هاگ آنها به طور نامحدود در آن باقی می ماند.

گروه 2شامل پاتوژن های تشکیل دهنده هاگ است که خاک برای آنها مخزن ثانویه است. باکتری ها با مواد دفعی انسان و حیوانات و همچنین با اجساد حیوانات مرده وارد خاک می شوند. در شرایط مساعد، آنها می توانند تکثیر شوند و به صورت هاگ برای مدت طولانی باقی بمانند.

گروه 3شامل میکروارگانیسم های بیماری زا است که با مواد دفعی انسان و حیوان وارد خاک می شوند و برای چندین هفته یا ماه باقی می مانند. این شامل باکتری های تشکیل دهنده هاگ است.

مطالعه بهداشتی و میکروبیولوژیکی آب با در نظر گرفتن مجموعه ای از شاخص ها انجام می شود: تعداد کل میکروارگانیسم های ساپروفیت و وجود SPM (OKB، TKB، کلستریدیوم perfringens و غیره.). تعداد بالای میکرو فلور ساپروفیت نشان دهنده آلودگی آلی است، با آلودگی میکروبی تحت سلطه SPM.

میکروبیولوژی هوای بهداشتی

هوا محیطی است که در آن میکروارگانیسم ها قادر به تکثیر نیستند. آلودگی باکتریایی هوای داخل خانه همیشه بیشتر از آلودگی هوای اتمسفر است، از جمله میکروارگانیسم های بیماری زا که از افراد بیمار، حیوانات و ناقلان باکتری وارد هوا می شوند. میکرو فلور هوا به طور مشروط به ساکن (بیشتر تشخیص داده می شود) و موقت، کمتر مقاوم در برابر عوامل مختلف (به طور پراکنده تشخیص داده می شود) تقسیم می شود.

میکرو فلور هوای دائمی توسط میکروارگانیسم های خاک تشکیل می شود. اینها عمدتاً میکروکوکس، سارکین، ب. subtilis, برخی از انواع اکتینومیک, پنیسیلوم, آسپرژیلوس و غیره.

میکرو فلور موقت هوا نیز عمدتاً به دلیل میکروارگانیسم های خاک و همچنین به دلیل گونه هایی که از سطح بدنه های آبی می آیند تشکیل می شود.

آلودگی هوا توسط میکروارگانیسم های بیماری زا عمدتاً به شکل قطرات به عنوان بخشی از آئروسل ایجاد می شود که در هنگام مکالمه، سرفه و عطسه ایجاد می شود. بسته به اندازه قطرات، بار الکتریکی آنها و سرعت حرکت در هوا، یک آئروسل می تواند فازهای قطره ای و غباری و همچنین هسته های قطره ای داشته باشد.

ولی) فاز افت -با قطرات کوچکی نشان داده می شود که برای مدت طولانی در هوا باقی می مانند و قبل از ته نشین شدن تبخیر می شوند.

ب) فاز گرد و غبار -با قطرات بزرگ، به سرعت ته نشین و تبخیر نشان داده می شود. در نتیجه گرد و غباری تشکیل می شود که می تواند به هوا برود.

AT) رها کردن هسته -قطرات کوچک آئروسل (تا 100 نانومتر)، خشک شدن، در هوا در حالت معلق باقی می‌مانند و یک سیستم پخش هوای پایدار را تشکیل می‌دهند. آنها تا حدی رطوبت را حفظ می کنند که از زنده ماندن میکروارگانیسم ها پشتیبانی می کند. دومی در ترکیب هسته های قطره ای می تواند در فواصل قابل توجهی منتقل شود.

مطالعات بهداشتی و میکروبیولوژیکی هوا.

هدف اصلی این تحقیق ارزیابی بهداشتی و اپیدمیولوژیک است محیط هواو همچنین توسعه مجموعه ای از اقدامات با هدف جلوگیری از انتقال هوازای پاتوژن های بیماری های عفونی. هنگام ارزیابی وضعیت بهداشتی فضاهای بسته، بسته به اهداف مطالعه، TMC، وجود SPM (استافیلوکوک ها، استرپتوکوک های α- و بتا همولیتیک، که شاخص های آلودگی توسط میکرو فلور نازوفارنکس انسان هستند) تعیین می شود. .

نمونه برداری داخلی: نقاط نمونه برداری برای هر 20 متر مربع - یک نمونه، با توجه به نوع پاکت.

روش های انتخاب: -رسوبی و

آسپیراسیون - بر اساس رسوب اجباری میکروارگانیسم ها از هوا بر روی سطح یک ماده مغذی متراکم یا در یک مایع به دام انداختن. از دستگاهی برای نمونه برداری هوا (POV - 1)، نمونه بردار باکتریولوژیک آئروسل (PAB - 1) استفاده کنید. نمونه برداری با سرعت 20-25 لیتر در دقیقه به مدت 5-4 دقیقه انجام می شود. بنابراین، میکرو فلورا در 100 لیتر هوا تعیین می شود.

بررسی آلودگی میکروبی هوا در مراکز درمانیمطابق با دستور شماره 720 مورخ 31 ژوئیه 1978 "در مورد بهبود مراقبت های پزشکی برای بیماران مبتلا به بیماری های جراحی چرکی و اقدامات تقویتی برای مبارزه با عفونت بیمارستانی" انجام شد.

تحقیقات باکتریولوژیکی نشان می دهد:

تعیین میزان کل میکروبی (TMC) در 1 متر مکعب هوا.

تعیین محتوای استافیلوکوکوس اورئوس در 1 متر مکعب هوا. نمونه برداری در اتاق های زیر انجام می شود:

بلوک های عامل؛

پانسمان؛

بخش های بعد از عمل؛

بخش‌ها و بخش‌های مراقبت ویژه و سایر مکان‌هایی که نیاز به شرایط آسپتیک دارند.

نمونه های هوا به روش آسپیراسیون با سرعت کشش هوا 25 لیتر در دقیقه گرفته می شود. مقدار هوای عبوری برای تعیین TMF باید 100 لیتر و برای تعیین وجود استافیلوکوکوس اورئوس 250 لیتر باشد.

معیارهای ارزیابی آلودگی میکروبی هوا

در کلینیک های جراحی

مطالعات بهداشتی میکروبیولوژیکی در موسسات پزشکی

اصلی سند هنجاریدستور شماره 720 مورخ 31 ژوئیه 1978 "در مورد بهبود مراقبت های پزشکی برای بیماران مبتلا به بیماری های جراحی چرکی و اقدامات تقویتی برای مبارزه با عفونت بیمارستانی" است. پیوست 2 حاوی دستورالعمل هایی برای کنترل باکتریولوژیک مجموعه ای از اقدامات بهداشتی و بهداشتی در موسسات پزشکی (بخش های جراحی، در بخش ها و بخش های مراقبت های ویژه) است.

آزمایشگاه های باکتریولوژیک مراکز مراقبت بهداشتی و اپیدمیولوژیک و ایستگاه های ضد عفونی حداقل دو بار در سال کنترل را انجام می دهند، آزمایشگاه های باکتریولوژی موسسات پزشکی رژیم بهداشتی و بهداشتی (آلودگی اشیاء مختلف و هوا) را یک بار در ماه و کنترل استریل بودن ابزار را کنترل می کنند. ، پانسمان، کتانی جراحی، پانسمان، دست جراحان و پوست ناحیه جراحی (اختیاری) - هفته ای یک بار.

بررسی آلودگی میکروبی اجسام محیطی

مطالعه باکتریولوژیک آلودگی میکروبی اشیاء محیطی برای شناسایی استافیلوکوک، سودوموناس آئروژینوزا، باکتری های گروه E. coli BGKP (OKB) فراهم می کند. نمونه برداری از سطوح اجسام مختلف به روش سواب انجام می شود. سواب ها با یک سواب پنبه ای استریل روی چوب های نصب شده در لوله های آزمایش یا با دستمال های گازی به اندازه 5 * 5 سانتی متر گرفته می شوند.سالین استریل برای مرطوب کردن تامپون ها و دستمال ها استفاده می شود. هنگام کنترل اجسام کوچک، سواب ها از سطح کل جسم گرفته می شود. هنگام کنترل اجسام با سطح بزرگ، شستشوها در چندین مکان از شی مورد مطالعه با مساحت تقریباً 100-200 سانتی متر مربع انجام می شود.

برای جداسازی استافیلوکوک ها مستقیماً روی یک ظرف پتری با زرده نمک آگار (YSA) و آبگوشت های انباشته (6.5٪ سالین و 1٪ گلوکز) تلقیح کنید. سپس آنها بر اساس طرح تحقیق بر روی استافیلوکوکوس اورئوس کار می کنند.

برای شناسایی BGKP (OKB) تلقیح بر روی محیط غنی شده کسلر یا 10 تا 20 درصد براث صفراوی. پس از یک روز انکوباسیون در دمای 37 درجه سانتیگراد، انتقال به محیط Endo انجام می شود. کلنی های مشکوک در محیط اندو (لاکتوز مثبت) میکروسکوپ شده و بر اساس این طرح شناسایی می شوند.

برای تشخیص سودوموناس آئروژینوزا محصولات ویژه را می توان حذف کرد. معمولاً کلنی های سودوموناس آئروژینوزا را می توان بر روی آگار خون یا محیط اندو شناسایی کرد. بعد مطالعه بر اساس طرح است.

فهرستی از اشیاء که باید باشند

کنترل باکتریولوژیک

الف. اتاق بیهوشی

1. لوله لوله گذاری

2. ماسک دستگاه بیهوشی

3. سه راهی دستگاه بیهوشی

4. لوله راه راه

5. لارنگوسکوپ

6. گشاد کننده دهان

7. کیسه تنفس

8. دستان متخصص بیهوشی، احیاگر، پرستار بیهوشی

ب- قبل از عمل

1. لگن برای شستن دست جراحان

2. برس های تمیز برای شستن دست

3. پیش بند (کلنچاتی و پلی اتیلن)

ب- اتاق عمل

1. میز متخصصان بیهوشی

2. میز عمل

3. شیلنگ اکسیژن

4. شستشو از دست تمام کسانی که در عملیات شرکت دارند

5. پوست زمینه جراحی

د- بخش ها، بخش ها و بخش های بعد از عمل

احیا و مراقبت های ویژه

تخت برای بیمار آماده شده است

حوله دست کارکنان و شستشوی دستی

سینک را برس بکشید

شلنگ تامین اکسیژن

تجهیزات بیهوشی یدکی (کیت احیا)

شلنگ خلاء

سطح داخلییخچال (برای نگهداری داروها)

دماسنج ها

د. اتاق رختکن

1. کاناپه برای پانسمان

2. حوله دست کارکنان

3. سینک را برس بکشید

4. روپوش پرستاری

5. دستان پزشکان، پرستاران

6. میز پزشکی کار

7. سطح داخلی یخچال دارو

کنترل عقیم سازی وسایل پزشکی

قبلاً نیز طبق دستور شماره 720 انجام می شد که در حال حاضر طبق دستور کار در حال انجام است. رهنمودهابرای ضد عفونی، تمیز کردن و استریل کردن دستگاه های پزشکی - MU 287-113-98

کنترل عقیم سازی محصولات استریل شده در مراکز پزشکی در اتاق های مجهز به ویژه با رعایت شرایط آسپتیک انجام می شود که امکان آلودگی ثانویه محصولات توسط میکروارگانیسم ها را حذف می کند.

در بیمارستان‌هایی که اتاق‌های استریل‌سازی متمرکز دارند، حداقل 1 درصد از تعداد محصولات استریل شده همزمان با همین نام تحت کنترل استریل است.

در بیمارستان‌هایی که اتاق‌های استریلیزاسیون متمرکز ندارند و در بخش‌ها استریل‌سازی را انجام می‌دهند، حداقل دو محصول استریل شده همزمان به همین نام تحت کنترل استریل هستند.

در هسته الزامات بهداشتیکیفیت آب برای شرب و نیازهای خانگی بر این اصل استوار است که تمرکز بر کیفیت آب است که سلامت انسان و شرایط زندگی به آن بستگی دارد. مطابق با قوانین بهداشتی مدرن، آب آشامیدنی باید از نظر اپیدمی و تشعشع ایمن و از نظر آلودگی بی ضرر باشد. ترکیب شیمیاییو خواص ارگانولپتیکی مطلوبی دارند.

ایمنی آب آشامیدنی از نظر اپیدمی با انطباق آن با استانداردهای شاخص های میکروبیولوژیکی تعیین می شود. ترکیب میکروبیولوژیکی آب آشامیدنی شاخص اصلی کیفیت و مناسب بودن آن برای مصرف است. این امر هم آلودگی باکتریایی و هم ویروسی را در نظر می گیرد.

ایمنی اپیدمیولوژیک آب آشامیدنی در SanPiN توسط چندین شاخص ارزیابی می شود. نقش مهمی در میان آنها به کلیفرم های مقاوم به گرما به عنوان شاخص های واقعی آلودگی مدفوع و کلیفرم های کل اختصاص داده شده است.

باکتری‌های کلی فرم معمولی (CBC) میله‌های گرم منفی، اکسیداز منفی و غیر اسپور هستند که می‌توانند روی محیط‌های لاکتوز متفاوت رشد کنند و لاکتوز را به اسید و گاز در دمای 37+ به مدت 48-24 ساعت تخمیر کنند.

باکتری های کلیفرم مقاوم به گرما (TCB) بخشی از OKB هستند و تمام خصوصیات خود را دارند، اما بر خلاف آنها قادرند لاکتوز را به اسید، آلدئید و گاز در دمای 44+ به مدت 24 ساعت تخمیر کنند. بنابراین، TKB با OKB در توانایی تخمیر لاکتوز به اسید و گاز در دمای بالاتر متفاوت است. کلیفرم های متحمل گرما و معمولی باید در 100 میلی لیتر آب آشامیدنی وجود نداشته باشد (در هر یک از نمونه ها با سه بار تکرار آنالیز).

در شبکه توزیع سیستم های بزرگ تامین آب آشامیدنی متمرکز (با تعداد نمونه های مورد مطالعه حداقل 100 نمونه در سال)، 5 درصد نمونه های غیر استاندارد برای کلیفرم های معمولی مجاز است، اما در دو نمونه متوالی در یک نقطه برداشت نمی شود.

تعداد کل میکروارگانیسم ها (تعداد کل میکروبی - TMC) با رشد روی گوشت-پپتون آگار در دمای جوجه کشی 37 تعیین می شود. این شاخص برای مشخص کردن کارایی تصفیه آب آشامیدنی استفاده می شود، باید هنگام نظارت بر کیفیت آب در نظر گرفته شود. پویایی شناسی. انحراف شدید TMF حتی در محدوده مقدار استاندارد (اما نه بیشتر از 50 در 1 میلی لیتر) به عنوان سیگنال نقض در فناوری تصفیه آب عمل می کند. رشد TMP در آب شبکه توزیع ممکن است نشان دهنده وضعیت نامطلوب بهداشتی آن باشد، که به تولید مثل میکروارگانیسم ها به دلیل تجمع مواد آلی یا نشت، که مستلزم مکش آب های زیرزمینی آلوده است، کمک می کند.

ساپروفیت های هوازی تنها بخشی از تعداد کل میکروب های موجود در آب را تشکیل می دهند، اما آنها یک شاخص بهداشتی مهم برای کیفیت آب هستند، زیرا بین میزان آلودگی توسط مواد آلی و تعداد میکروبی رابطه مستقیم وجود دارد. علاوه بر این، اعتقاد بر این است که هر چه تعداد کل میکروبی بیشتر باشد، احتمال وجود میکروارگانیسم‌های بیماری‌زا در آب بیشتر می‌شود. تعداد میکروبی در آب لوله کشی نباید بیش از 100 باشد.

ایمنی آب آشامیدنی در مفهوم اپیدمی با انطباق آن با استانداردهای شاخص های میکروبیولوژیکی تعیین می شود (جدول 1).

جدول 1. شاخص های میکروبیولوژیکی آب آشامیدنی

مفهوم میکروارگانیسم های شاخص بهداشتی

الزامات اصلی برای میکروارگانیسم های شاخص بهداشتی: 1. آنها باید یک زیستگاه طبیعی مشترک با میکروارگانیسم های بیماری زا داشته باشند و در مقادیر زیاد در محیط خارجی رها شوند. 2. در زیستگاه خارجی، میکروارگانیسم های شاخص بهداشتی باید تا حد امکان به طور یکنواخت توزیع شده و نسبت به میکروارگانیسم های بیماری زا مقاوم تر باشند. آنها باید مدت طولانی تری در آب بمانند، عملاً تکثیر نشوند، در برابر عوامل نامطلوب مختلف مقاومت بیشتری داشته باشند، باید تنوع کمتری در خواص و ویژگی ها از خود نشان دهند. 3. روش های تعیین میکروارگانیسم های شاخص بهداشتی باید ساده و دارای درجه کافی از قابلیت اطمینان باشند.

از دیدگاه میکروبیولوژی بهداشتی، ارزیابی کیفیت آب به منظور تعیین خطر یا ایمنی بهداشتی و اپیدمیولوژیک آن انجام می شود. برای سلامت انسان. آب نقش مهمی در انتقال پاتوژن های بسیاری از عفونت ها به ویژه عفونت های روده ای دارد.

تعیین کمی مستقیم همه آلودگی ها برای کنترل کیفیت آب به دلیل تنوع انواع آنها و پیچیدگی تجزیه و تحلیل امکان پذیر نیست.

تجزیه و تحلیل تنها یک نمونه آب برای حضور احتمالی پاتوژن های تب حصبه، پاراتیفوئید A، پاراتیفوئید B، اسهال خونی، یرقان عفونی، تب آبی و تولارمی در آن، کل کارکنان حتی یک آزمایشگاه بزرگ باکتری شناسی را کاملاً بار می کند. علاوه بر این، پاسخ در این مورد تنها پس از 2-3 هفته داده می شود، یعنی. زمانی که جمعیت از قبل آب مورد مطالعه را برای مدت طولانی نوشیده باشند.

با توجه به عدم مصلحت آشکار تعریف دقیق ایمنی آب، حتی در اواخر نوزدهمقرن‌هاست که تلاش شده است تا جستجوی همه میکروب‌های بیماری‌زای آبزی با یک میکروب، هر چند غیر بیماری‌زا، اما دائماً در مدفوع انسان، جایگزین شود. سپس می توان در نظر گرفت که اگر آب مورد مطالعه واقعاً آلوده به مدفوع باشد، می تواند برای نوشیدن خطرناک باشد، زیرا هم افراد بیمار و هم ناقلان باسیل در بین جمعیت سالم یافت می شوند. جستجو برای چنین شاخص های باکتریولوژیکی آلودگی مدفوع موفقیت آمیز بوده است. مشخص شد که سه تا از میکروب های زیر به طور مداوم در مدفوع انسان وجود دارد: 1) اشریشیا کلی. 2) انتروکوک؛ 3) باکتری های بی هوازی تشکیل دهنده هاگ، عمدتا Bac. perfingens

بنابراین، در خانه فاضلاب شهریاشرشیاکلی غالب است. اما این فقط در مورد محتوا نیست. ارزش اصلی یک شاخص باکتریایی آلودگی مدفوع در این واقعیت نهفته است که میزان مرگ و میر آن در اکثر میکروب های بیماری زا است. تنها در صورت رعایت این شرط، میکروبی که دائماً در مدفوع انسان وجود دارد، نشانگر آلودگی مدفوع خواهد بود.

اگر از این منظر به ساکنان دائمی کشف شده روده نزدیک شویم، به موارد زیر پی خواهیم برد: میکروب های گروه Bac. perfingens در آب بسیار طولانی تر از میکروب های بیماری زا باقی می ماند. برعکس، انتروکوک ها خیلی زودتر می میرند. همانطور که برای اشریشیا کلی، زمان نگهداری آن در آب تقریباً با زمان بقای میکروب های بیماری زا مطابقت دارد.

بنابراین، شاخص بهداشتی-باکتریولوژیکی اصلی آب، اشریشیا کلی است. تنها در روسیه، تنها کشور جهان، کیفیت آب توسط باکتری گروه اشریشیا کلی (شاخص BGKP) کنترل می شود. این گروه شامل تمام نمایندگان گروه باکتری های روده و نمایندگان فرصت طلب است.

مطابق با GOST 2874-73 و GOST 18963-73، باکتری های گروه Escherichia coli (ECG) شامل باسیل های گرم منفی و غیر اسپور هستند که لاکتوز یا گلوکز را در 24 ساعت در دمای 37 درجه به اسید و گاز تخمیر می کنند و این کار را انجام نمی دهند. فعالیت اکسیداز دارند. BGKP شامل نمایندگانی است جنس های مختلف– اشریشیا، سیتروباکتر، انتروباکتر، کلبسیلا، اما همگی از روده انسان و حیوان در محیط خارج می شوند. در این راستا تشخیص آنها در محیط باید به عنوان شاخص آلودگی مدفوعی در نظر گرفته شود.

از جنس های موجود در BGKP، جنس Escherichia دارای بیشترین ارزش بهداشتی و شاخص است. وجود همه این باکتری ها در محیط، آلودگی تازه مدفوع محسوب می شود.

Escherichia - یکی از گونه های پس زمینه روده انسان و حیوانات است. جنس اشرشیا از جمله نوع view E. coli، نشانگر آلودگی مدفوع تازه، علت احتمالی عفونت های سمی. نمایندگان این جنس در آب به عنوان باکتری های کلیفرم مقاوم به حرارت در نظر گرفته می شوند.

سیتروباکتر - در فاضلاب، خاک و سایر اشیاء محیطی و همچنین در مدفوع بیماران سالم و AII زندگی می کند. آنها به گروه باکتری های فرصت طلب تعلق دارند. (کتاب مرجع فرهنگ لغت میکروبیولوژی، 1999)

معایب سیتروباکتر به عنوان SPMO شامل موارد زیر است:

1. فراوانی آنالوگ در محیط خارجی.

2. تنوع در محیط خارجی.

3. مقاومت ناکافی در برابر اثرات نامطلوب.

4. توانایی تولید مثل در آب.

5. نشانگر فازی حتی برای حضور سالمونلا.

پژوهش سالهای اخیرعدم وجود ارتباط مستقیم بین حضور باکتری های بیماری زا و شاخص ها در آب را نشان داد. در مناطقی با فشار شدید انسانی بر روی بدنه های آبی، کاهش محتوای میکروارگانیسم های شاخص با تغییر در خواص بیولوژیکی و فرهنگی آنها در برابر پس زمینه غلبه کمی باکتری های بیماری زا و بیماری زا بالقوه مشاهده شد.

انتروباکتر - در روده انسان و سایر حیوانات زندگی می کند، در خاک، آب، محصولات غذایی یافت می شود، بیماری های روده ای، ادراری تناسلی، تنفسی، چرکی و التهابی انسان را فرا می گیرد.

کلبسیلا - در آب، خاک، غذا، روده و دستگاه تنفسی انسان، پستانداران، پرندگان زندگی می کند.

در سال 1910م انتروکوک (Enterococcus faecalis، Enterococcus faecium) برای نقش SPMO پیشنهاد شده است.

انتروکوک‌ها یک جنس از باکتری‌های بی‌هوازی اختیاری کمو ارگانوتروف گرم + هستند. سلول ها چند شکلی هستند. به طور گسترده در طبیعت توزیع شده است. آنها یکی از گونه های پس زمینه روده انسان، پستانداران، پرندگان هستند. اغلب در فلور پوست پرینه و دستگاه تناسلی، حفره های بینی، حلق، بینی یافت می شود. زنده ماندن طولانی در خاک، محصولات غذایی.

مزایای انتروکوک به عنوان SPMO:

1. دائماً در روده انسان است و دائماً در محیط بیرونی آزاد می شود. در عین حال، Enterococcus faecalis عمدتا در روده انسان زندگی می کند، بنابراین تشخیص آن نشان دهنده آلودگی با مدفوع انسان است. انتروکوکوس فاسیوم به میزان کمتری در انسان دیده می شود. دومی عمدتاً در روده حیوانات یافت می شود، اگرچه Enterococcus faecalis نیز نسبتاً نادر است.

2. قادر به تولید مثل در محیط خارجی نیست، Enterococcus faecium عمدتا تولید مثل می کند، اما اهمیت اپیدمیولوژیک کمتری دارد.

3. خواص خود را در محیط خارجی تغییر نمی دهد.

4. در محیط خارجی مشابهی ندارد.

5. مقاوم در برابر تأثیرات نامطلوب محیطی. انتروکوک 4 برابر بیشتر از اشریشیا کلی در برابر کلر مقاوم است. این شایستگی اصلی اوست. با توجه به این ویژگی، انتروکوک برای بررسی کیفیت کلرزنی آب و همچنین نشانگر کیفیت ضد عفونی استفاده می شود. تحمل دمای 60 درجه سانتیگراد را دارد که امکان استفاده از آن به عنوان شاخص کیفیت پاستوریزاسیون را فراهم می کند. مقاوم به غلظت نمک معمولی 6.5-17٪. مقاوم به pH در محدوده 3-12.

6. محیط های بسیار گزینشی برای نشان دادن انتروکوک ایجاد شده است. میزان بقای انتروکوکوس در آب به انتروباکتری های بیماری زا نزدیک می شود. انتروکوک به حق دومین آزمایش شاخص بهداشتی پس از E. coli در مطالعه آب آشامیدنی است.

در حال حاضر، انتروکوکومتری در استاندارد بین المللی آب به عنوان شاخصی از آلودگی مدفوع تازه قانونی شده است. هنگامی که اشریشیا کلی غیر معمول در آب یافت می شود، وجود انتروکوک به شاخص اصلی آلودگی مدفوع تازه تبدیل می شود. متاسفانه در SanPiN 2.1.4.1074-01 برای آب آشامیدنی، تعریف انتروکوک ارائه نشده است.

گروه پروتئوس به عنوان مقصر فرآیندهای پوسیدگی در طبیعت و در نتیجه به عنوان شاخص های وجود مواد آلی در آب مخازن در نظر گرفته می شود. این به طور عمده برای یک گونه - Pr. vulgaris. گونه دوم - Pr.mirabilis - ساکن روده انسان و حیوانات است. این تفاوت اکولوژیکی امکان قضاوت در مورد ماهیت آلودگی آب و درجه ایمنی اپیدمی آن را فراهم کرد. Pr.vulgaris می تواند نشانگر آلودگی مدفوع باشد، Pr.vulgaris - شاخصی از افزایش غلظت مواد آلی به طور کلی. طرف های ضعیفاین شاخص حضور متناوب Pr.mirabilis در روده انسان و توانایی هر دو گونه برای تولید مثل کاملاً فشرده در آب است. همچنین هیچ روش تحقیقی وجود ندارد که امکان در نظر گرفتن متفاوت هر دو گونه را در صورت حضور همزمان در نمونه آزمایشی فراهم کند. روش پیشنهادی این وظیفه را انجام نمی دهد.

در حال حاضر مشخص شده است که باکتری های جنس پروتئوس در 98% موارد در ترشحات روده انسان و حیوان یافت می شود که 82% موارد آن Pr.mirabilis است. تشخیص پروتئوس در آب نشان دهنده آلودگی جسم با بسترهای پوسیده و نشان دهنده مشکلات شدید بهداشتی است. پروتئومتری به طور رسمی در ایالات متحده آمریکا به رسمیت شناخته شده است.

شناسایی اسپور کلستریدیاهای کاهنده سولفید بر روی لوله های آب از منابع سطحی برای ارزیابی اثربخشی تصفیه آب فن آوری انجام می شود. پس از اتمام تصفیه آب، اسپورهای باکتری کاهنده سولفید نباید در 20 میلی لیتر آب آشامیدنی وجود داشته باشد.

به عنوان شاخصی از آلودگی ویروسی آب آشامیدنی، SanPiN شامل کلیفاژها است که از نظر منشاء بیولوژیکی، اندازه، خواص، مقاومت در برابر عوامل محیطی به ویروس های روده نزدیکتر هستند. کلیفاژها نباید در 100 میلی لیتر آب آشامیدنی تصفیه شده شناسایی شوند.

روش تیتراسیون

این روش مبتنی بر تجمع باکتری‌ها پس از تلقیح حجم‌های معینی از آب در محیط‌های مغذی مایع و به دنبال آن تلقیح مجدد بر روی یک محیط متراکم افتراقی با لاکتوز و شناسایی کلنی‌ها با آزمایش‌های فرهنگی و بیوشیمیایی است. در بررسی آب آشامیدنی به روش کیفی، سه حجم 100 سانتی متر مکعب کاشته می شود. در بررسی آب با هدف | تعیین کمی OKB و TKB (تحلیل مکرر)، به ترتیب 1.10 و 100 سانتی متر مکعب - سه جلد از هر سری تلقیح می شوند.

تلقیح 10 و 100 سانتی متر مکعب آب به ترتیب در 1 و 10 سانتی متر مکعب از محیط تجمع - LPS غلیظ بدون نشانگر انجام می شود. کاشت 1 سانتی متر مکعب از نمونه در 10 سانتی متر مکعب LPS با غلظت معمول انجام می شود. تلقیح ها در دمای 37 درجه سانتی گراد به مدت 48 ساعت انکوبه می شوند و پس از 24 ساعت ارزیابی اولیه تلقیح ها در محیط انباشته انجام می شود. از ظروف، که در آن وجود رشد (کدورت) و تشکیل گاز مشاهده می شود، مواد با یک حلقه باکتریولوژیک بر روی بخش های محیط اندو کاشته می شود تا کلنی های جدا شده به دست آید. ظروف بدون علائم قابل مشاهده رشد و تشکیل گاز تا 48 ساعت در ترموستات باقی می مانند و برای ارزیابی نهایی مجدداً مشاهده می شوند.

نتایج محصولات بدون علائم رشد منفی تلقی می شود و قابل مطالعه نیست. از ظروف که کدورت در آن ها مشاهده می شود، کاشت بر روی بخش هایی از محیط اندو انجام می شود. تلقیح بر روی محیط اندو در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 20-18 ساعت انکوبه می شود.در صورت مشاهده کدورت، گاز در محیط تجمع تشکیل می شود و کلنی ها روی محیط اندو رشد می کنند که برای باکتری های لاکتوز مثبت معمول است: قرمز تیره یا قرمز، با یا بدون درخشش فلزی، محدب با مرکز قرمز و نقش بر روی محیط غذایی، نتیجه مثبتی در مورد حضور OKB در حجم نمونه مشخص می دهد.

وجود OKB باید در موارد زیر تأیید شود:

ü فقط کدورت در محیط تجمع مشاهده شد.

ü تعلق به کلنی های لاکتوز مثبت جای سوال دارد.

برای تایید وجود OKB، مراحل زیر را انجام دهید:

1. پس از برداشتن کلنی مشکوک با یک حلقه، وجود یک اثر را در محیط Endo بررسی کنید.

2. انجام آزمایش اکسیداز.

3. چک متعلق به گروه Gram.

4. با تلقیح 1-2 کلنی جدا شده از همه نوع از هر بخش به محیط تایید (LPS با نشانگر) و سپس انکوباسیون تلقیح ها در دمای 37 درجه سانتیگراد به مدت 24-48 ساعت، توانایی تشکیل گاز را تأیید کنید.

در غیاب کلنی های جدا شده، الک بر روی محیط اندو با روش های مرسوم انجام می شود. نظر منفی داده می شود اگر:

ü هیچ نشانه ای از رشد در محیط تجمع وجود ندارد.

ü رشدی در بخش های محیط اندو وجود ندارد.

ü مستعمرات غیر مشخص برای باکتری های کلیفرم (شفاف، با لبه های دندانه دار، مبهم) در بخش های محیط اندو رشد کردند.

ü تمام کلنی ها اکسیداز مثبت بودند.

همه کلنی ها گرم مثبت بودند.

ü در تست تاییدی بر روی محیط LPS با نشانگر، تشکیل گاز مشاهده نشد.

برای تعیین TCB، با بخش‌هایی از محیط Endo که در آن مستعمرات لاکتوز + معمولی رشد کرده‌اند، کار کنید. دو یا سه کلنی جدا شده از هر نوع از هر بخش در لوله های آزمایش با هر یک از محیط های تجمع لاکتوز تلقیح می شوند و در دمای 44 درجه سانتیگراد به مدت یک روز انکوبه می شوند. با تشکیل گاز در محیط تجمع لاکتوز، رشد باکتری های لاکتوز مثبت بر روی محیط اندو و تشخیص توانایی تخمیر لاکتوز به اسید و گاز در محیط تایید کننده لاکتوز در دمای 44 درجه سانتی گراد به مدت 24 ساعت. نتیجه گیری مثبت در مورد وجود TKB در این حجم آب داده شده است. در یک مطالعه کیفی (با سهحجم 100 سانتی‌متر مکعب با تشخیص OKB و TKB در حداقل یکی از سه جلد، یک رکورد ایجاد می‌شود: «OKB و TKB در 100 سانتی‌متر مکعب یافت شد».

هنگام تحقیق روش کمی NVCh، OKB و TKB را طبق جداول خاص تعیین کنید. اگر نتایج مطالعه برای وجود OKB و TKB در تمام حجم‌های مورد بررسی منفی باشد، نتیجه‌گیری صادر می‌شود: «در 100 سانتی‌متر مکعب OKB و TKB یافت نشد».