पीबीएस (फॉस्फेट बफर्ड सेलाइन) आमतौर पर इस्तेमाल किया जाने वाला इम्यूनोहिस्टोकेमिकल स्टेनिंग बफर है और आमतौर पर जैविक अनुसंधान में उपयोग किया जाता है। ऑस्मोलैरिटी और समाधानों के आयनों की सांद्रता मानव शरीर (आइसोटोनिक) की सांद्रता से मेल खाती है।

पीबीएस एक जलीय घोल है जिसमें सोडियम हाइड्रोजन फॉस्फेट, सोडियम क्लोराइड और, कुछ मामलों में, पोटेशियम क्लोराइड और पोटेशियम डाइहाइड्रोजन फॉस्फेट होता है।

IHC के लिए इम्यूनोफ्लोरेसेंट धुंधलापन

इम्यूनोफ्लोरेसेंट स्टेनिंग इम्यूनोहिस्टोकेमिकल (IHC) स्टेनिंग की पहली विधि थी। एंटीजन-एंटीबॉडी बाइंडिंग प्रतिक्रिया के आधार के साथ, एंटीबॉडी के साथ संयुग्मित होने पर एंटीजन को फ्लोरोसेंट रंगों का उपयोग करके दृश्यमान बनाया जाता है। यह प्रक्रिया तब होती है जब एक फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप के तहत एक निश्चित तरंग दैर्ध्य के उत्तेजना प्रकाश द्वारा सक्रिय किया जाता है। इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री विशेष रूप से जैविक ऊतकों में एंटीजन से जुड़ने वाले एंटीबॉडी के सिद्धांत का उपयोग करके ऊतक अनुभाग की कोशिकाओं में एंटीजन (जैसे प्रोटीन) का पता लगाने की प्रक्रिया को संदर्भित करती है।

फॉस्फेट बफर्ड सेलाइन (पीबीएस) का उपयोग करना

फॉस्फेट बफर्ड सेलाइन के कई उपयोग हैं क्योंकि यह अधिकांश कोशिकाओं के लिए आइसोटोनिक और गैर विषैला होता है। इसका उपयोग पदार्थों को पतला करने के लिए किया जा सकता है और इसका उपयोग कोशिकाओं वाले कंटेनरों को धोने के लिए किया जाता है। पीबीएस का उपयोग बायोमोलेक्यूल सुखाने के तरीकों में एक मंदक के रूप में किया जा सकता है, क्योंकि इसके भीतर पानी के अणुओं को एक पदार्थ (जैसे कि प्रोटीन) के चारों ओर "सूखा" जाने और एक ठोस सतह पर स्थिर करने के लिए संरचित किया जाएगा।

पानी की पतली फिल्म जो पदार्थ से जुड़ती है, विकृतीकरण या अन्य गठनात्मक परिवर्तनों को रोकती है। कार्बोनेट बफ़र्स का उपयोग उसी उद्देश्य के लिए किया जा सकता है, लेकिन कम दक्षता के साथ। पीबीएस का उपयोग इलिप्सोमेट्री में प्रोटीन सोखना मापते समय एक संदर्भ स्पेक्ट्रम प्रदान करने के लिए भी किया जा सकता है।

पीबीएस की तैयारी

पीबीएस तैयार करने के कई अलग-अलग तरीके हैं।

कुछ फ़ॉर्मूले में पोटेशियम नहीं होता है, जबकि अन्य में कैल्शियम या मैग्नीशियम होता है। नीचे दी गई बफर रेसिपी, जो अपेक्षाकृत सरल है, पीबीएस (0.1 एम) के 10एक्स स्टॉक समाधान के लिए है। ट्वीन को जोड़ना भी संभव है। पूरी प्रक्रिया में लगभग 10 मिनट का समय लगता है.

फॉस्फेट बफर्ड सलाइन (पीबीएस) कैसे बनाएं

1. निम्नलिखित का वजन करें: 10.9 ग्राम निर्जल सोडियम फॉस्फेट डिबासिक (Na2HPO4), 3.2 ग्राम निर्जल सोडियम फॉस्फेट मोनोबैसिक (NaH2PO4) और 90 ग्राम सोडियम क्लोराइड (NaCl)।
2. उपरोक्त सभी को केवल 1 लीटर आसुत जल में घोलें।
3. पीएच मान को 7 पर समायोजित करें। 4.
4. घोल को 1 लीटर की अंतिम मात्रा में बनाएं।
5. (आवश्यक नहीं)। 0.5% ट्वीन 20 वाले घोल के लिए, 1 लीटर घोल में 5 मिली ट्वीन 20 मिलाएं।
6. उपयोग से पहले 10X पतला करें और यदि आवश्यक हो तो पीएच समायोजित करें।

• कमरे के तापमान पर रखो।
• गैर-फीमर अभिकर्मकों को प्रतिस्थापित किया जा सकता है, लेकिन अतिरिक्त पानी के अणुओं को समायोजित करने के लिए आपको प्रत्येक के संबंधित द्रव्यमान की पुनर्गणना करनी होगी।

पीबीएस बफर बनाने के लिए आपको क्या चाहिए

• एकल चरण सोडियम फॉस्फेट (निर्जल)
• डिबासिक सोडियम फॉस्फेट (निर्जल)
• सोडियम क्लोराइड
• स्केल और वजन वाली नावें
• चुंबकीय स्टिरर और स्टिरर > पीएच जांच, कैलिब्रेटेड और उपयुक्त पीएच समायोजन समाधान
• 1 लीटर वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क
• ट्वेन 20 (वैकल्पिक)

आवेदन

सोडियम फॉस्फेट बफर का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है क्योंकि यह कोशिकाओं के लिए आइसोटोनिक और गैर विषैला होता है। पीबीएस का उपयोग पदार्थों को घोलने, कोशिकाओं वाले कंटेनरों को धोने के लिए किया जाता है।

खाना बनाना

सोडियम फॉस्फेट बफर तैयार करने के कई तरीके हैं। कुछ फ़ॉर्मूले में पोटेशियम नहीं होता है, अन्य में कैल्शियम या मैग्नीशियम होता है।

1 लीटर सिंगल सोडियम फॉस्फेट बफर तैयार करने के लिए, उपयोग करें:

• 8.00 ग्राम NaCl
• 0.20 ग्राम KCl
• 1.44 ग्राम Na 2 HPO 4
• 0.24 ग्राम KH2PO4
• 800 मिलीलीटर आसुत जल में घोलें
• हाइड्रोक्लोरिक एसिड या सोडियम हाइड्रॉक्साइड के साथ पीएच को 7.4 पर समायोजित करें
• 1 लीटर में आसुत जल मिलाएं।

आठ लीटर आसुत जल में 800 ग्राम NaCl, 20 ग्राम KCl, 144 ग्राम Na 2 HPO 4 और 24 ग्राम KH 2 PO 4 घोलकर, दस गुना पीबीएस का दस लीटर स्टॉक घोल तैयार किया जा सकता है। आगे दस लीटर तक. परिणामी घोल का पीएच लगभग 6.8 होगा, लेकिन एकल पीबीएस में तनुकरण के बाद यह 7.4 के बराबर होगा। घोल तैयार करने के बाद पीएच मान को पीएच मीटर से जांच लें। यदि आवश्यक हो, तो पीएच को हाइड्रोक्लोरिक एसिड या सोडियम हाइड्रॉक्साइड से समायोजित किया जा सकता है।

सोडियम फॉस्फेट बफर तैयार करने का सबसे आसान तरीका व्यावसायिक रूप से उपलब्ध टैबलेट फॉर्मूलेशन का उपयोग करना है। ऐसी गोलियों को आसुत जल से पूर्व निर्धारित मात्रा में पतला किया जाता है और पूर्व निर्धारित सांद्रता का घोल प्राप्त किया जाता है।

कोशिका संवर्धन के लिए, घोल को आटोक्लेविंग (121 डिग्री सेल्सियस पर 20 मिनट, तरल मोड में) द्वारा पृथक और निष्फल किया जाना चाहिए। उपयोग के आधार पर, स्टरलाइज़ेशन आवश्यक नहीं है। सोडियम फॉस्फेट बफर को कमरे के तापमान पर संग्रहित करना संभव है, लेकिन बैक्टीरिया के विकास को रोकने के लिए रेफ्रिजरेटर में गैर-बाँझ बफर के दीर्घकालिक भंडारण की सिफारिश की जाती है। संकेंद्रित स्टॉक समाधानों में लवण ठंडा होने के दौरान अवक्षेपित हो सकते हैं, इसलिए, उपयोग से पहले, संकेंद्रित घोल को कमरे के तापमान पर गर्म करने और अवक्षेप के पूरी तरह से घुलने की प्रतीक्षा करने की सिफारिश की जाती है।

टिप्पणियाँ

यह सभी देखें

विकिमीडिया फ़ाउंडेशन. 2010 .

हेमेटोलॉजिकल अध्ययन के लिए जैविक सामग्री के संग्रह और तैयारी के लिए आवश्यकताएँ।

हेमेटोलॉजिकल अध्ययन के लिए जैविक सामग्री के परिवहन और भंडारण के लिए आवश्यकताएँ।

हेमोस्टेसिस प्रणाली के अध्ययन के लिए दिशा का सही भरना:

मरीज का पूरा नाम, उम्र, लिंग

अनुसंधान के लिए रक्त के नमूने का समय

नैदानिक ​​निदान (संक्षेप में)

hematocrit

रक्तस्रावी सिंड्रोम (नाक, गर्भाशय रक्तस्राव, आदि), घनास्त्रता (स्थानीयकरण का संकेत), सदमा, एकाधिक अंग विफलता, आघात, लंबे समय तक संपीड़न सिंड्रोम, जलन, आदि)

ली गई दवाओं को इंगित करें जो हेमोस्टेसिस के मापदंडों को प्रभावित करती हैं, अंतिम प्रशासन की खुराक, विधि और तारीख का संकेत देती हैं

(रक्त) नमूने के लिए समय अंतराल, आहार और व्यायाम प्रतिबंध देखे जाते हैं:

निर्धारित रक्त नमूना सुबह 7 से 9 बजे तक रोगी को लेटने या बैठने के साथ किया जाता है। गतिकी में हेमोस्टेसिस का अध्ययन करते समय, शरीर की पिछली स्थिति की तरह ही रक्त लेना वांछनीय है।

अंतिम भोजन के 12-14 घंटे बाद खाली पेट रक्त लिया जाता है।

रक्त लेने से पहले, रोगी को 15 मिनट तक आराम करना वांछनीय है।

अपवाद:साइटो द्वारा हेमोस्टेसिस का अध्ययन, एपीटीटी का मूल्यांकन।

नियोजित अध्ययन की पूर्व संध्या पर (24 घंटों के भीतर), रोगी महत्वपूर्ण शारीरिक परिश्रम, शराब के सेवन से परहेज करता है। यह वांछनीय है कि रोगी रक्त नमूने की पूर्व संध्या पर वसायुक्त भोजन न खाए।

सर्जिकल हस्तक्षेप से कई दिनों से लेकर कई हफ्तों तक हेमोस्टेसिस में बदलाव होता है।

हेमोस्टेसिस को प्रभावित करने वाले कारकों में इंजेक्शन, जलसेक, आधान, पंचर, बायोप्सी, मालिश, डायलिसिस, रेडियोपैक एजेंटों की शुरूआत, इम्यूनोसिंटियोग्राफी, आयनीकरण विकिरण, एंडोस्कोपिक परीक्षा, विशेष आहार शामिल हैं।

रक्त नमूना लेने के नियम

रक्त परिधीय शिरा (आमतौर पर क्यूबिटल) से लिया जाता है।

रक्त का नमूना केवल परीक्षण ट्यूबों में वैक्यूम सैंपलिंग प्रणाली का उपयोग करके किया जाता है, जिसमें इस्तेमाल किए गए एंटीकोआगुलेंट के आधार पर एक विशेष रंग अंकन होता है ( सोडियम साइट्रेट 3.2%)अनुपात में: सोडियम साइट्रेट की 1 मात्रा और रक्त की 9 मात्रा।

अनुसंधान के लिए प्लेटलेट स्तरपरखनली में रक्त लेना ईडीटीए के साथ(बकाइन रंग कोडिंग)। प्लेटलेट्स के स्तर का अध्ययन नैदानिक ​​​​रक्त परीक्षण की अनुपस्थिति में या जब नैदानिक ​​​​रक्त परीक्षण में प्लेटलेट स्तर के पैथोलॉजिकल मान प्राप्त किए जाते हैं तो निर्धारित किया जाता है।

एक छोटे टूर्निकेट की अनुमति है, 60 सेकंड से अधिक नहीं। सुई के नस में प्रवेश करने के तुरंत बाद टूर्निकेट को हटा दें। जमावट प्रणाली के अध्ययन के लिए रक्त के नमूने के लिए, यह महत्वपूर्ण है कि आप नसों की मालिश नहीं कर सकते, उन पर दस्तक नहीं दे सकते।

0.7-1 मिमी (आकार 19-22) के आंतरिक व्यास वाली रक्त संग्रह सुई का उपयोग करें।

रक्त की अशांत गति और हवा के साथ इसके मिश्रण (झाग) से प्लेटलेट्स और रक्त के थक्के जमने वाले कारकों के सक्रिय होने के कारण सिरिंज का उपयोग अस्वीकार्य है। वैक्यूम कंटेनरों का उपयोग करते समय इसे बाहर रखा गया है।

नस में सुई डालने के बाद, वैक्यूम कंटेनर लगा दें, रक्त गुरुत्वाकर्षण द्वारा कंटेनर में प्रवाहित होने लगेगा।

कोगुलोलॉजिकल जांच के लिए रक्त लें दूसराटेस्ट ट्यूब, अन्य अध्ययनों के लिए पहला उपयोग, उदाहरण के लिए, जैव रासायनिक। यदि जमावट परीक्षण ट्यूब को पहले खींचना है, तो पहले 5 मिलीलीटर रक्त को एक खाली ट्यूब में खींचें और त्याग दें ऊतक थ्रोम्बोप्लास्टिन को नमूने में प्रवेश करने से रोकें।

संग्रह के तुरंत बाद रक्त को एंटीकोआगुलेंट के साथ बिना झाग के धीरे से मिलाएं (ट्यूब को 3-4 बार पलटें)।

जैविक सामग्री का नमूना लेने के बाद, रक्त का नमूना जांचें। रक्त के नमूनों की सटीक जांच निम्नलिखित त्रुटियों से बचाती है: रक्त/साइट्रेट मात्रा का गलत अनुपात; आंशिक रूप से जमा हुआ रक्त.

रक्त एकत्र होने के 45 मिनट के भीतर प्रयोगशाला में पहुंचा दिया जाता है। परिवहन के दौरान रक्त को हिलाना नहीं चाहिए। रक्त के नमूनों को 4°C से नीचे और 30°C से अधिक तापमान पर नहीं ले जाया जाना चाहिए।

पैरामेडिक-प्रयोगशाला सहायक (मेडिकल टेक्नोलॉजिस्ट) कार्य करता है:

वितरित रक्त का इनपुट नियंत्रण, जिसमें शामिल हैं: 1) रेफरल फॉर्म भरने की शुद्धता की जाँच करना। 2)ट्यूब पर लेबल के अनुसार वितरित रक्त की मात्रा की पर्याप्तता की जाँच करना, 3) जब ट्यूब को धीरे-धीरे झुकाया जाता है तो थक्कों की अनुपस्थिति के लिए नमूने की जाँच करना।

प्राप्त करने के लिए वितरित रक्त का सेंट्रीफ्यूजेशन:

प्लेटलेट प्रचुर प्लाज्मा (सेंट्रीफ्यूजेशन पैरामीटर: आरपीएम = 1000 आरपीएम (लगभग 150-200 ग्राम), सेंट्रीफ्यूजेशन समय 5-7 मिनट।

इष्टतम अपकेंद्रित्र स्थितियों का चयन करने के लिए, उन्हें केन्द्रापसारक बल (जी) द्वारा निर्देशित किया जाता है। आप सूत्र का उपयोग कर सकते हैं:

जी = 1.118 x 0.00001आर x एन2,

जहां आर सेंट्रीफ्यूज की त्रिज्या है - रोटर की धुरी और सेंट्रीफ्यूज सीट में टेस्ट ट्यूब के केंद्र के बीच सेंटीमीटर में दूरी; n प्रति मिनट क्रांतियों की संख्या है।

प्लेटलेट-गरीब प्लाज्मासेंट्रीफ्यूजेशन पैरामीटर: आरपीएम = ~2500-3000 आरपीएम (लगभग 1500-2000 ग्राम), सेंट्रीफ्यूजेशन समय 10-20 मिनट। प्लेटलेट्स को पूरी तरह से हटाने के लिए, बार-बार सेंट्रीफ्यूजेशन किया जाता है, सेंट्रीफ्यूजेशन पैरामीटर समान रहते हैं।

3. सेंट्रीफ्यूजेशन के बाद, रंग और पारदर्शिता के लिए प्लाज्मा की जांच करता है: एक हेमोलाइज्ड नमूना, आइक्टेरिक या लिपेमिक (काइलस) प्लाज्मा जांच के अधीन नहीं है।

सेंट्रीफ्यूजेशन के बाद, सतह पर तैरनेवाला हटा दिया जाता है।

वांछितदौरान हेमोस्टेसिस मापदंडों का अध्ययन करें रक्त का नमूना लेने के 2 घंटे बाद, लेकिन अनुमत में कोगुलोलॉजिकल मापदंडों का अध्ययन 4 घंटे के अंदर यदि प्लाज्मा को एरिथ्रोसाइट्स और ल्यूकोसाइट्स के तलछट से अलग कर दिया गया है।

यदि आवश्यक है दीर्घावधि संग्रहण"ताजा" नमूने (रक्त नमूना लेने के 2 घंटे से अधिक बाद नहीं) प्लेटलेट मुक्त प्लाज्माएक बार हो सकता है जम जानाऔर -20°C पर 2 सप्ताह तक या -70°C पर 6 महीने तक स्टोर करें। प्लाज्मा को गर्म पानी (+36°C) में जल्दी से पिघलाया जाना चाहिए, अच्छी तरह मिलाया जाना चाहिए और तुरंत जांच की जानी चाहिए। जमने के बाद एपीटीटी में बदलाव संभव है।

हेमेटोलॉजिकल अध्ययन के लिए सूक्ष्म तैयारी तैयार करने की विधि, निर्धारण और धुंधलापन के तरीके।

हेमेटोलॉजिकल अध्ययन के लिए रक्त स्मीयर तैयार करने की विधि।

चश्मे की तैयारी और प्रसंस्करण. नए साफ ग्लासों को निकिफोरोव (96% एथिल अल्कोहल और ईथर के बराबर भाग) के मिश्रण में डीग्रीज़ करने के बाद इस्तेमाल किया जा सकता है। उपयोग किए गए गिलासों को गर्म साबुन के घोल या वाशिंग पाउडर के घोल (1 बड़ा चम्मच पाउडर प्रति 5 लीटर पानी) में एक दिन के लिए भिगोया जाता है। एक दिन बाद, घोल को सूखा दिया जाता है, गिलास को बहते पानी से धोया जाता है। फिर उन्हें फिर से गर्म साबुन के घोल या वाशिंग पाउडर के घोल के साथ डाला जाता है और उबाल लाया जाता है, उसी घोल में 5-10 मिनट तक उबाला जाता है (अब और नहीं, चश्मे पर बादल छाने से बचने के लिए)। घोल को ठंडा करने के बाद, इसे फिर से सूखा दिया जाता है, स्लाइडों को बहते पानी से धोया जाता है, और प्रत्येक स्लाइड को बहते पानी के नीचे ब्रश से धोया जाता है। इस तरह से उपचारित ग्लासों को सूखने के लिए एक साफ शीट पर बिछा दिया जाता है। डीग्रीजिंग के लिए साफ गिलासों को निकिफोरोव या 96% एथिल अल्कोहल के मिश्रण में 60 मिनट के लिए रखा जाता है, फिर पोंछकर सुखाया जाता है और चौड़ी गर्दन वाले साफ कंटेनर में रखा जाता है। साफ चश्मे को या तो चिमटी से या हाथों से किनारों से पकड़ने की सलाह दी जाती है।

स्मीयरों की तैयारी. रक्त की एक छोटी बूंद सूखी तैयार कांच की स्लाइड पर कांच की छड़ से (या सीधे उंगली की चुभन वाली जगह से) छोटी तरफ लगाई जाती है। गिलास को क्षैतिज स्थिति में छोड़ दें और एक सूखे, साफ, पिसे हुए गिलास से गिलास पर खून लगाएं, इसे 45° के कोण पर रखें। एक छोटी धार के साथ, जब तक सारा खून उस पर फैल नहीं जाता तब तक इंतजार करने के बाद, उन्हें जल्दी से एक कांच की स्लाइड पर खींच लिया जाता है। ग्लास स्लाइड पर तेज़ दबाव नहीं होना चाहिए, क्योंकि इससे रक्त कोशिकाओं को नुकसान हो सकता है। स्मीयरों को हवा में सुखाया जाता है और चिह्नित किया जाता है (अधिमानतः एक साधारण पेंसिल से)। सूखा हुआ स्मीयर समान रूप से पतला, पीले रंग का, पर्याप्त आकार का होना चाहिए, कांच के किनारों से 1.0-1.5 सेमी की दूरी पर स्थित होना चाहिए, कांच की लगभग पूरी लंबाई पर कब्जा करना चाहिए और एक "पैनिकल" के साथ समाप्त होना चाहिए। गाढ़े (गहरे गुलाबी) स्मीयर का उपयोग नहीं किया जाना चाहिए, क्योंकि उनमें कोशिका आकृति विज्ञान को समझना मुश्किल होता है।

मानक गुणवत्ता वाले स्मीयर स्मीयरों की तैयारी के लिए डिज़ाइन किए गए और विभिन्न कंपनियों द्वारा निर्मित स्वचालित उपकरणों का उपयोग करके प्राप्त किए जाते हैं।

रक्त के धब्बों का निर्धारण और धुंधलापन। धुंधला होने से पहले, रक्त के धब्बों को आमतौर पर हेमोलिसिस को रोकने के लिए मिथाइल अल्कोहल में 5-10 मिनट के लिए रखा जाता है, जो पानी में घुलनशील डाई के साथ धुंधला होने की प्रक्रिया के दौरान पानी के संपर्क में आने या बाद में पानी के संपर्क में आने पर हो सकता है। धुंधलापन तकनीकों के साथ निर्धारण तकनीकों का वर्णन नीचे किया गया है। राइट और लीशमैन दागों के लिए निर्धारण की आवश्यकता नहीं है, क्योंकि इन दागों में मिथाइल अल्कोहल होता है।

सूखे स्वाबों को सूखी, गर्म जगह में 2 दिनों तक संग्रहीत किया जा सकता है; बिना निर्धारण के गर्म, आर्द्र वातावरण में, वे बहुत कम संग्रहीत होते हैं।

रक्त कोशिकाओं में बेसोफिलिक और एसिडोफिलिक संरचनाएं होती हैं जो प्रतिक्रिया (पीएच) में भिन्न होती हैं। नाभिक बेसोफिलिक और दाग नीले रंग के होते हैं। अत्यधिक बेसोफिलिक (अम्लीय) बेसोफिल कणिकाएं भी नीले रंग की होती हैं। हीमोग्लोबिन (बेसिक होने के कारण) एसिडोफिलिक रूप से दागदार हो जाता है, यानी लाल। अम्लीय और क्षारीय रंगों के संयोजन से धुंधला होने को रोमानोव्स्की धुंधलापन कहा जाता है और इसमें विभिन्न संशोधन होते हैं (पैपेनहेम, राइट, नोहट, लीशमैन, गिम्सा, जेनर, आदि)। मेथिलीन ब्लू का उपयोग आमतौर पर मुख्य डाई के रूप में किया जाता है, लेकिन टोल्यूडीन ब्लू का भी उपयोग किया जाता है। एसिड डाई के रूप में ईओसिन, एज़्योर I और एज़्योर II का उपयोग किया जाता है।

अच्छे धुंधलापन के लिए मानदंड: एरिथ्रोसाइट्स का गुलाबी रंग, गुलाबी पृष्ठभूमि पर न्यूट्रोफिल की ग्रैन्युलैरिटी का बैंगनी धुंधलापन, मोनोसाइट्स की कोमल अज़ूरोफिलिक ग्रैन्युलैरिटी।

पेंट को पतला करने के लिए, तटस्थ ताज़ा आसुत जल का उपयोग करना सबसे अच्छा है। वातावरण से कार्बन डाइऑक्साइड ग्रहण करने के कारण बासी आसुत जल अम्लीय हो जाता है। यदि आसुत जल क्षारीय है, तो लाल रक्त कोशिकाएं गंदे नीले-हरे रंग में बदल जाती हैं; ल्यूकोसाइट्स का वह हिस्सा जिसे नीले रंग में रंगा जाना चाहिए वह बैंगनी हो जाता है, इओसिनोफिल कणिकाएं गुलाबी के बजाय नीले और हरे रंग की हो जाती हैं, और न्यूट्रोफिल कणिकाएं बरकरार रहती हैं। अम्लीय पानी में, एरिथ्रोसाइट्स चमकीले नारंगी रंग में बदल जाते हैं, और ल्यूकोसाइट नाभिक बहुत हल्के हो जाते हैं। 7.0 पीएच वाला आसुत जल आदर्श है, जिसे संरक्षित करने के लिए बफर किया जाता है। आप उपयोग के लिए तैयार बफर टैबलेट का उपयोग कर सकते हैं जो आसुत जल में घुल जाती हैं।

अस्थि मज्जा स्मीयरों पर दाग लगाने के लिए पीएच 7.4-7.5 का दाग आदर्श है।

नोहट और पप्पेनहेम के अनुसार धुंधला करने की विधियां एकीकृत के रूप में स्वीकार की जाती हैं।

निर्धारण के लिए अभिकर्मक: 1) मिथाइल अल्कोहल या 2) मे-ग्रुनवाल्ड ईओसिन-मेथिलीन नीला घोल।

नोख्त के अनुसार स्मीयरों को रंगने के लिए अभिकर्मक: 1) एज़्योर I का मूल समाधान: 1 ग्राम पेंट को 1 लीटर आसुत जल में घोल दिया जाता है, कमरे के तापमान पर 12-14 दिनों के लिए एक अंधेरे कांच के बर्तन में छोड़ दिया जाता है, जिसके बाद इसका उपयोग किया जाता है; 2) पोटेशियम ईओसिन का मूल समाधान: 1 ग्राम पेंट को 1 लीटर आसुत जल में घोल दिया जाता है, कमरे के तापमान पर 12-14 दिनों के लिए एक अंधेरे कांच के कंटेनर में छोड़ दिया जाता है, जिसके बाद इसका उपयोग किया जाता है; 3) फॉस्फेट बफर (वीज़ मिश्रण), पीएच 7.4-7.5: 0.49 ग्राम पोटेशियम डाइहाइड्रोजन फॉस्फेट (KH2PO4) और 0.909 ग्राम सोडियम हाइड्रोजन फॉस्फेट (Na2HPO4) मिलाएं और 1 लीटर आसुत जल में घोलें; 4) एज़्योर-ईओसिन का कार्यशील समाधान: उपयोग से पहले, एज़्योर II के स्टॉक समाधान के 25 मिलीलीटर, पोटेशियम ईओसिन के स्टॉक समाधान के 20 मिलीलीटर और बफर समाधान के 55 मिलीलीटर मिलाएं (रंगों का अनुपात भिन्न हो सकता है, वे स्थापित हैं) अनुभवजन्य रूप से स्टॉक समाधानों के नए बैच तैयार करते समय)।

पप्पेनहेम के अनुसार स्मीयरों को रंगने के लिए अभिकर्मक: 1) मे-ग्रुनवाल्ड के अनुसार ईओसिन-मेथिलीन नीले रंग का एक समाधान। तैयार डाई घोल के अभाव में, इसे 1 लीटर मिथाइल अल्कोहल में 1 ग्राम सूखा पेंट घोलकर तैयार किया जाता है; 2) नोख्त के अनुसार एज़्योर-इओसिन का कार्यशील समाधान।

धब्बों का निर्धारण. फिक्सिंग समाधान को क्युवेट में या ग्राउंड स्टॉपर के साथ चौड़े मुंह वाले डिश में डाला जाता है। स्मीयरों को एक कंटेनर में रखा जाता है, जिसे क्युवेट में डुबोया जाता है या 5-10 मिनट के लिए एक डिश में एक-एक करके रखा जाता है। ग्लास वाले कंटेनर को फिक्सिंग सॉल्यूशन से हटा दिया जाता है (या ग्लास को चिमटी से निकालकर स्टैंड में रख दिया जाता है) और पूरी तरह सूखने तक हवा में छोड़ दिया जाता है।

नोचट के अनुसार धुंधलापन। सूखे स्थिर स्मीयरों को, कंटेनर से हटाए बिना, कड़ाई से परिभाषित समय (20-45 मिनट) के लिए एक कार्यशील पेंट समाधान के साथ एक क्युवेट में रखा जाता है, जिसे पेंट के प्रत्येक बैच के लिए अनुभवजन्य रूप से चुना जाता है। एक कंटेनर के साथ क्युवेट की अनुपस्थिति में, ग्लास को ऊपर की ओर स्ट्रोक के साथ समानांतर में रखी गई दो ग्लास रॉड्स ("रेल") पर क्षैतिज रूप से रखा जाता है और उन पर काम करने वाले पेंट समाधान के 3-4 मिलीलीटर डाले जाते हैं। चश्मे वाले कंटेनर को डाई के साथ क्युवेट से बाहर निकाला जाता है और नल के पानी के साथ क्युवेट में रखा जाता है (कंटेनर की अनुपस्थिति में, ग्लास से पेंट को कांच की छड़ों से हटाए बिना पानी से धोया जाता है)। स्मीयरों को हवा में सुखाया जाता है।

पप्पेनहाइम रंग. सूखे गैर-स्थिर रक्त स्मीयरों को एक कंटेनर में रखा जाता है और 3-5 मिनट के लिए मे-ग्रुनवाल्ड समाधान के साथ एक क्युवेट में डाला जाता है (या एक पिपेट के साथ एक गैर-स्थिर स्मीयर पर 3-4 मिलीलीटर डाई डाला जाता है)। स्मीयर वाले कंटेनर को आसुत जल के साथ एक क्युवेट में धोया जाता है, और फिर 8-15 मिनट के लिए नोख्त के अनुसार नीला-ईओसिन दाग के साथ एक क्युवेट में रखा जाता है। डाई को निकाले बिना, "रेल" पर रखी स्लाइडों में 1 मिनट के लिए आसुत जल मिलाया जाता है, और फिर पेंट को 8-15 मिनट के लिए स्मीयर पर डाला जाता है, फिर पेंट को पानी से धो दिया जाता है। स्मीयरों को हवा में सुखाया जाता है।

रोमानोव्स्की-गिम्सा के अनुसार रंग भरना। नोख्त के अनुसार उसी तरह निर्मित किया गया। डाई के रूप में, एक तैयार रोमानोव्स्की-गिम्सा समाधान का उपयोग किया जाता है, जिसे उपयोग करने से पहले डाई की 1 बूंद प्रति 1 मिलीलीटर आसुत जल की दर से पतला किया जाता है। डाई के प्रत्येक बैच (25-40 मिनट) के लिए रंगाई का समय अनुभवजन्य रूप से निर्धारित किया जाता है।

राइट रंग. अभिकर्मक। 0.2 ग्राम राइट स्टेन (सूखा पाउडर, बीडीएच/ई. मर्क) को 100 मिलीलीटर मेथनॉल में घोल दिया जाता है और कई दिनों तक रखा रहने दिया जाता है। यदि एरिथ्रोसाइट्स पर्याप्त रूप से दागदार नहीं हैं, तो 0.25% या 0.3% घोल तैयार करें।

रंग भरने की प्रगति. पेंट की कुछ (लगभग 8) बूंदें स्मीयर पर लगाई जाती हैं, 2-3 मिनट तक रहने दिया जाता है (सुनिश्चित करें कि पेंट सूख न जाए), फिर स्मीयर पर समान मात्रा में बफर्ड पानी डाला जाता है। यदि पेंट परिपक्व हो गया है, तो धातु की चमक के साथ एक फोम या फिल्म पतला पेंट की सतह पर दिखाई देगी। पतला पेंट 2-3 मिनट के लिए स्मीयर पर छोड़ दिया जाता है, और फिर बफर समाधान या पानी से धो दिया जाता है। पेंट को स्मीयर की सतह पर जमने नहीं देना चाहिए। यदि ऐसा होता है, तो स्मीयर को 15-20 सेकंड के लिए बिना पतला पेंट से भर दिया जाता है और फिर बफर समाधान या पानी से भर दिया जाता है।

फॉस्फेट बफर की तैयारी.

समाधान ए (0.2 एम केएच2पीओ4): 1 लीटर आसुत जल में 27.2 ग्राम नमक घोलें।

समाधान बी (0.2 एम Na2HPO4): 1 लीटर आसुत जल में 35.6 ग्राम Na2HPO4 × 2H20 घोलें।

वांछित पीएच के साथ 100 मिलीलीटर बफर समाधान प्राप्त करने के लिए, समाधान ए और बी को तालिका में बताई गई मात्रा में सूखाया जाना चाहिए। पीएच मान की जांच पीएच मीटर से की जाती है।

फॉस्फेट बफर समाधान की तैयारी

लीशमैन रंग. अभिकर्मक। 0.15 ग्राम लीशमैन का सूखा पेंट 133 मिली पूर्ण मिथाइल अल्कोहल में घोला जाता है। पेंट पूरी तरह से घुल जाना चाहिए, सलाह दी जाती है कि पेंट के क्रिस्टल को पहले से मोर्टार में पीस लें। पेंट को कांच के स्टॉपर वाली बोतल में रखें, फ़िल्टर न करें।

रंग भरने की प्रगति. राइट स्टेन के समान ही किया जाता है, लेकिन बफर समाधान के दोहरे तनुकरण के साथ। पेंट की कुछ बूँदें (लगभग 8) स्मीयर पर डाली जाती हैं, 2 मिनट के लिए रखी जाती हैं। बफर घोल की दोगुनी मात्रा (16 बूँदें) डालें, हिलाकर हिलाएँ और 7-10 मिनट के लिए छोड़ दें। पेंट 2-3 सेकंड में आसुत जल से धुल जाता है। ज्यादा देर तक धोने से रंग खराब हो जाता है। स्मीयरों को हवा में एक रैक में सुखाया जाता है।

खून की एक मोटी बूंद तैयार करना. एक ग्लास स्लाइड पर एक दूसरे से कुछ दूरी पर जमा रक्त की तीन बूंदों को एक साफ ग्लास स्लाइड के कोण के साथ लगभग 1 सेमी व्यास के आकार तक विस्तारित किया जाता है, एक पेंसिल से चिह्नित किया जाता है, फिर 1-2 घंटे के लिए हवा में सुखाया जाता है।

खून की मोटी बूंद का रंग. खून की मोटी बूंदें स्थिर नहीं होतीं। अच्छी तरह से सूखी मोटी बूंदों वाली कांच की स्लाइडों को एक दूसरे से कुछ दूरी पर "रेल" पर रखा जाता है, और नोख्त के अनुसार एज़्योर-इओसिन का कार्यशील घोल उन पर 8-10 मिनट के लिए डाला जाता है। एरिथ्रोसाइट्स की "लीचिंग" होती है। फिर पेंट को सूखा दिया जाता है और नोख्त के अनुसार एज़्योर-ईओसिन के कार्यशील समाधान का एक नया हिस्सा 30-35 मिनट के लिए तैयारियों पर डाला जाता है। फिर स्लाइडों को सावधानीपूर्वक आसुत जल से धोया जाता है और सुखाया जाता है।

स्मीयरों का स्वचालित धुंधलापन

चूंकि हेमेटोलॉजी प्रयोगशाला में सबसे अधिक अनुरोधित कार्यों में से एक रक्त स्मीयरों की तैयारी और धुंधलापन है, इसलिए उन्हें स्वचालित करने का प्रयास स्वाभाविक है।

पहला स्वचालित स्मीयर तैयारी सिस्टम 1990 में सिस्मेक्स (जापान) द्वारा विकसित किया गया था, और वर्तमान में दुनिया भर में 1600 से अधिक सिस्टम स्थापित हैं। इस अवधि के दौरान प्राप्त व्यापक अनुभव का उपयोग एक नई पीढ़ी प्रणाली के विकास में किया गया था - प्रति घंटे 120 स्मीयर तक की क्षमता वाला एक पूरी तरह से स्वचालित SP-1000i स्मीयर तैयारी और धुंधला स्टेशन। SP-1000i इंटेलिजेंट वेज विधि का उपयोग करके स्मीयर तैयारी में उच्च स्तर के मानकीकरण और गुणवत्ता का एहसास करता है, जो उपयोगकर्ता को लागू रक्त के नमूने की मात्रा, स्मियरिंग ब्लेड के कोण, आवेदन की गति और प्रतीक्षा समय के आधार पर समायोजित करने की अनुमति देता है। परीक्षण नमूने के हेमाटोक्रिट पर, 8 से 16 विभिन्न विनियमन स्तरों का उपयोग करके। रक्त का नमूना मैन्युअल रूप से या स्वचालित रूप से खुली या बंद ट्यूबों से किया जा सकता है। Sysmex स्वचालित स्मीयर तैयारी और धुंधला स्टेशन SP-1000i (जापान)

सिस्टम सात लचीले ढंग से अनुकूलन योग्य स्टेनिंग प्रोटोकॉल का उपयोग करता है जो आपको स्मीयर स्टेनिंग की गुणवत्ता को मानकीकृत करने और उच्चतम आवश्यकताओं को पूरा करने की अनुमति देता है। डबल और सिंगल स्टेनिंग के लिए निम्नलिखित प्रोटोकॉल का उपयोग किया जा सकता है: मे-ग्रुनवल्ड-गिम्सा, रोमानोव्स्की और रोमानोव्स्की-गिम्सा। रक्त के धब्बों को एक समर्पित कैसेट प्रणाली में दागा जाता है जिसमें प्रति कैसेट केवल एक स्लाइड होती है। इस विधि से, रक्त स्मीयर और धुंधला अभिकर्मकों के बीच एक अच्छे संबंध की गारंटी होती है और अभिकर्मक से हवा में मेथनॉल का कोई वाष्पीकरण नहीं होता है। धुंधला होने से पहले अच्छा रक्त निर्धारण सुनिश्चित करने के लिए, मेथनॉल को पूर्व-फिक्स करने के लिए एक अलग चरण धुंधला प्रक्रिया में एकीकृत किया गया है।

स्टेनिंग प्रोटोकॉल के लचीलेपन के कारण, अस्थि मज्जा स्टेनिंग के लिए एक विशिष्ट प्रोटोकॉल का उपयोग किया जा सकता है।

हेमेटोलॉजिकल अध्ययन के लिए अस्थि मज्जा स्मीयर तैयार करने की विधि।

अस्थि मज्जा परीक्षण - मायलोग्राम अस्थि मज्जा परीक्षण में पहला प्रश्न जिसका उत्तर अवश्य दिया जाना चाहिए वह है कोशिकाओं का मात्रात्मक पहलू। यह सर्वविदित है कि परिधीय रक्त के संबंध में, विभिन्न प्रकार की कोशिकाओं की संख्या और प्रतिशत के लिए कई संख्यात्मक मान निर्धारित किए जा सकते हैं, क्योंकि वे मुक्त अवस्था में होते हैं और संवहनी रक्त के निलंबन में अपेक्षाकृत समान रूप से वितरित होते हैं। अस्थि मज्जा के बारे में एक पूरी तरह से अलग बात कही जा सकती है: हेमटोपोइएटिक ऊतक की संरचना बहुत विषम है और अस्थि मज्जा कोशिकाओं का वितरण समान नहीं है। इस प्रकार, कक्ष में मायलोकैरियोसाइट्स की प्रत्यक्ष गिनती सामान्य अवस्था में और एक ही बीमारी के ढांचे के भीतर, बहुत व्यापक रेंज में उतार-चढ़ाव करती है। हमने व्यक्तियों में जो मान पाया वह सामान्यतः 27,000 से 112,000 परमाणु तत्व प्रति मिमी3 (उर्स्या) के बीच था। साहित्य डेटा में 12,000 और 300,000 प्रति मिमी3 (कार्टराइट, पेज) की सीमा के साथ और भी अधिक व्यापक रूप से उतार-चढ़ाव होता है। सेंट्रीफ्यूजेशन के बाद, हेमटोक्रिट ट्यूब में निम्नलिखित 4 परतें पाई जाती हैं: 1) ऊपरी वसायुक्त पीली परत; 2) प्लाज्मा; 3) परमाणु कोशिकाओं से बनी एक धूसर-सफ़ेद परत; 4) एरिथ्रोसाइट्स से बनी एक लाल परत। परमाणु कोशिकाओं (माइलोक्रिट) की ग्रे-सफ़ेद परत का माप सीमित मूल्य या भ्रामक भी है, क्योंकि सामान्य व्यक्तियों में पाए जाने वाले मूल्य भी महत्वपूर्ण उतार-चढ़ाव दिखाते हैं। इसके अलावा, परमाणु कोशिकाएं न केवल इस परत में पाई जाती हैं, बल्कि वसा और एरिथ्रोसाइट परतों में भी पाई जाती हैं। लेकिन सतह पर तैरनेवाला प्लाज्मा को हटाने के बाद भूरे-सफ़ेद परत से अस्थि मज्जा सांद्रता के स्मीयर तैयार किए जा सकते हैं। वे उन मामलों में निदान प्रक्रिया में उपयोगी साबित हुए हैं जहां कोशिकाओं में प्रत्यक्ष स्मीयर खराब होते हैं। यह देखते हुए कि मायलोकार्योसाइट चैम्बर गिनती और मायलोक्रिट निर्धारण सीमित प्रतिलिपि प्रस्तुत करने योग्यता के साथ केवल अनुमानित परिणाम हैं, ये मात्रा निर्धारण विधियां संतोषजनक नहीं हैं। सक्शन पंचर के दौरान निकाली गई सामग्री विभिन्न अनुपात में रक्त के साथ मिश्रित अस्थि मज्जा का एक नमूना है। रक्त के साथ अस्थि मज्जा के पतला होने की डिग्री कई कारकों पर निर्भर करती है। 32पी लेबलिंग ने साबित कर दिया कि रक्त के साथ एस्पिरेटेड अस्थि मज्जा का पतला होना 40% से 100% तक होता है। हालांकि, यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि निदान करने के लिए अस्थि मज्जा का अध्ययन मुख्य रूप से सेलुलर सामग्री के गुणात्मक अध्ययन पर आधारित है, और केवल इस सामग्री के मात्रात्मक मूल्यों पर आधारित है। यही कारण है कि अस्थि मज्जा कोशिकाओं को निर्धारित करने के लिए मात्रात्मक तरीकों में सामान्य नमूनों की तुलना में अस्थि मज्जा की सेलुलर संरचना का अर्ध-मात्रात्मक मूल्यांकन शामिल होता है: ए) कुचल गांठ के साथ स्मीयर; बी) हिस्टोलॉजिकल अनुभाग। स्मीयर का अध्ययन मुख्य रूप से सूखे लेंस के साथ, कई स्मीयरों पर, निम्नलिखित लक्ष्यों के साथ किया जाता है: ए) अस्थि मज्जा कोशिका द्रव्यमान का अर्ध-मात्रात्मक मूल्यांकन; बी) मेगाकार्योसाइट्स की उपस्थिति और घनत्व का निर्धारण; ग) विशाल कोशिकाओं या असामान्य कोशिकाओं के घोंसले का पता लगाना; घ) विसर्जन द्वारा अनुसंधान के लिए सबसे उपयुक्त क्षेत्रों की पहचान। अस्थि मज्जा कणों को कुचलकर प्राप्त स्मीयरों पर, निम्नलिखित तीन संकेंद्रित क्षेत्र प्रतिष्ठित हैं: ए) केंद्रीय; बी) बाहरी; ग) मध्यवर्ती। केंद्रीय क्षेत्र वसा रिक्तिकाओं, स्ट्रोमल कोशिकाओं, ग्रैन्यूलोसाइट्स और कई नष्ट कोशिकाओं से बनता है। बाहरी क्षेत्र में बड़ी मात्रा में रक्त होता है, जो अस्थि मज्जा कोशिकाओं को पतला करता है। पतले स्मीयर की तरह, यह केवल माइलॉयड कोशिकाओं और एरिथ्रोसाइट्स के रूपात्मक विवरण के अध्ययन में योगदान देता है। सबसे सघन कोशिका द्रव्यमान मध्यवर्ती क्षेत्र में स्थित है, जो एक इष्टतम अध्ययन की अनुमति देता है जो उल्लिखित सभी प्रश्नों को स्पष्ट कर सकता है। यहां मज्जा कोशिकाएं अच्छी तरह से संरक्षित हैं और टापुओं या घोंसलों में व्यवस्थित हैं, जैसा कि मज्जा में देखा जाता है। अस्थि मज्जा स्थलाकृति को बनाए रखते हुए, इस क्षेत्र के अध्ययन के परिणाम अधिक सजातीय हैं और अस्थि मज्जा की वास्तविक स्थिति के अनुरूप हैं, जिसकी पुष्टि इसकी हिस्टोलॉजिकल छवियों के साथ तुलना से होती है। कोशिका घनत्व का अर्ध-मात्रात्मक निर्धारण इस प्रकार व्यक्त किया जाता है: ए) सामान्य, बी) समृद्ध, या सी) सामान्य अस्थि मज्जा की तुलना में दुबला। सामान्य या प्रचुर कोशिका द्रव्यमान की पहचान एक मूल्यवान खोज है, जबकि अल्प अस्थि मज्जा पर सावधानी से विचार किया जाना चाहिए। वास्तविक हाइपोप्लेसिया की उपस्थिति को साबित करने के लिए, कई प्लेटों की जांच की जानी चाहिए, कई हड्डी क्षेत्रों में एक पंचर और / या एक हड्डी बायोप्सी की जानी चाहिए। अस्थि मज्जा कोशिका द्रव्यमान के बारे में सबसे सटीक जानकारी हिस्टोलॉजिकल अनुभागों की जांच करके प्राप्त की जाती है। एक वयस्क में, वसा और सक्रिय कोशिका पैरेन्काइमा द्वारा व्याप्त स्थान का अनुपात सामान्यतः 1:1 या 2:1 होता है। कुछ लेखक अस्थि मज्जा को हाइपोसेलुलर मानते हैं जब हेमटोपोइएटिक कोशिकाएं अस्थि मज्जा गांठ के एक चौथाई से भी कम हिस्से पर कब्जा कर लेती हैं। निदान करने के लिए गुणात्मक अस्थि मज्जा परीक्षण आवश्यक है। यह विसर्जन द्वारा, पतले स्मीयरों पर और, विशेष रूप से, मध्यवर्ती क्षेत्र से कुचली हुई गांठों वाले स्मीयरों पर किया जाता है। स्पष्ट रूप से परिभाषित और रूपात्मक रूप से अच्छी तरह से संरक्षित कोशिकाओं के साथ सर्वोत्तम सही ढंग से फैलाए गए और दाग वाले स्मीयरों के चयन की सिफारिश की जाती है। यह अध्ययन बताता है: ए) विभिन्न प्रकार की माइलॉयड कोशिकाओं की पहचान; बी) प्रत्येक कोशिका पंक्ति की परिपक्वता की डिग्री का निर्धारण; सी) ग्रैन्यूलोसाइट्स और एरिथ्रोब्लास्ट (जी/ई) के बीच संबंध का स्पष्टीकरण; डी) माइटोसिस चरण में कोशिकाओं की पहचान; ई) सामने आई असामान्य कोशिकाओं का विवरण। कई स्मीयरों की जांच करने के बाद, या तो एक विस्तृत वर्णनात्मक "माइलोग्राम" संकलित किया जाता है (जिसमें स्मीयरों को समझने के बाद किए गए निष्कर्ष शामिल होते हैं), या कम से कम 300-500 तत्वों द्वारा स्थापित प्रतिशत मायलोग्राम संकलित किया जाता है। प्रतिशत मायलोग्राम को संकलित करने के दो तरीके हैं: 1) शेष कोशिका पंक्तियों को 100 ग्रैन्यूलोसाइट्स पर निर्दिष्ट करना; 2) अस्थि मज्जा कोशिकाओं की कुल संख्या से प्रत्येक प्रकार की कोशिकाओं का प्रतिशत प्रदर्शन। सांख्यिकीय दृष्टिकोण से, बाद वाली विधि अधिक सही प्रतीत होती है और स्पष्ट रूप से अस्थि मज्जा की सेलुलर संरचना की वास्तविक तस्वीर को दर्शाती है। अलग-अलग लेखकों द्वारा स्थापित सूत्र काफी भिन्न होते हैं, क्योंकि अस्थि मज्जा जैसे विषम ऊतक में वास्तविक औसत मूल्यों को निर्धारित करना मुश्किल होता है। विंट्रोब के अनुसार, तालिका 12 सामान्य व्यक्तियों के चयनित अस्थि मज्जा नमूनों के अध्ययन के परिणाम दिखाती है। सामान्य मायलोग्राम

मायलोग्राम पैरामीटर औसत मूल्य (%) उतार-चढ़ाव की सीमा (%)

जालीदार कोशिकाएँ 0.9 0.1-1.6 अविभेदित विस्फोट 0.6 0.1-1.1 मायलोब्लास्ट 1.0 0.2-1.7

प्रोमाइलोसाइट्स 2.5 1.0-4.1

मायलोसाइट्स न्यूट्रोफिल 9.6 7.0-12.2 मेटामाइलोसाइट्स न्यूट्रोफिल 11.5 8.0-15.0 स्टैब न्यूट्रोफिल 18.2 12.8-23.7 खंडित न्यूट्रोफिल 18.6 13.1-24.1 कुल न्यूट्रोफिल कोशिकाएं 60.8 52.7-68.9इओसिनोफिलिक मायलोसाइट्स 0.1 0.0-0.2 इओसिनोफिलिक मेटामाइलोसाइट्स 0.2 0.1-0.4 इओसिनोफिल्स 2.8 0.4-5.2

इओसिनोफिलिक श्रृंखला की कुल कोशिकाएँ 3.2 0.5-5.8बेसोफिलिक मायलोसाइट्स 0.1 0-0.3

बेसोफिल्स 0.1 0-0.3

बेसोफिलिक श्रृंखला की कुल कोशिकाएँ 0.2 0-0.5लिम्फोब्लास्ट 0.1 0-0.2

प्रोलिम्फोसाइट्स 0.1 0-0.2

लिम्फोसाइट्स 8.8 4.3-13.3

कुल लिम्फोइड कोशिकाएं 9.0 4.3-13.7मोनोब्लास्ट्स 0.1 0-0.2

मोनोसाइट्स 1.9 0.7-3.1

प्लाज़्माब्लास्ट्स 0.1 0-0.2

प्रोप्लाज्मोसाइट्स 0.1 0.1-0.2

प्लाज्मा कोशिकाएं 0.9 0.1-1.8

एरिथ्रोब्लास्ट्स 0.6 0.2-1.1

बेसोफिलिक नॉर्मोब्लास्ट 3.6 1.4-5.8 पॉलीक्रोमैटोफिलिक नॉर्मोब्लास्ट 12.9 8.9-16.9 ऑक्सीफिलिक नॉर्मोब्लास्ट 3.2 0.8-5.6

कुल एरिथ्रोइड कोशिकाएँ 20.5 14.5-26.5मेगाकार्योसाइट्स 0.4 0.2-0.6

स्वस्थ लोगों पर हमारे अध्ययन के अनुसार, परिणाम इस प्रकार हैं:

ग्रैन्यूलोसाइट्स की संख्या 56-70%,

एरिथ्रोब्लास्टिक श्रृंखला 23-30%, लिम्फोप्लाज्मेसिटिक श्रृंखला 5-10%, मोनोसाइटो-मैक्रोफेज श्रृंखला 1-2% और मेगाकार्योसाइट श्रृंखला 0.1-0.8% (उर्स्या)। सामान्य माइलॉयड पंक्तियों के अनुपात में बदलाव या असामान्य कोशिकाओं के साथ उनका प्रतिस्थापन अक्सर बीमारी के प्रकार का सुझाव देता है। जालीदार कोशिकाएँ कम बार और इसके अलावा, कम संख्या में दिखाई देती हैं। संयोग से, स्मीयर (या अस्थि मज्जा छाप) ऑस्टियोब्लास्ट और/या ऑस्टियोक्लास्ट दिखाते हैं, जिन्हें नियोप्लास्टिक कोशिकाओं के लिए गलत नहीं माना जाना चाहिए। उनकी उपस्थिति अक्सर बच्चों में देखी जाती है, कम अक्सर प्राथमिक मायलोफाइब्रोसिस वाले वयस्कों में या दूसरी बार, कार्सिनोमेटस मेटास्टेसिस के बाद, तीव्र ल्यूकेमिया, ऑस्टियोपोरोसिस आदि के साथ। जी/ई अनुपात ग्रैन्यूलोसाइट्स को एरिथ्रोब्लास्ट की संख्या से विभाजित करके प्राप्त किया जाता है। एक सामान्य वयस्क में, यह अनुपात औसतन 3/1 या 4/1 होता है, जिसकी अनुमानित सीमा 2/1 (जब केवल अपरिपक्व ग्रैन्यूलोसाइट्स शामिल होती है) और 5/1 (जब यह सभी ग्रैन्यूलोसाइट्स - परिपक्व और अपरिपक्व) से संबंधित होती है। एच/ई अनुपात उम्र के साथ बदलता रहता है: जन्म के समय यह छोटा होता है (1.8/1), 2 सप्ताह की उम्र में यह बढ़कर 11/1 हो जाता है, फिर धीरे-धीरे कम हो जाता है, और एक साल के बच्चों में यह मूल्यों तक पहुंच जाता है। एक वयस्क का. वैश्विक अस्थि मज्जा हाइपो- या हाइपरप्लासिया के मामलों में एच/ई अनुपात सामान्य है, साथ ही व्यक्तिगत कोशिकाओं के प्रसार में जो इस अनुपात की गणना में शामिल नहीं हैं, उदाहरण के लिए, प्लास्मेसीटोमा में। ल्यूकेमिया, ल्यूकोमा जैसी प्रतिक्रियाओं और एरिथ्रोब्लास्टोपेनिया में, अनुपात अधिक होता है, जबकि एरिथ्रोब्लास्टिक हाइपरप्लासिया वाले एनीमिया में यह कम या विपरीत होता है (मेगालोब्लास्टिक, हेमोलिटिक एनीमिया)। स्मीयरों के अध्ययन के बाद प्राप्त मायलोग्राम डेटा जारी करने से पहले, यह स्पष्ट करना आवश्यक है: ए) पंचर साइट; बी) अस्थि घनत्व; ग) वे स्थितियाँ जिनके तहत सक्शन हुआ; घ) चयनित सामग्री का स्थूल पहलू। अस्थि मज्जा परीक्षण असंख्य और विविध डेटा के एकीकरण पर आधारित एक जटिल प्रक्रिया है। इसका परिणाम सामान्य निष्कर्षों को प्रतिबिंबित करना चाहिए, जो व्यक्तिगत आंकड़ों के यांत्रिक पंजीकरण की तुलना में अनुमान पर अधिक आधारित हों, जो इसके अलावा, उतार-चढ़ाव वाले हों। किसी भी मायलोग्राम के निष्कर्ष से या तो निदान या अस्थि मज्जा के अध्ययन से उत्पन्न होने वाले अतिरिक्त अध्ययन के संकेत स्पष्ट होने चाहिए। रक्त रोगों में, सक्शन पंचर 80% मामलों में स्मीयरों और गांठ वाले वर्गों की मदद से निदान को स्पष्ट करने में मदद करता है। अन्य मामलों में, अस्थि बायोप्सी और अस्थि मज्जा की हिस्टोलॉजिकल परीक्षा का संकेत दिया जाता है। बायोऑप्टिकल चयन और हिस्टोलॉजिकल परीक्षा इसके लिए आवश्यक लगती है: ए) प्राथमिक या माध्यमिक मायलोफाइब्रोसिस; बी) अस्थि मज्जा अप्लासिया या हाइपोप्लासिया; ग) ग्रैनुलोमेटस प्रकार के घावों के साथ होने वाली बीमारियाँ (जैसे। , गॉडकिन रोग, सारकॉइडोसिस, तपेदिक, आदि); घ) कार्सिनोमेटस मेटास्टेसिस; ई) सभी मामलों में जब पंचर द्वारा चयनित सामग्री असंतोषजनक है या अस्थि मज्जा का पहलू विश्वसनीय नहीं है। बायोऑप्टिकल सैंपलिंग के बाद, साइटोलॉजिकल जांच के लिए इंप्रेशन तैयार किए जाते हैं, क्योंकि हिस्टोलॉजिकल अनुभाग हेमटोपोइएटिक कोशिकाओं के संरचनात्मक विवरण के बारे में बहुत कम जानकारी प्रदान करते हैं जो भीड़ में हैं, बिखरे हुए नहीं हैं और मानकीकृत रूप में नहीं हैं। इसके अलावा, निर्धारण कोशिका प्रत्यावर्तन का कारण बनता है और हिस्टोलॉजिकल धुंधलापन साइटोलॉजिकल धुंधलापन की तुलना में कम चयनात्मक होता है। यही कारण है कि अस्थि मज्जा की पूरी जांच में साइटोलॉजिकल - स्मीयर या इंप्रेशन पर, और हिस्टोलॉजिकल - अध्ययन के अनुभागों पर दोनों शामिल होते हैं। यह याद रखना चाहिए कि अस्थि मज्जा परीक्षा के साइटोलॉजिकल और हिस्टोलॉजिकल तरीकों को बाहर नहीं किया गया है, बल्कि, इसके विपरीत, पूरक हैं: बायोप्सी एक मात्रात्मक और वास्तुशिल्प विधि है, जबकि मायलोग्राम एक गुणात्मक और साइटोलॉजिकल है।

गोरियाव कक्ष में रक्त कोशिकाओं की गिनती की विधि।

हेमेटोलॉजिकल एनालाइज़र पर काम करने की विधि।

विश्लेषक-हेमेटोलॉजिकल- मात्रात्मक अनुसंधान के लिए डिज़ाइन किया गया एक उपकरण (उपकरण का एक सेट)। कोशिकाओं खूननैदानिक ​​निदान प्रयोगशालाओं में. स्वचालित या अर्ध-स्वचालित हो सकता है। एक अर्ध-स्वचालित हेमेटोलॉजिकल विश्लेषक एक स्वचालित से भिन्न होता है जिसमें रक्त के नमूने को पतला करने की प्रक्रिया एक अलग उपकरण - एक पतलाकर्ता द्वारा की जाती है। संपूर्ण रक्त तनुकरण तैयार करने के बाद, ऑपरेटर को पतला नमूना माप मॉड्यूल में स्थानांतरित करना होगा। वर्तमान में, अर्ध-स्वचालित विश्लेषक व्यावहारिक रूप से उत्पादित नहीं होते हैं।

स्वचालित हेमेटोलॉजी विश्लेषक एक पूरी तरह से स्वचालित उपकरण है जिसमें संपूर्ण विश्लेषणात्मक प्रक्रिया स्वचालित रूप से की जाती है।

आधुनिक स्वचालित विश्लेषक प्रति घंटे दर्जनों नमूनों (60 से 120 तक) को सटीकता और विशिष्टता के अनुसार पुनरुत्पादन के साथ संसाधित करने में सक्षम हैं, साथ ही परीक्षण के परिणामों को अंतर्निहित मेमोरी में संग्रहीत करते हैं और, यदि आवश्यक हो, तो उन्हें अंतर्निहित मेमोरी पर प्रिंट करते हैं। थर्मल प्रिंटर या एक बाहरी प्रिंटर।

आधुनिक हेमटोलॉजिकल विश्लेषकों को रक्त कोशिकाओं के निर्धारित संकेतकों के नामकरण के अनुसार वर्गीकृत किया जाता है।

आठ-पैरामीटर रुधिर विज्ञान विश्लेषकनिम्नलिखित पैरामीटर निर्धारित करें: एकाग्रता एरिथ्रोसाइट्स(आरबीसी) ल्यूकोसाइट्स(डब्ल्यूबीसी) प्लेटलेट्स(पीएलटी) हीमोग्लोबिन(एचबी), साथ ही निम्नलिखित एरिथ्रोसाइट पैरामीटर: औसत एरिथ्रोसाइट मात्रा (एमसीवी), औसत एरिथ्रोसाइट हीमोग्लोबिन सामग्री (एमसीएच), औसत एरिथ्रोसाइट हीमोग्लोबिन एकाग्रता (एमसीएचसी), hematocrit(एचसीटी)।

वर्तमान में आठ-पैरामीटर हेमेटोलॉजिकल विश्लेषक व्यावहारिक रूप से उत्पादित नहीं होते हैं।

रुधिरविज्ञान विश्लेषक वर्ग 3-अंतर. उत्पादित मॉडल के आधार पर कक्षा 3-डिफ के हेमेटोलॉजिकल विश्लेषक, आपको रक्त कोशिकाओं के 16 से 22 संकेतक निर्धारित करने की अनुमति देते हैं। इस वर्ग के विश्लेषक, उन मापदंडों के अलावा जो आठ-पैरामीटर विश्लेषक निर्धारित करते हैं, ल्यूकोसाइट्स की तीन उप-आबादी निर्धारित करते हैं: लिम्फोसाइट्स (एलएम), ग्रैन्यूलोसाइट्स (जीआर) और तथाकथित औसत ल्यूकोसाइट्स (मध्य) की एकाग्रता, साथ ही साथ उनका प्रतिशत एलएम%, जीआर% और मध्य% है। इसलिए वर्ग का नाम 3-diff. इसके अलावा, इस वर्ग के हेमेटोलॉजिकल विश्लेषक एरिथ्रोसाइट वॉल्यूम (आरडीडब्ल्यू) की भिन्नता के गुणांक और प्लेटलेट्स को चिह्नित करने वाले कई संकेतक निर्धारित करते हैं: औसत प्लेटलेट वॉल्यूम (एमपीवी), प्लेटलेट वॉल्यूम का अनुपात (टीसीटी) (हेमेटोक्रिट के अनुरूप), प्लेटलेट मात्रा में भिन्नता का गुणांक (पीडीडब्ल्यू)।

महत्वपूर्ण नैदानिक ​​जानकारी, जो इस वर्ग के हेमटोलॉजिकल विश्लेषकों द्वारा प्राप्त की जा सकती है, एरिथ्रोसाइट्स, ल्यूकोसाइट्स और प्लेटलेट्स की मात्रा द्वारा वितरण कार्य हैं - हिस्टोग्राम।

हेमेटोलॉजिकल विश्लेषक कक्षा 5-डिफ। 5-डिफ हेमेटोलॉजी एनालाइजर और 3-डिफ एनालाइजर के बीच मुख्य अंतर ल्यूकोसाइट्स की सभी 5 उप-आबादी का पता लगाने की उनकी क्षमता है: लिम्फोसाइट्स (लिम), मोनोसाइट्स (मोन), न्यूट्रोफिल (न्यू), बेसोफिल्स (बास) और ईोसिनोफिल्स (ईओएस), साथ ही Lym%, Mon%, Neu%, Bas% और Eos% की उनकी प्रतिशत सामग्री भी। प्रतिबाधा गणना विधि, के रूप में भी जाना जाता है कल्टर काउंटर 3-डिफ एनालाइजर में उपयोग किया जाने वाला, न्यूट्रोफिल, बेसोफिल और ईोसिनोफिल के बीच अंतर करने में सक्षम नहीं है, इसलिए, 5-डिफ एनालाइजर में सेल विभेदन की एक अलग विधि का उपयोग किया जाता है। यह सिद्धांत पर आधारित है विवर्तनल्यूकोसाइट कोशिकाओं पर लेजर विकिरण और बिखरे हुए विकिरण का आगे का विश्लेषण। "औसत" ल्यूकोसाइट्स आकार में इतने भिन्न नहीं होते हैं कि उन्हें प्रतिबाधा विधि द्वारा अलग किया जा सके, लेकिन उनकी एक अलग आंतरिक संरचना होती है और वे रंगों के साथ अलग तरह से बातचीत करते हैं। और विवर्तन पैटर्न का पता लगाने की विधि कोशिकाओं की आंतरिक संरचना के प्रति संवेदनशील होती है। इस प्रकार, एरिथ्रोसाइट्स और प्लेटलेट्स की गिनती एक कूल्टर काउंटर द्वारा की जाती है, और ल्यूकोसाइट्स की गिनती एक अलग लेजर इकाई द्वारा की जाती है।

बफर समाधानों के पीएच की गणना हेंडरसन-हैसलबैक समीकरण के अनुसार की जाती है:

- एसिड बफर के लिए, समीकरण का रूप है

- मुख्य बफ़र के लिए

समीकरण दर्शाते हैं कि किसी दिए गए संघटन के बफर समाधान का pH अम्ल और नमक या क्षार और नमक की सांद्रता के अनुपात से निर्धारित होता है, और इसलिए यह तनुकरण पर निर्भर नहीं करता है। जब समाधान की मात्रा बदलती है, तो प्रत्येक घटक की सांद्रता समान संख्या में बदलती है।

बफ्फर क्षमता

स्थिर पीएच बनाए रखने के लिए बफर समाधान की क्षमता सीमित है। वे। बफर समाधान के पीएच में महत्वपूर्ण बदलाव किए बिना एसिड या क्षार जोड़ना केवल सीमित मात्रा में ही संभव है।

एसिड और क्षार मिलाए जाने पर माध्यम की प्रतिक्रिया में बदलाव का प्रतिकार करने के लिए बफर समाधान की क्षमता को दर्शाने वाले मूल्य को समाधान की बफर क्षमता (बी) कहा जाता है।

बफर क्षमता को एक मजबूत एसिड या बेस के मोल समकक्षों की संख्या से मापा जाता है, जिसमें 1 लीटर बफर समाधान जोड़ने से पीएच एक से बदल जाता है।

गणितीय रूप से, बफर क्षमता को इस प्रकार परिभाषित किया गया है:

बी एसिड द्वारा (मोल/एल या एमएमओएल/एल):

,

जहां n(1/z HA) एसिड के मोल समकक्षों की संख्या है, पीएच 0 और पीएच एसिड जोड़ने से पहले और बाद में बफर समाधान का पीएच है, वी बी बफर समाधान की मात्रा है।

क्षार में (mol/l या mmol/l):

,

जहां n (1/z VOH) क्षार के मोल समकक्षों की संख्या है, शेष पदनाम समान हैं।

बफर क्षमता कई कारकों पर निर्भर करती है:

1. बफर समाधान के जोड़े गए पदार्थों और घटकों की प्रकृति से। क्योंकि कुछ पदार्थ अघुलनशील यौगिक या कॉम्प्लेक्स बना सकते हैं या बफर सिस्टम के घटकों के साथ अन्य अवांछनीय प्रतिक्रिया दे सकते हैं, तो बफर क्षमता की अवधारणा अपना अर्थ खो देती है।

2. बफर सिस्टम के घटकों की प्रारंभिक सांद्रता से।

घोल में एसिड-बेस जोड़ी के घटकों की संख्या जितनी अधिक होगी, इस घोल की बफर क्षमता उतनी ही अधिक होगी।

बफर समाधान के घटकों की सांद्रता के अनुपात की सीमा, जिस पर सिस्टम अभी भी अपने गुणों को बरकरार रखता है। pH अंतराल = pK ± 1 को सिस्टम की बफर क्रिया का क्षेत्र कहा जाता है। यह 1/10 से 10/1 तक नमक/C के अनुपात की सीमा से मेल खाता है।

बी से (रक्त) = 0.05 मोल/ली; बी से (प्लाज्मा) = 0.03 मोल/ली; बी से (सीरम रक्त) = 0.025 मोल/ली

रक्त बफर सिस्टम

जीवों के एसिड-बेस संतुलन को बनाए रखने में बफर सिस्टम विशेष रूप से महत्वपूर्ण हैं। अधिकांश अंतःकोशिकीय तरल पदार्थों का pH मान 6.8 से 7.8 के बीच होता है।

मानव रक्त में एसिड - बुनियादी संतुलन हाइड्रोकार्बोनेट, फॉस्फेट, प्रोटीन और हीमोग्लोबिन बफर सिस्टम द्वारा प्रदान किया जाता है। रक्त प्लाज्मा का सामान्य pH मान 7.40 ± 0.05 है।

हीमोग्लोबिन बफर सिस्टम रक्त की 35% बफर क्षमता प्रदान करता है: . ऑक्सीहीमोग्लोबिन कम हीमोग्लोबिन की तुलना में अधिक मजबूत एसिड है। ऑक्सीहीमोग्लोबिन आमतौर पर पोटेशियम नमक के रूप में होता है।

कार्बोनेट बफर सिस्टम : शक्ति की दृष्टि से प्रथम स्थान पर है। इसे 1/20 के अनुपात में कार्बोनिक एसिड (H 2 CO 3) और सोडियम या पोटेशियम बाइकार्बोनेट (NaHCO 3, KHCO 3) द्वारा दर्शाया जाता है। शरीर में एसिड-बेस गड़बड़ी को ठीक करने के लिए बाइकार्बोनेट बफर का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है।

फॉस्फेट बफर सिस्टम . डायहाइड्रोफॉस्फेट में एक कमजोर एसिड के गुण होते हैं और यह रक्तप्रवाह में प्रवेश करने वाले क्षारीय उत्पादों के साथ परस्पर क्रिया करता है। हाइड्रोफॉस्फेट में कमजोर क्षार के गुण होते हैं और यह मजबूत एसिड के साथ प्रतिक्रिया करता है।

प्रोटीन बफर प्रणाली अपने उभयचर गुणों के कारण एसिड और क्षार को निष्क्रिय करने की भूमिका निभाती है: अम्लीय वातावरण में, प्लाज्मा प्रोटीन आधार की तरह व्यवहार करते हैं, मूल वातावरण में वे एसिड की तरह व्यवहार करते हैं:

ऊतकों में बफर सिस्टम भी मौजूद होते हैं, जो ऊतकों के पीएच को अपेक्षाकृत स्थिर स्तर पर बनाए रखने में योगदान देते हैं। मुख्य ऊतक बफ़र्स प्रोटीन और फॉस्फेट हैं। पीएच को बनाए रखने का काम फेफड़ों और किडनी की मदद से भी किया जाता है। अतिरिक्त कार्बन डाइऑक्साइड को फेफड़ों के माध्यम से हटा दिया जाता है। एसिडोसिस के साथ गुर्दे अधिक एसिड मोनोबैसिक सोडियम फॉस्फेट का स्राव करते हैं, और क्षारीयता के साथ - अधिक क्षारीय लवण: डिबासिक सोडियम फॉस्फेट और सोडियम बाइकार्बोनेट।

समस्या समाधान के उदाहरण

समाधान:

हम सूत्र का उपयोग करके एसिड बफर समाधान के पीएच की गणना करते हैं

उत्तर: 5,76

समाधान:

हम सूत्र का उपयोग करके बफर क्षमता की गणना करते हैं:

उत्तर: 0.021 मोल/ली

उदाहरण 3

बफर समाधान में 100 मिली 0.1 मोल/लीटर एसिटिक एसिड और 200 मिली 0.2 मोल/लीटर सोडियम एसीटेट होता है। यदि इस घोल में 30 मिलीलीटर 0.2 mol/l सोडियम हाइड्रॉक्साइड घोल मिलाया जाए तो इसका pH कैसे बदल जाएगा?

समाधान:

हम सूत्र का उपयोग करके बफर समाधान के पीएच की गणना करते हैं:

जब NaOH को बफर घोल में मिलाया जाता है, तो नमक की मात्रा बढ़ जाती है और बफर घोल में एसिड की मात्रा कम हो जाती है:

0,006 0,006 0,006

CH 3 COOH + NaOH = CH 3 COONa + H 2 O

हम n (NaOH) \u003d 0.03 l 0.2 mol / l \u003d 0.006 mol की गणना करते हैं, इसलिए, बफर समाधान में एसिड की मात्रा 0.006 mol कम हो जाती है, और नमक की मात्रा 0.006 mol बढ़ जाती है।

हम सूत्र का उपयोग करके समाधान के पीएच की गणना करते हैं:

इसलिए: पीएच 2 - पीएच 1 = 5.82 - 5.3 = 0.52

उत्तर:बफर पीएच परिवर्तन = 0.52.

स्वतंत्र समाधान के लिए कार्य

4. पीएच को प्रारंभिक मान (7.36) से अंतिम मान (7.0) में बदलने के लिए 2 मिलीलीटर रक्त का अनुमापन करने के लिए, 0.01 एम एचसीएल समाधान का 1.6 मिलीलीटर जोड़ना आवश्यक था। एसिड बफर क्षमता की गणना करें।

5. हाइड्रोजन आयनों की सांद्रता को 300 गुना कम करने के लिए 300 मिलीलीटर एसिटिक एसिड में कितने मोल सोडियम एसीटेट मिलाया जाना चाहिए (K dis (CH 3 coon) = 1.85.10 -5)।

6. जैव रासायनिक अध्ययन में, pH = 7.4 वाले फॉस्फेट बफर का उपयोग किया जाता है। ऐसा बफर घोल (pK (H 2 PO 4 -) = 7.4) प्राप्त करने के लिए सोडियम हाइड्रोजन फॉस्फेट और सोडियम डाइहाइड्रोजन फॉस्फेट के घोल को 0.1 mol/l की सांद्रता के साथ किस अनुपात में मिलाया जाना चाहिए।

7. निम्नलिखित संकेतकों के साथ सीबीएस का कौन सा उल्लंघन देखा जाता है: रक्त पीएच = 7.20, पीसीओ 2 = 38 मिमी एचजी। कला., बीओ = 30 एमएमओएल/एल, एसबीओ = -4 एमएमओएल/एल. KOS के इस उल्लंघन को कैसे दूर करें?

परीक्षण कार्य

इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री के लिए ट्वीन-20 फॉस्फेट वॉश बफर एक सांद्रण (20x) है, जिसका उपयोग कमजोर पड़ने के बाद अभिकर्मकों की स्लाइडों को धोने और प्रक्रियाओं के बीच इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री नमूनों के अल्पकालिक भंडारण के लिए किया जाता है। तनुकरण के बाद, उपयोग के लिए तैयार 0.01 एम घोल का पीएच 7.4±0.1 है। इस फॉस्फेट-बफर खारा का उपयोग न केवल उच्च गुणवत्ता वाली धुलाई प्रदान करने की अनुमति देता है, बल्कि उपयोग किए गए एंटीबॉडी और उनके एपिटोप्स की रूपात्मक विशेषताओं को संरक्षित करने की भी अनुमति देता है, जो इम्यूनोहिस्टोकेमिकल प्रतिक्रिया के लिए आवश्यक विशिष्ट बंधन की सुविधा प्रदान करता है। पीबीएस में ट्वीन-20 को शामिल करने से अधिक कुशल धुलाई को बढ़ावा मिलता है और गैर-विशिष्ट धुंधलापन को रोकता है।

हमारे फायदे:

फिलहाल हम प्रयोगशाला अभिकर्मकों के अग्रणी विदेशी निर्माताओं के साथ सहयोग कर रहे हैं। हमारे ग्राहक गैर-राज्य और राज्य दोनों संस्थान हैं, जिनमें मॉस्को और रूस के अन्य शहरों में चिकित्सा संगठन शामिल हैं। नियमित ग्राहकों के लिए छूट की व्यवस्था है।